Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 10

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 4 5 6 7 8 9 < 10 > 11 12 13 14 15 16 .. 106 >> Следующая

Таким образом, микроскопия в темном поле позволяет увидеть объекты, лежащие за пределами видимости обычного микроскопа. Необходимо отметить, что при наблюдении объектов в темном поле различают только их контуры (особенно это относится к очень мелким объектам), что не дает возможности судить об их внутреннем строении.
В темном поле лучше всего наблюдать живые культуры микроорганизмов в препарате "раздавленная капля". Препарат готовят на тонком предметном стекле (не толще 1,2 мм), предварительно тщательно очищенным. Препарат помещают на столик микроскопа и фокусируют с объективом 8Х. После этого приступают к замене
36
светлопольного конденсора на темнопольный и центрировке света, для чего последовательно выполняют следующие операции:
1. Вынимают светлопольный конденсор и окуляр, вывинчивают один из объективов. Револьвер микроскопа МБИ-I имеет одно свободное от объективов отверстие, закрытое специальной заглушкой, так что можно воспользоваться этим отверстием, вывинтив заглушку.
2. Закрыв диафрагму осветителя, фокусируют изображение нити лампы на зеркале, прикрытом кружком белой бумаги (как при установке света по Кёллеру). Предварительно необходимо с помощью реостата уменьшить яркость света.
3. Открнвают диафрагму осветителя. Помещают на верхний конец тубуса микроскопа (на место' окуляра) матовое стекло и, слегка поворачивая зеркало, добиваются равномерного освещения поля. После этого зеркало перемещать нельзя.
4. Вставляют окуляр, устанавливают объектив 8Х и осторожно, не задевая зеркала, устанавливают темнопольный конденсор. Последний устанавливают таким образом, чтобы белый винт был обращен в сторону штатива микроскопа, а два регулировочных винта - в сторону осветителя. Надевают на регулировочные винты ключи.
5. Препарат сдвигают в сторону, на верхнюю линзу конденсора наносят каплю иммерсионного масла и несколько опустив конденсор снова устанавливают препарат, закрепив его клеммами.
6. Поднимают конденсор вверх до соприкосновения маслянной капли с предметным стеклом. Капля должна равномерно заполнить пространство между линзой конденсора и предметным стеклом и не содержать пузырьков воздуха. В противном случае операцию сле-
37
дует повторить, увеличив масляную каплю.
7. Отключают реостат осветителя,т.е. получают максимальное освещение.
8. Глядя в окуляр, центрируют конденсор. Для этого с помощью регулировочных винтов приводят точно в центр поля зрения изображение светлого кольца с темным пятном в середине (или только светлого пятна).
9. Слегка поднимая или опуская конденсор, устанавливают его в таком положении, чтобы в световой картине исчезло темное пятно и в поле зрения осталось только замкнутое светлое пятно.
10.Ставят объектив 4ЭХ и фокусируют препарат.
Фазово-контрастная микроскопия
Большинство препаратов живых микроорганизмов слабо контрастны, т.е. клетки мало отличаются по окраске и прозрачности от окружающей среды. Это объясняется тем, что лучи света, проходящие через клетки, почти не отличимы от лучей, проходящих через окружающую среду. Между тем, световая волна испытывает определенные изменения: проходя через участки препарата, имеющие больший, чем у окружающей среды показатель преломления, световая волна меняет фазу - выходит из более плотной области с некоторым отставанием по фазе относительно соседних ролн. Такие препараты называются "фазовыми". Но, как известно, глаз человека не в состоянии заметить различный по фазе, а выявляет только различия в длине волны (цвета) и в амплитуде (контрастность). Действительно, неокрашенные живые объекты хорошо видны только в том случае, когда они в достаточной мере непрозрачны, в так называемых "амплитудных".контрастных препаратах,где часть энер-
38
гии света, проходящего через более плотные участки, поглощается. Выходящая из такого участка волна имеет меньшую амплитуду, и это место воспринимается глазом наблюдателя как более темное. Превратить "фазовый" (неконтрастный) препарат в "амплитудный" (контрактный) можно либо окрашивая бактерии, либо снижая апертуру конденсора'(прикрывая диафрагму). Последнее нежелательно,так как уменьшает разрешающую способность микроскопа. Фазово-контрастное устройство позволяет оптическим путем превращать различия по фазе в изменение амплитуды, в результате чего живые прозрачные объекты становятся контрастными, хорошо видимыми глазом. При этом разрешающая способность микроскопа не снижается.
Оптическая система, используемая для получения фазового контраста (рис.14),состоит из фазовой пластинки, имеющей форму кольца, и специальной кольцевой диафрагмы.
Рис.14. Схема хода лучей при использовании фазово-контрастного устройства.1-кольцевая диафрагма;2-конденсор;3-объект;
4-ооъектив;5-фазовая пластинка.
I
39
Фазовая пластинка представляет собой круг напыления из солей редких металлов на одну из линз объектива. Эта пластинка обеспечивает изменение фазы проходящей волны света на 1/4 А ,что приводит к превращению фазовых различий в амплитудные. Кольцевая диафрагма представляет собой непроницаемую для света пластинку^ которой имеется прозрачная щель в виде кольца. Помещенная под конденсором кольцевая диафрагма пропускает в плоскость препарата лишь кольцо света. Для получения фазового эффекта необходимо точное совмещение фазового кольца с проекцией кольцевой диафрагмы.
Предыдущая << 1 .. 4 5 6 7 8 9 < 10 > 11 12 13 14 15 16 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама