Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 27

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 21 22 23 24 25 26 < 27 > 28 29 30 31 32 33 .. 106 >> Следующая

101
2. М0Р20Л0ГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ
2.1. ТЕХНИКА ПОДГОТОВКИ МИКРООРГАНИЗМОВ ДЛЯ НАБЛЮДЕНИЯ В ЖИВОМ И УБИТОМ СОСТОЯНИИ.
МЕТОДЫ ОКРАСКИ.
Вопросы для. подготовки по теме
1. Техника приготовления препаратов "раздавленная","висячая" капли и их микроскопия.
2. Техника приготовления фиксированных мазков. Цель и методы фиксации.
3. Простые методы окраски микробов.
4. Сложные методы окраски микроорганизмов:
I) Метод Грамл. Техника и механизм.
Z) Методы Циля-Нильсена, Ожешки и их использование для выявления спор.
3) Метод Романовского-Гимза.
4) Выявление капсул с помощью метода Бурри-Гинса.
' 5) Окраска жгутиков.
•Морфологию микроорганизмов изучают с помощью микроскопии их в неокрашенном или окрашенном виде.
Для приготовления микробиологических препаратов используют бактериологическую петлю, крючок, иглу или пипетки. Для работы с культурами бактерий и дрожжей используют петли, реже иглы и пипетки. Культуры грибов берут с помощью крючка.
Бактериологическую петлю (иглу,крючок) перед взятием микроорганизмов необходимо простерилизовать. Для этого проволоку прокаливают до красного каления в пламени спиртовки или газовой горелки,одновременно обжигая примыкающую к петле часть дер-
жателя. При прокаливании петлю (иглу,крючок) держат в пламени вертикально, а затем горизонтально. Сразу же после стерилизации петлю,иглу или крючок можно использовать для взятия микробной массы. В том случае, если микробная культура выращена в пробирке или колбе на плотной питательной среде, сосуд берут в левую, руку таким образом, чтобы поверхность с ростом культуры была обращена вверх. Простерилизованную петлю держат в. правой руке, как карандаш; не выпуская петли мизинцем и безымянным пальцем правой руки вынимают пробку из сосуда, края его обжигают в пламени горелки (спиртовки) и в сосуд вводят прокаленную петлю; пробку от сосуда при этом держат мизинцем правой руки. Чтобы микробные клетки не погибли от соприкосновения с горячим металлом, петлю охлаждают, прикасаясь к внутренней поверхности сосуда или к питательной среде, свободной от клеток микроорганизмов, и только после этого захватывают небольшое количество микробной массы. После этого сосуд закрывают,снова обжигая его края в пламени горелки. После приготовления микробиологического препарата петлю (крючок ,иглу) прожигают в пламени и ставят в специальный стакан.
Если микробная культура выращена на жидкой питательной среде, то для ее извлечения пользуются петлей или стерильной пипеткой. В последнем случае пипетку вынимают из бумаги или пенала, в которых стерилизуют пипетки и , соблюдая описанные выше меры предосторожности, вводят в сосуд с культурой; при этом следует особенно внимательно следить за положением пробирки или колбы, держа их в слегка наклонном положении, чтобы жидкость,содержащая микробы, не вылилась. После взятия культуры пипетку сразу же переносят в стакан с дезинфицирующим раствором, не касаясь ею
103,
окружающих предметов.
Техника приготовления препаратов "раздавленная" и "висячая" капли.
Для изучения микроорганизмов в живом неокрашенном состоянии используют препараты "раздавленная" и "висячая" капли.
Предметные стекла, необходимые для этих препаратов,должны быть чистыми и обезжиренными. Для обезжиривания стёкла помещают в сосуд с притертой пробкой в смесь Никифорова (этанол:серный эфир 1:1). Из обезжиривающего раствора стекла извлекают пинцетом. Чистые сухие стекла непосредственно перед работой можно обезжирить следующим образом: рабочую поверхность стекла натереть мылом, которое затем удалить тканью.
,В том случае, если микробная культура выращена на плотной питательной среде, на обезжиренное стекло наносят каплю физиологического раствора и в него вносят петлёй,соблюдая все описанные выше приемы, небольшое количество клеток микроорганизмов.
Затем на каплю накладывают покровное стекло таким образом, чтобы между покровным стеклом и предметным не было пузырьков воздуха. Кроме того, жидкость не должна выступать за края покровного "
а
стекла, избыток жидкости удаляют фильтровальной бумагой.
Если микробы выращены на жидкой питательной среде, то для с
приготовления препарата используют пастеровскую пипетку, с помощью которой берут небольшую каплю культуры и наносят ее на предметное стекло. В том случае, когда необходимо приготовить препарат из культуры грибов, пользуются крючком, а вместо физиологического раствора на предметное стекло наносят каплю разведенной уксусной кислоты или смеси этилового спирта с глицери-
104
ном, в которую и помещают кусочек мицелия гриба.
Препарат "висячая капля" готовят аналогичным образом, но каплю культуры наносят на покровное стекло, а затем его накладывают каплей вниз на предметное стекло с лункой посередине, края которой смазаны вазелином. Предметное стекло слегка при- -жимают . к покровному, при этом получается герметически закрытая камера, в которой капля долго не высыхает.
Препараты живых клеток микроорганизмов просматривают, используя вначале малый объектив (Х8 или хЮ), а затем микрос-копируют с более сильным объективом (х40) при опущенном конденсоре и прикрытой диафрагме, т.к. неокрашенные клетки лучше видны не в проходящем, а в отраженном свете. Для просмотра прижизненных препаратов часто используют фазовоконтрастную и темнопольную микроскопию. В препаратах "раздавленная" и "висячая" капли хорошо видны сравнительно крупные объекты, такие как грибы, дрожжи, простейшие, кроме того отчетливо выявляется движение микробов, однако увидеть органы движения - жгутики можно, только окрасив их с помощью специальных методов.
Предыдущая << 1 .. 21 22 23 24 25 26 < 27 > 28 29 30 31 32 33 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама