Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 21

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 15 16 17 18 19 20 < 21 > 22 23 24 25 26 27 .. 106 >> Следующая

200 300 400 500 600 700
Длина волны, нм
Для большинства молекул длины волн,соответствующие переходам между основным состоянием и любым колебательным уровнем первого возбужденного состояния,лежат в ультрафиолетовой и видимой
78
области спектра. Возможны также низкие по энергии перехода между колебательными уровнями в пределах одного электронного уровня.
Эти переходы получаются в результате поглощения излучения в инфракрасной области.
Вероятность перехода при одной длине волны характеризуется коэффициентом молярной экстинкции поглощающего вещества. Если свет интенсивности 1о проходит через раствор с толщиной слоя d и концентрацией с, интенсивность проведшего света I подчиняется закону Ламберта-Бера:
1 = 110" edc ,т.е. lg(-i-)-edc или ig-^2cedc (3)
Iq х
где ? - коэффициент молярной экстинкции поглощающего вещества при длине волны Л ; с - молярная концентрация раствора;
d - оптический путь, или толщина образца в см.
хп
Величинуig -- в литературе называют поглощением (А),экс-тинкцией (Е) или оптической плотностью ( D ). Отношение интенсивностей прошедшего и падающего света ( i/i0) называется пропусканием (Т).
Пропускание (Т) обычно измеряется в процентах и меняется от 0 до 100^. Экстинкция - величина безразмерная и изменяется от О до о° . Поскольку коэффициент молярной экстинкции, как правило, довольно большой, используют другую величину - поглощение света образцом толщиной в I см,содержащим однопроцентный раствор исследуемого вещества Ej^. Закон Ламберта-Бэра применим не для всех систем. Во-первых,при поглощении света образец мо-' жет ионизироваться, а при высоких концентрациях - полимеризо-ваться. Иногда образец при облучении коагулирует, образуя мутную суспензию. Эти эффекты увеличивают или уменьшают экстинк-цию.
79
Измерение поглощения осуществляют с помощью спектрофотометра. Несмотря на различия в конструкции принципиальная схема всех спектрофотометров одинакова. Они состоят из источника света,монохроматора (для выделения определенной длины волны), прозрачной кюветы, куда помещается образец, детектора света и измерительного прибора или самописца для регистрации выходного сигнала детектора. (рис.33).
в
Рис.33. Схематическое устройство спектрофотометра.
Свет от лампы I проходит через монохроматор 2 для выделения пучка света с определенной длиной волны. Образец 3 и растворитель 4 содержатся в двух кюветах,помещенных в держатель кювет5. Свет проходит через кювету и падает на фотоэлемент 5, выходной сигнал которого регистрируется измерительным прибором 7. Держатель кюветы находится на направляющих 8, так что каждая кювета может быть независимо помещена в пучок лучей.
Ход работы обычно следующий: измеряют при одной длине волны интенсивность света,проходящего через растворитель (который может быть буфером), затем следует измерение интенсивности' света, проходящего через раствор изучаемого вещества, в том же растворителе. Далее фиксируется изменение в интенсивности света, по которому можно судить о поглощении света раст-
60
зоренным веществом. На практике прибор настраивают таким образом, чтобы он показывал нулевое поглощение при прохождении света через растворитель. Осуществив такую настройку, можно снимать показания, соответствующие непосредственно поглощению образца. Для получения спектра эта операция повторяется при многих длинах волн. Некоторые приборы,называемые автоматическими двухлучевыми регистрирующими спектрофотометрами, позволяют осуществлять развертку длин волн и одновременно измерять поглощение образца и растворителя (которые находятся в различных кюветах) и фиксировать с помощью электронного оборудования суммированный поток излучений. При этом самописец на бумажной ленте вычерчивает спектр. *
Абсорбционная спектроскопия в видимой и УФ -областях спектра находит широкое применение в биохимических исследованиях.
Она может быть использована для измерения концентрации веществ в растворе, исследования химических реакций, идентификации веществ и определения некоторых структурных параметров макромолекул (например, переход спираль-клубок в двухцепочной ДНК и белках, спектрофотометрическое титрование белков, ассоциация белка, связывание с белками малых молекул и др.).
Метод распределительной хроматографии на бумаге.
В зависимости от физико-химических факторов, определяющих основной механизм процесса, методы хроматографического анализа делятся на четыре основных вида: адсорбционные, распределительные, ионнообменные и осадочные.
Для разделения смеси веществ часто применяют метод распре-
81
делительной хроматографии. Он основан на различной степени распределения компонентов смеси между двумя несмешивающшися жидкими фазами (неподвижной,чаще всего, водной фазой и подвижной фазой органического растворителя).
Органический растворитель , насыщенный водой, проходя через полоску фильтровальной бумаги, увлекает за собой вещества, раствор которых был нанесен на бумагу. Вода при этом связывается волокном бумаги. Различные вещества передвигаются по бумаге с неодинаковой скоростью, Скорость перемещения компонентов смеси зависит от многих факторов: строения молекул веществ, их способности легко растворяться в органическом растворителе или в воде, избирательной адсорбции на бумаге, типа бумаги, условия проведения анализа и т.д. Чем лучше растворяется данный компонент 'смеси в органическом растворителе, тем больший путь он пройдет с ним по бумаге, и наоборот.
Предыдущая << 1 .. 15 16 17 18 19 20 < 21 > 22 23 24 25 26 27 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама