Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 13

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 7 8 9 10 11 12 < 13 > 14 15 16 17 18 19 .. 106 >> Следующая

ющей свет, помещают между объективом и глазом наблюдателя. Таким образом в отсутствие флуоресцентного объекта в глаз не будет попадать свет и поле будет черным. Если же объект флуоресцирует, то он будет контрастно выделяться на окружающем фоне.
Для анализа слабой флуоресценции необходимо использовать покровные стекла, предметные стекла и линзы из нефлуоресцирующего стекла, поскольку любой из этих элементов может подсвечивать поле фона в достаточной степени. I
В люминесцентной микроскопии большое значение имеет вторичная люминесценция, которая появляется после обработки исследуемых объектов специальными красителями (флуорохромами), обладающими способностью светиться под действием длинных ультрафиолетовых и коротких сине-фиолетовых лучей. Флуорохромы могут быть синтетические и естественные; они применяются в больших разведениях (порядка 0,0001-0,00001^). Наиболее часто применяются ,
следующие флуорохромы: акридин оранжевый, аурамин, корифосфин, флуоресцин, уранин, родамин, риванол, акрихин, тиофлавин и др.
В люминесцентном микроскопе можно'исследовать живые прозрачные и непрозрачные объекты. Они видны цветными, более крупными и контрастными.
гкостъ
ажения
Рис.19. Оптическая схема флуоресцентного микроскопа. I-источник света; 2-фильтр (отделяет А * Л,); 3-конденсор; 4-объектив; 5-фильтр(отделяет Л|).
48
С помощью флуоресцентной микроскопии можно увидеть компоненты,которые трудно увидеть при применении других методов,локализовать вещество путем специфического связывания и определить ориентацию с помощью поляризационной флуоресценции.
Электронная микроскопия.
В электронной микроскопии пучок света заменен потоком электронов. Длина волны электронных лучей во много раз короче длины световых лучей,что позволяет получить большее увеличение и рассматривать объекты,невидимые в световом микроскопе. Электронные микроскопы бывают разных систем. Наибольшее распостранение получили микроскопы просвечивающего типа. По разрешавщей способности их делят на три класса: к первому классу относят микроскопы с разрешением равным 100-150 нм, ко второму классу - микроскопы с разрешающей способностью 200-300 нм и к третьему микроскопы с разрешением равным 500-1500 нм. В настоящее время имеются микроскопы с разрешающей способностью менее 100 нм. Отечественный универсальный микроскоп ЭМВ-150 имеет разрешающую способность 50 нм,а Японские НИ-ПЕ (фирма Hitachi ) и JEM -I00B (фирма JEOL ) соответственно 15 и 20 нм (рис.20).
В электронном микроскопе линзами являются электрические или магнитные поля соответствующей конфигурации. Источником электронов служит катод,представляющий собой тонкую вольфрамовую нить,закрепленную в специальном держателе пушки. Движение электронов осуществляется по направлению к аноду,который укреплен в верхней части конденсорной линзы,за конденсорной линзой размещена камера объекта,она вместе с объективной линзой представляет одно целое.Затем электроны проходят через промежуточную линзу и попадают на экран,где и получается изображение (рис.21). Движение электронов происходит в вакууме,так как
49
при столкновении с молекулами газа они отклоняются от первоначального направления,что ведет к ухудшению изображения,а иногда и к полному исчезновению его. При наличии даже небольшого количества воздуха вольфрам на катоде окисляется и выходит из строя.
Рис.20. Схема устройства электронного просвечивающего микроскопа JEM-I00B. I-электронная пушка;2-ваку-умный клапан шлюза пушки;
3-1-я конденсорная линза;
4-2-я конденсорная линза;
5-стигматор 2-ой конденсорной линзы;о-система отклонения пучка;7-держатель об-разца;8-стигматор объективной линзы;9-объективная линза;IO-1-я промежуточная линза;II-2-я промежуточная линза;12-проекционная линза;
13-датчик фотоэкспонометра;
14-фотокамера;15-флуоресци-ругащий экран;16-бинокуляр; 17-механизм селекторной диафрагмы;18-механизм апертурной диафрагмы;19-устройство защиты образца от заг-рязнения;20-магазин для держателей образцов;21-компен-сатор смещения пучка;22-ручки юстировки.
, V

Вот почему создание хорошего вакуума является обязательным условием нормальной работы электронного микроскопа.
Объекты,исследуемые в электронном микроскопе,должны быть
50
прозрачными для электронов и в то же время обладать достаточной прочностью. Исследуемый материал наносят на тонкие пленки-подложки, которые крепятся на опорной сетке, имеющей от 4 до 10 ячеек на I мм^.
Пленки-подложки готовят из раствора коллодия в амилацетате или других веществ.
Для увеличения контрастности рассматриваемых объектов их напыляют .обычно хромом, металл при этом помещают под колпак и нагревают в вакууме до высокой температуры, в результате чего он испаряется. Чем мельче предполагаемый объект, тем меньше должен быть угол наклона препарата по отношению к напылителю.
Напыленный материал на сетке помещают в патрон, закрепляют обоймой, а затем переносят в камеру объекта микроскопа и рассматривают.
~Т>'
Ч
I
Рис.21. Схема хода лучей в электронном микроскопе. I-электронная пушка; 2-кон-денсорная линза; 3-предмет; 4-объектив-ная линза; 5-промежуточное изображение; 6-проекционная линза; 7-окончательное
Предыдущая << 1 .. 7 8 9 10 11 12 < 13 > 14 15 16 17 18 19 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама