Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 11

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 106 >> Следующая

Устройство;применяемое для наблюдения методом фазового контраста (рис.15), представляет собой приставку к микроскопу (в настоящее время наиболее широко применяется модель 10-4), состоящую из вспомогательного микроскопа,специальных фазовых объективов и конденсора с набором кольцевых диафрагм каждая из которых соответствует фазовой пластинке определенного объектива. Кольцевые диафрагмы установлены в револьверном диске под конденсором и поворотом диска могут легко меняться,причем в окне крышки диска появляется цифра,соответствующая увеличению применяемого объектива. Кроме того, в револьверном диске имеется свободное отверстие - "нулевая диафрагма"для тех случаев, когда конденсор необходимо использовать для наблюдений обычным способом. Конденсор снабжен двумя винтами для центрировки кольцевой диафрагмы относительно фазового кольца объектива. Все фазовые объективы имеют на оправе обозначение (на импортных объективах встречается обозначение " Ph"). Ими можно пользоваться и для обычной микроскопии,но из-за наличия фазового кольца они дают изображение пониженного качества.
40
и
Рис.15. Фазовоконтрастное устройство КФ-4.
1-конденсор; 2-револьверный диск с набором кольцевых диафрагм; 3-центрировочные винты; 4-вспомогательный микроскоп; 5-набор фазовых объективов.
Методика исследования живых культур микроорганизмов с фазовоконтрастным устройством сводится к следующему:
1. Удаляют из микроскопа обычный конденсор и на его месте устанавливают фазово-контрастный. Диск револьвера конденсора поворачивают таким образом, чтобы в окошке стояла цифра "О". Ирисовая диафрагма конденсора должна быть открыта.
2. Заменяют объектив 40Х на фазовый объектив 40Х$.
3. На предметный столик помещают препарат "раздавленная капля". Устанавливают свет по Келлеру, пользуясь объективом 8Х.
4. Устанавливают объектив 40ХФ.
б. Заменяют окуляр на вспомогательный микроскоп и,перемещая тубус последнего, добиваются четкой фокусировки фазовой
41
пластинки объектива. Она имеет вид темного кольца.
6. Поворотом диска револьвера, включают кольцевую диафрагму^ соответствующую объективу 40ХФ. Теперь при наблюдении во вспомогательный микроскоп видно не только фазовое кольцо, но и светлое кольцо - щель диафрагмы.
7. Пользуясь центрировочными винтами конденсора, перемещают кольцевую диафрагму тале, чтобы она совместилась с фазовым кольцом ( рис. 16). Если ширина темного кольца (фазовой пластинки) больше, чем ширина светлого кольца (щель диафрагмы), то необходимо, чтобы светлое кольцо вписалось в контур темного кольца концентрично.
8. Вынимают вспомогательный микроскоп, вставляют окуляр и фокусируют препарат.
9. При микроскопировании с другими объективами устанавливают соответствующие кольцевые диафрагмы и каждый раз проверяют центрировку, пользуясь
вспомогательным микроскопом. Рис.16. Центрировка
кольцевой диафрагмы и фазовой пластинки: A-неправильное положение; Б-правильное положение.
Интерференционная микроскопия
Как и фазово-контрастная микроскопия,"интерференционная микроскопия основана на возможности преобразования различия фаз в различия интенсивностей. Наиболее эффективная система (система Дайсена) состоит из сложного комплекса посеребренных
42
\
: X
поверхностей и рефлекторов, который делит свет, выходящий от объекта, на части, одна из которых проходит через окружающую среду и сдвигающую фазовую пластинку. При последующей рекомбинации с остальной частью света,которая не подвергалась сдвигу по фазе,происходит интерференция. При этом сдвиги по фазе,обусловленные различиями показателей преломления и (или) толщин участков объекта,преобразуются в различия интенсивностей. При использовании белого света эти участки будут иметь различную окраску, тогда как в монохроматическом свете будет наблюдаться только различие интенсивностей. Интерференционный микроскоп очень сложен по устройству.Он позволяет получать контрастное изображение объекта без ореола в отличие от фазово-контрастной микроскопии.Причем, с помощью этого микроскопа можно увидеть мелкие детали, которые не доступны для фазового метода.Кроме того,интерференци онный микроскоп позволяет проводить количественные измерения, в отличие от фазово-контрастного микроскопа. Например,можно измерить разность длин оптического пути между частицей и окружающей средой.Поскольку длина пути определяется показателем преломления и толщиной, то можно измерить один из этих параметров.если другой известен.Более того,можно определить концентрацию известного вещества,если известны показатель преломления и удельный инкремент рефракции (изменение показателя преломления на единицу количества растворенного вещества) .Так, если tij- и пР - показатели преломления белка и растворителя соответственно, то Пе- - ПР =Л-С
где d- - удельный инкремент рефракции, а С - концентрация в граммах на 100 мл.Поскольку tlf и JL - мало изменяются в зависимости от типа белка,то пользуясь этим соотношением, можно ориен-
43
тировочно определить концентрацию белка внутри клетки.
Поляризационная микроскопия.
В поляризационной микроскопии используют плоскополяризован-ный свет, получаемый при пропускании света через поляризатор (например, поляроид или призму Николя).
Предыдущая << 1 .. 5 6 7 8 9 10 < 11 > 12 13 14 15 16 17 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама