Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Аркадьева З.А. -> "Промышленная микробиология" -> 39

Промышленная микробиология - Аркадьева З.А.

Аркадьева З.А., Безбородое А.М., Блохина И.Н. Промышленная микробиология — M.: Высш. шк., 1989. — 688 c.
ISBN 5—06—001482—7
Скачать (прямая ссылка): promishmicrobiol1989.pdf
Предыдущая << 1 .. 33 34 35 36 37 38 < 39 > 40 41 42 43 44 45 .. 297 >> Следующая

' Уровень продукции (накопление в среде) вещества (антибиотика, аминокислоты и т. д.) обозначают в единицах массы на объем культуральной жидко: сти после определенного периода культивирования микроорганизма: мкг/л, г/л и т. д.; если продукт микробного синтеза — экзогенный фермент, то его характеризуют единицами активности, что может отражать и количество фермента, и его активность. Для краткости в дальнейшем мы будем употреблять термин «уровень продукции» по отношению ко всем продуктам микробного синтеза.
4—1093
81
Отобранный из рассева исходной культуры клон снова рассева ют, отмечают морфологическую изменчивость, если она есть, и затем оценивают по уровню продукции не менее 100 типичных для данного клона изолированных на косяки колоний. Целесообразно значения уровней продукции таких субклонов, выраженные в процентах по отношению к продукции исходного для них (родительского) клона, распределить в вариационном ряду и вычислить статистические показатели: среднее арифметическое X, квадратиче_ское отклонение о и коэффициент изменчивости cv = g-100/X. Субклоны, попавшие в крайнюю правую часть этого ряда, отбирают, повторно оценивают по уровню продукции и оставляют один из них. Этот субклон рассевают и, как и в предыдущем случае, проверив не менее 100 колоний, строят вариационный ряд и вычисляют его показатели. Получив таким образом два вариационных ряда, сравнивают значения cv этих рядов. Если эти значения достоверно не различаются, можно подготовку исходного штамма для дальнейшей селекции закончить отбором субклона из первого вариационного ряда, а второй ряд (собственный ряд этого субклона) считать контрольным для следующего этапа селекции с применением мутагенных факторов. При обнаружении у cv второго ряда явной тенденции к уменьшению целесообразно провести еще один этап клонирования, выбрав из правой части второго ряда «лучший» клоп, построить третий вариационный ряд на основе его рассева и определить cv. После сравнения значений cv второго и третьего рядов дальнейшее клонирование прекращают, если cv обоих рядов не различаются, и продолжают, если cv третьего ряда снижается. Цель такого ступенчатого клонирования «стабилизировать» исходную культуру по количественному признаку, получив на основе действия стабилизирующего отбора наиболее однородную по данному признаку популяцию как надеждый контроль при оценке индуцируемой мутагенами изменчивости и последующем отборе мутантов. Следует иметь в виду, что однородность отобранной культуры снижается при многократном пассировании и длительном хранении. Поэтому исходную культуру, которая должна служить контролем при отборе мутантов, необходимо поддерживать периодическим клонированием, проводимым в установленные для данной культуры промежутки времени. Повысить уровень продукции таким клонированием, т. е. отобрать мутант, как правило, не удается. Средний уровень продукции клонов, отбираемых из правой части вариационного ряда, построенного на основе естественной изменчивости культуры, обычно равен среднему уровню продукции родительской культуры.
В том случае, когда исходная культура нуоісное вещество не продуцирует, следует выбрать из ее рассева колонию, которая по таксономической характеристике полностью соответствует данному виду микроорганизма, и использовать этот клоп в дальнейшей работе с применением мутагенов.
82
4.3. ПОЛУЧЕНИЕ МУТАНТОВ
Разнообразные типы мутаций получают с помощью различных физических и химических мутагенных факторов. Биологический материал, подвергаемый воздействию мутагенных факторов, должен быть дискретным и содержать минимальное количество ядер, что позволяет устранить или сократить стадию сегрегации. Обычно это споры, вегетативные клетки или даже обрывки мицелия у неспорулирующих организмов. Суспензия, содержащая клетки или споры, должна быть по возможности лишена комков — конгломератов, так как мутация в одной из клеток конгломерата при прорастании его на агаризованиой среде будет утрачена или в лучшем случае проявится в виде сектора. Комки разбивают на качалке, фильтруют суспензию, но полностью избавиться от их присутствия в обрабатываемой мутагеном суспензии обычно не удается.
Физическими факторами (УФ-излучеиие и различные виды ионизирующей радиации) обрабатывают водную суспензию спор или клеток. При обработке химическими факторами (чаще всего это алкилирующие агенты: алкилметаисульфоиаты, алкил-сульфаты, алкилиитрозомочевина, метилнитрозогуаиидин и др.) следует соблюдать условия, способствующие максимальному проявлению мутагенной активности данного вещества. Большую роль в этом отношении играет pH раствора, поэтому обработку проводят в буферных растворах при наиболее эффективных для данного мутагена значениях pH. При этом надо иметь в виду, что один и тот же мутаген для разных микроорганизмов может быть активен при разных значениях pH. Показано, хотя и на разных типах мутаций, что метилнитрозогуаиидин у кишечной палочки и дрожжей наибольшее число мутантов индуцирует при pH 6,0—6,5, а у актиномицетов — при 9,0. Иногда химический мутаген более эффективен в газовой фазе, а не в жидкой фазе.
Предыдущая << 1 .. 33 34 35 36 37 38 < 39 > 40 41 42 43 44 45 .. 297 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама