Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 53

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 47 48 49 50 51 52 < 53 > 54 55 56 57 58 59 .. 106 >> Следующая

Методы выделения "истых культур по биологическим свойствам
1. Метод Шукевича заключается-в посеве исследуемого материала в конденсационную воду косого агара. При размножении подвижные формы микробов из конденсационной воды распространяются на агар, как бы вползают на его поверхность. Отсевая верхние края культуры в конденсационную воду свежескошенного агара и повторяя это несколько раз, можно получить чистую культуру.
2. Метод прогревания исследуемого материала позволяет отделить спорообразующие бациллы от неспоровых форм. Прогревают на водяной бане при 80° 10-15 мин. При этом погибают вегетативные формы, а споры остаются невредимыми и при посеве на соответствующую питательную среду прорастают.
226
3. Бактериостатический метод основан на различном действии некоторых химических веществ и антибиотиков на микроорганизмы. Определенные вещества угнетают рост одних микробов и не оказывают влияния на другие. Например, небольшие концентрации пенициллина задерживают рост грамположительных микробов и не влияют на грамотрицательные. Смесь пенициллина и стрептомицина позволяет освободить грибы и дрожжи от бактериальной флоры.
5% раствор серной кислоты быстро убивает большинство микроорганизмов, а туберкулезная палочка выживает в этих условиях и дает рост.
4. Метод обогащения предусматривает посев исследуемого материала на элективные питательные среды, способствующие росту определенного вида микроба. Все другие виды или совсем не растут на такой среде, или их развитие идет настолько медленно, что они подавляются ростом того микроба, для которого создана элективная среда . (Примеры использования этого метода приведены в разделе 141).
5. Метод заражения лабораторных животных или растений применяется н целях выделения и идентификации патогенных микробов и отделения их от сапрофитной флоры. Для заражения подбирают наиболее восприимчивые к предлагаемому возбудителю инфекции виды животных или сорта растений. После появления у зараженных организмов признаков заболевания производят посев их органов и тканей на питательные среды. При выделении и изучении облигатных паразитов этот метод является основным и единственным (см. также раздел 15).
227
Цель работы: выделить чистые культуры из смеси микроорганизмов методом рассева петлей.
Материалы: культуры микроорганизмов: взвесь с концентра-
цией микробных клеток 50 млн/мл, содержащая смесь культур: St.aureus, E.coli; St.aureus,
Вас.subtilis; Serratia marcescens, 3ac.
subtilis и-т.п., чашки Петри и пробир-
ки с МПА.
Делают препараты окрашенных по Граму клеток, чтобы убедиться, что взвесь содержит смесь микроорганизмов. Рассевают взвесь на чашке, как это указано выше. Инкубируют 5-7 дней при 37°С. Наблюдают результаты посева. Описывают отдельные колонии, обращая внимание на их отличительные особенности: окраску, форму, размер, консистенцию и т.д. Из отдельных колоний готовят окрашенные по Граму препараты, чтобы убедиться, что колонии содержат чистую культуру микроорганизмов. Отсевают микроор-ганизмы из тех же колоний, из которых брали материал для микрос-копирования, на пробирки с МПА. Выращивают при 37° 24 часа. Снова готовят препараты, окрашенные по Граму, чтобы проверить чистоту полученной культуры.
Культивирование и выделение чистых культур анаэробов
Для культивирования анаэробов необходимо понизить окислительно-восстановительный потенциал ( г Н<>) среды, создать условия анаэробиоза, т.е. пониженного- содержания кислорода в среде и окружающем ее пространстве. Это достигается применением физических, химических и биологических методов.
Физические методы основаны на выращивании микроорганиз-
228
мов в безвоздушной среде, что достигается:
1. Посевом в среды, содержащие редуцирующие и легко окисляемые вещества.
2. Посевом микробов в глубину плотных питательных сред.
3. Механическим удалением воздуха из сосудов, в которых выращивают анаэробные микроорганизмы.
4. Заменой воздуха в сосудах каким-либо индифферентным газом.
Посев в среды с редуцирующими веществами. В качестве редуцирующих веществ обычно используют кусочки (около 0,5г) животных или растительных тканей (печень, мозг,почки,селезенка, кровь,картофель, вата). Эти ткани, связывают растворенный в среде кислород и адсорбируют бактерий.
Чтобы уменьшить содержание кислорода в питательной среде, ее перед посевом кипятят 10-15 мин, а затем быстро охлаждают и заливают сверху небольшим количеством стерильного вазелинового масла. Высота слоя масла в пробирке около I см.
В качестве легко окисляемых веществ используют глюкозу, лактозу и муравьинокислый натрий.
Лучшей жидкой питательной средой с редуцирующими веществами является среда Китт-Тароцци. Она содержит концентрированный мясо-пептонный бульон с 0,5-1% глюкозы, 0,15% агара и кусочки свежевареных тканей животных (печень). Сверху среду заливают вазелиновым маслом. Эта среда используется с успехом для накопления анаэробов при первичном посеве из исследуемого материала и для поддержания роста выделенной чистой культуры анаэробов.
Посев микробов в глубину плотных сред производится по
Предыдущая << 1 .. 47 48 49 50 51 52 < 53 > 54 55 56 57 58 59 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама