Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 38

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 32 33 34 35 36 37 < 38 > 39 40 41 42 43 44 .. 106 >> Следующая

168
Волютин встречается в клетках многих бактерий и большинства дрожжей и грибов.
Для окраски волютина используют молодые культуры; в клетках ДрожжейСап<1х<1а mycoderma > бактерий Spirillum volutans, Azotobacter chroococcum метахроматические зерна встречаются чаще и в большем количестве,чем у других микроорганизмов. Эти микробы можно использовать при выявлении волютина.
Гликоген - заласное питательное вещество, он представляет собой полимер глюкозы,содержащий 1-4 и 1-6 связи между мономерными звеньями. Этот полисахарид накапливается в клетках при нормальном и избыточном питании и расходуется в случае недостаточного количества источника углерода в среде. Включения гликогена чаще всего обнаруживаются в клетках дрожжей (например, рода Saccharomyces ),и спорообразующих бактерий (Bacillus subtilis.Clostridium pasteurianum). Гликоген может находиться в клетках в виде "глыбок" и в растворенном виде, выявляют его с помощью микрохимической реакции с концентрированным раствором Люголя. На обезжиренное предметное стекло наносят каплю микробной взвеси и добавляют каплю раствора Люголя. Препарат закрывают покровным стеклом ("раздавленная капля") и микроекопируют в сухой системе микроскопа (объектив х8 и х40).Гликоген в виде "глыбок" или диффузно распределенной в цитоплазме - красно-бурого цвета. Кроме того,можно приготовить мазок исследуемой культуры,зафиксировать его смесью Никифорова и обработать концентрированным раствором Люголя - 2 минуты.Раствор Люголя сливают,препарат промывают водой и микроекопируют в иммерсионной системе.
Гранулеза - крахмалоподобный неразветвленный полисахарид, который также может содержаться в клетках микробов в виде гра-
169
нул. Некоторые бациллы образу.у? г^^иулёзу в период спорообразо-
I
вания (налример, маслянокислые бактерии poflaGranulobacter ). Выявляют включения гранулезы с помощью раствора Люголя; так же как гликоген, с йодом гранулеза дает серо-синее окрашивание.
Жировые включения или липидные гранулы в клетках микроорганизмов могут быть представлены нейтральными жирами и поли-оксимасляной кислотой. Накопление жировых включений определяется соотношением источников углерода и азота в среде.. Так поли-оксимасляная кислота может образовываться из углеродсодержащих соединений в отсутствие азота.
Жировые гранулы характерны для клеток бацилл, дрожжей, нитчатых грибов, особенно в период старения. У микобактерий туберкулеза. липиды составляют SO'" сухого веса. Накопление нейтральных жиров в клетках характерно для эукариот, а поли-?-оксимас-ляная кислота откладывается в цитоплазме прокариотических микроорганизмов.
<"
Коэффициент преломления жиров и гранул, состоящих из нейтральных жиров, отличаются от такового протоплазмы, поэтому в препарате "раздавленная капля" жир виден в клетках в виде блестящих ярких капелек. Препарат необходимо рассматривать в затемненном поле зрения, опустив конденсор и закрыв диафрагму (объектив х40). В качестве тест-культуры можно использовать 4-5 суточную культуру дрожжей Trichosporon pullulans.
Гранулы, состоящие из поли-?-оксимасляной кислоты, выявляют с помощью специального растворимого в жире красителя - судана III. Непосредственно перед окраской приготавливают рабочий раствор красителя, состоящий из 0,1 г судача И и 20 мл Sot этанола.
На обезжиренном предметном стекле в калле воды готовят суспен-
Ш
зию клеток исследуемой культуры и в нее вносят каплю красителя, закрывают покровным стеклом и микроекопируют (объектив х40). Цитоплазма клеток бесцветная или розоватая,капли жира окрашены в красно-оранжевый цвет.
2.7. ПОЛУЧЕНИЕ СФЕРОПЛАСТОВ И ПРОТОПЛАСТОВ
Вопросы для подготовки по теме
1. Протопласты и сферопласты,их свойства.
2. Микоплазмы и L -формы бактерий.
3. Методы получения протопластов и сферопластов.
Если у микробных клеток полностью удалить клеточную стенку, образуются особые структуры,называемые протопластами. Если клеточная стенка разрушена частично, или нарушен ее синтез,то говорят об образовании еферопласта. У сферопластов можно обнаружить материал клеточной стенки (мурамовую и диаминопимелино-вую кислоты), сферопласты в отличие от протопластов чувствительны к фагам,присутствие материала клеточной стенки можно обнаружить также и серологическими методами. При микроскопирова-нии сферопласты и протопласты выглядят одинаково, как крупные сферические образования. Протопласты и сферопласты грамположительных микробов при окраске по Граму становятся грамнега-тивными.
Для.разрушения клеточной стенки обычно используют лизоцим (фермент - мураминидазу).пищеварительный сок яблочной улитки >о;- "iпредставляющий собой сложный комплекс ферментов, и некоторые микробные ферменты, например, эндо- - (1-3) глюканазу. Кроме того, протопласты можно получить с помощью
17*
пенициллина, который нарушает процесс синтеза элементов клеточной стенки микробов.
Пенициллин действует только на молодую культуру микроорганизмов, у которых происходит синтез структурных элементов клетки.
Обычно при применении лизоцима и пенициллина из грамполо-жительных микроорганизмов образуются протопласты, а из грамот-рицательных - сферопласты, т.к. в оболочке грамотрицательных микробов значительно меньше мурамовой кислоты, на которую специфически воздействуют эти вещества. Протопласты и сферопласты имеют цитоплазматическую мембрану.У протопластов сохраняются такие процессы как рост,синтез белка, дыхание, но они не способны к делению, т.к. не синтезируют компонентов клеточной стенки. Протопласты очень неустойчивые структуры, они чувствительны к осмотическому давлению, механическим воздействиям, аэрации и т.д. Сферопласты, в отличив от протопластов, иногда способны к синтезу утраченных элементов клеточной стенки, так называемой регенерации или реверсии.
Предыдущая << 1 .. 32 33 34 35 36 37 < 38 > 39 40 41 42 43 44 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама