Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 23

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 17 18 19 20 21 22 < 23 > 24 25 26 27 28 29 .. 106 >> Следующая

При разделении веществ нисходящим током растворителя хроматографическую бумагу вставляют в сухую лодочку. Предварительно нижний конец бумаги загибают по линии, проведенной простым карандашом на расстоянии 10-15 мм. Чтобы бумага не выскользнула из лодочки при прохождении растворителя, ее закрепляют стеклянной пластинкой или палочкой. Пластинку или палочку помещают в лодочку внутрь изгиба бумаги. Только после этого в кювету через воронку наливают подвижную фазу растворителя, насыщенную неподвижной. Неподвижную фазу наливают на дно камеры (или наливают в химический стакан и ставят на дно камеры). Продолжительность' однократного пропускания растворителя через хроматограмму различна. Она зависит от состава растворителя, температуры, сорта бумаги. В ряде случаев для лучшего разделения веществ растворитель пропускают 2-3 раза. Перед повторным пропусанием хроматограмму высушивают.
После последнего пропускания хроматограмму вынимают из
86
камеры, отмечают простым карандашом линию фронта растворителя, а затем высушивают. Вещества анализируемой смеси обнаруживают на хроматограмме (проявляют) по-разному.Например,чтобы обнаружить вещества,поглощающие ультрафиолетовые лучи или обладающие способностью люминесцировать, хроматограммы просматривают, используя ультрахемоскоп. Выявленные пятна обводят простым карандашом. Чаще же используют проявители,образующие с анализируемыми веществами окрашенные соединения. В этом случае хроматограмму опрыскивают проявителем из пульверизатора или проводят через раствор проявителя, предварительно налитый в кювету. Затем хроматограмму высушивают, выявленные пятна обводят простым карандашом. В ряде случаев для развития максимальной окраски хроматограмму выдерживают определенное время при повышенной температуре.
Приготовление растворителей, заполнение хроматографической камеры, высушивание и проявление хроматограмм проводят в вытяжном шкафу.
После проявления хроматограмм определяют подвижность обнаруженных компонентов анализируемой смеси и свидетелей. Подвижность характеризуют коэффициентом Rf , который представляет собой отношение величины смещения зоны вещества к величине смещения фронта растворителя на хроматограмме.¦
где, а - расстояние от линии старта (места нанесения вещества на хроматограмме) до середины пятна данного вещества на хроматограмме после проявления;
Ъ - расстояние от линии старта до линии фронта растворителя на той же хроматограмме.
87
Каждое вещество имеет определенное значение коэффициента Rf, которое может меняться в зависимости от вида применяемой бумаги, растворителя,количества разделяемых веществ,температуры,pH среды и других факторов.Значение Rf для данного компонента анализируемой смеси является величиной,постоянной только в строго определенных условиях.Поэтому при идентификации веществ по величине сравнивают Hf исследуемого соединения и Rf свидетеля, нанесенного на хроматограмму одновременно с анализируемой смесью. Однако,одинаковая величинаR^ свидетеля и исследуемого вещества в одной системе растворителя еще не достаточна для окончательной идентификации. Необходимо сравнить величину Rf свидетеля и исследуемого соединения в разных системах растворителя, а так же дополнить хроматографические данные специфическими ка -чественными реакциями.
Метод гель-хроматограсЬии. Оборудование и применение.
Метод гель-проникающей хроматографии предназначен для разделения молекул различающихся по размерам. Он может быть использован для решения проблем как аналитического,так и препаративного характера.
Разделение молекул происходит наиболее эффективно при использовании гранулированного геля, который представляет собой слой мелких гранул,имеющих поры. В настоящее время химическая промышленность выпускают гели-сефадексы,молселекты,биогели-Р и др. Характеристику различных марок гелей можно найти в справочнике А.А.Лурье "Сорбенты и хроматографические носители", Москва,издательство "Химия",1972. Обычно гель характеризуется величиной предела эксклюзии (т.е. величиной молекулярной массы
88
самых крупных молекул, еще способных проникать в поры гранул), диапозоном фракционирования веществ по молекулярной массе, поглощением воды (мл/г), удельным объемом в колонке (см^/г), временем полного набухания и зернениемС меш или мкм).
В ситовом анализе часто используют ситовую шкалу с характеристикой сита в мешах.(меш-число отверстий на I погонный дюйм сита). В основу этой шкалы положено сито 200 меш с отверстиями размером 0,074 мм и диаметром проволоки 0,056 мм. Ширина отверстия в каждом последующем сите увеличивается по сравнению с предшествующим ситом в 1,19 раза, а площадь отверстия - в 1,41 раза. Так в последующем сите,после сита взятого за основу, ширина отверстия будет 0,088 мм. На одном погонном дюйме такого сита число отверстий равно 170. Это и есть характеристика сита
- Т70 меш. При характеристике крупности зерен в мешах имеется в виду, что зерна с указанным числом меш проходят через сито, характеризующееся тем же числом меш.
Для гель-хроматографии наиболее часто используют сефадексы-гранулированные поперечносшитые декстраны (полисахариды). В рабочем состоянии сефадексы уравновешены необходимыми буферными растворами (рабочая область pH-2fI0). При пропускании смеси веществ через слой гранулированного геля, находящегося в стеклянной колонке, молекулы, имеющие размер больше, чем размер пор гранул геля, проходят через колонку с сефадексом без проникновения внутрь частиц геля, и элюируемый объем (т.е. объем буфера, который вымывает эти молекулы с колонки) равен свободному объему (незанятому частицами геля объему колонки).
Предыдущая << 1 .. 17 18 19 20 21 22 < 23 > 24 25 26 27 28 29 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама