Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 51

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 106 >> Следующая

Существует так же биологический контроль сред. В этом случае несколько образцов среды засевают лабораторной культурой того микроба, для которого приготовлена среда, и изучают характер его роста. Только после того, как среды выдержали контроль, их можно использовать по назначению.
Всякая питательная среда должна удовлетворять следующим требованиям:
Т. Содержать все необходимые для роста и размножения микроба источники азота, углерода, водорода, неорганические соли,
факторы роста.
2. Быть влажной, так как микробы могут развиваться лишь в присутствии воды.
3. Иметь соответствующую реакцию pH. Чтобы во время роста микробов продукты их жизнедеятельности не изменяли оптимальное значение pH, среды должны обладать буферностыо, т.е. содержать вещества, способные нейтрализовать кислые или щелочные продукты обмена.
4. Быть стерильной. Режим стерилизации зависит от состава среды.
5. Среды должны быть изотоничными для микробной клетки, т.е. осмотическое давление в среде должно быа'Ь'таким же, как внутри клетки.
6. Среды должны обладать определенным окислительно-восстановительным потенциалом, гН^. Для анаэробных микроорганизмов гН2 не выше 5, а для аэробных - не ниже ТО.
7. Среды должны быть по возможности унифицированными в отношении основных компонентов среды, т.е. содержание суммарного азота аминогрупп, аминокислот и низших полипептидов, должно составлять 80-120 мг%, общего азота 250-300 мг%, хлоридов (в пересчете на1<таС1) 0,5-0,8%, пептона 1,0%.
Цель работы - приготовить питательные среды и проверить их пригодность для культивирования микроорганизмов.
Материалы: мясная вода, uaCi, пептон, агар-агар, наь'Од, 0^- 7^0, I?e3О^- THgO, KH2P04,KCL .сахароза.
Приготовление сред Мясо-пептонный бульон ШПБ). К ТОО мл мясной воды прибавить
219
Т. г пептона и 0,5 гн аСХ . Смесь кипятить 10-15 минут при помешивании. К полученному бульону добавить по каплям II /20 р-р ИеОН до значения pH 7,4 и снова кипятить 30 мин до выпадения осадка. Отфильтровать через бумажный фильтр, долить водой до первоначального объема, разлить в стерильные пробирки по 3 мл и стерилизовать в автоклаве 30 мин при 2 ат. После стерилизации pH среды снижается до 7,2.
Мясо-пептонный агар (МПА). К готовому МПБ добавить 2% измельченного агар-агара и оставить для набухания на 30 мин. Полученную смесь кипятить при помешивании до полного растворения агара. Горячий МПА фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают по 5 мл в стерильные пробирки и стерилизуют в автоклаве 30 мин при 2 ат. После стерилизации горячие пробирки уложить в наклонном положении (под углом 20°) и дать застыть.
Среда Чапека. Налить в мерный стакан приблизительно 50 мл дистиллированной воды и добавить 0,2 г лац0д, 0,1 г KgHPO^, 0,05 rMgS04-7H20/0,00I rPeSO^, 3 г сахарозы и 2 агар-агара и оставить для набухания на 30 мин. Довести' водой до 100 мл. Полученную смесь кипятить при помешивании до полного растворения агара. Горячую среду фильтровать через ватно-марлевый фильтр, разлить по 5 мл в стерильные пробирки и стерилизовать в автоклаве 30 мин при 1,5 ат. После стерилизации горячие пробирки уложить в наклонном положении (под углом 20°) и дато застыть.
Проверка стерильности питательных
сред -
Для проверки стерильности помещают 10% пробирок со стерильной средой в термостат npip 37°С и 24°С. Наблюдение ведут в те-
220
чение недели. Если ни одна из пробирок не помутнеет и ни в одной пробирке не появится рост микроорганизмов, то среды считают стерильными.
Проверка пригодности сред для культивирования микроорганизмов
а) проверка пригодности мясо-пептонного агара.
Взять 2 пробирки со стерильным МПБ и 2 пробирки со стерильным МПА, засеять их культурой Staphylococcus aureus и поместить в термостат на 24 часа при t =37°. Через 24 часа отметить результаты посева. На жидкой среде должна быть равномерная мутность, а на плотной сплошной рост. Сделать из посевов мазки, окрасить по Граму и промикроскопировать. Если среда пригодна, то должна быть характерная картина роста стафилококка.
б) проверка пригодности среды Чапека
Взять 2 пробирки со стерильной средой Чапека, * засеять культурой Aspergillus сlavatus,поместить в термостат на 7 дней при 24°. Через неделю на среде должен вырасти гриб с зеленоватым пигментом и при микроскопировании дать типичную морфологическую картину (булавовидная головка с одним рядом стеригм по всей поверхности).
Литература
ЛабинскаяА.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М., "Медицина", 1978.
Практикум по микробиологии. Под ред. Н.С.Егорова. М., 1976.
221
5. МЕТОДЫ ВЫДЕЛЕНИЯ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР МИКРООРГАНИЗМОВ
Вопросы для подготовки по теме
1. Понятие о культуре и чистой культуре микроорганизмов. Колонии микроорганизмов.
2. Популяция, клон, штамм.
3. Значение чистых культур в микробиологической практике.
Культуры микроорганизмов - это популяции клеток, выросших на стерильной питательной среде. Популяции могут состоять из разных видов микробов и тогда культуры называются смешанными. Если популяция содержит лишь один вид микроба, культура называется чистой. Чистую культуру выделяют путем получения потомства одной клетки. Культура может расти в виде отдельных колоний на плотной питательной среде. При густом посеве колонии дают сливной рост на плотной среде. Колония микроорганизмов - это сообщество клед'ок одного вида, возникшее из одной или нескольких особей как правило на плотной питательной среде. Колонии грибов могут возникать и на жидких питательных средах. Поддерживать чистые культуры можно на плотных и жидких питательных средах.
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама