Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 54

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 48 49 50 51 52 53 < 54 > 55 56 57 58 59 60 .. 106 >> Следующая

229
способу Виньяль-Вейона.
Способ Виньяль-Вейона состоит в механической защите посевов от кислорода воздуха. Берут стеклянную трубку длиной 30 см и диаметром 3-6 мм. Один конец трубки вытягивают в капилляр в виде пастеровской пипетки, а у другого конца делают перетяжку.' В оставшийся широкий конец трубки вставляют ватную пробку. В пробирки с расплавленным и охлажденным до 50° агаром засевают исследуемый материал. Затем насасывают агар в стерильные вей-оновские трубки. Капиллярный конец трубки запаивают в пламени горелки и трубки помещают в термостат. Выращивание в таких трубках надежно защищает среду от атмосферного воздуха. Создаются благоприятные условия для роста самых строгих анаэробов. Для выделения изолированной колонии из трубки ее, соблюдая правила асептики, надрезают напильником на уровне колонии, ломают, а колонию захватывают стерильной петлей и переносят в пробирку с питательной средой для дальнейшего выращивания и изучения в чистом виде.
Удаление воздуха производится путем его механического откачивания из специальных приборов - анаэростатов, в которые помещают чашки с посевом анаэробов. Анаэростат (рис.62) представляет собой толстостенный металлический цилиндр с хорошо притертой крышкой (с резиновой прокладкой), снабженный отводящим краном и вакууметром. Внутри находится этажерка или ведерко для размещения чашек 'Петри или пробирок с посевами. После размещения чашек воздух из анаэростата удаляют с помощью вакуумного насоса. Отрицательное давление доводят до 0,5-0,8 атм, после чего кран перекрывают, отъединяют анаэростат от насоса и переносят в термостат при 37°.
Рис.82. Микроанаэростат
Рис.83. Стеклянный вакуумный эксикатор
Замена воздуха ишинЬсЬерентным галоп (азотом,водородом, аргоном, углекислым газом) может производиться в тех же анаэростатах или эксикаторах (pic.83) путем вытеснения его газом из баллона.
Химические методы основаны на поглощении кислорода воздуха в герметически закрытом сосуде (анаэростат,эксикатор) такими веществами, как пирогаллол или гидросульфит натрия (Еа232о4) которые в щелочной среде способны поглощать большое количество кислорода.
При создании анаэробных условий следят за тем, чтобы в окружающей культуру среде содержалось некоторое количество углекислоты, которая необходима многим микроорганизмам. Например, пирогаллол рекомендуется растворять только в растворе
231
соды, но не в едких щелочах, чтобы не происходило поглощение С02'
Сосуд с восстановителем помещают в анаэростат рядом с чашками или пробирками с посевами. При использовании вакуумного ' эксикатора, реактивы, отнимающие кислород, можно поместить на дно эксикатора.
""23Л "W>3 ""Л
Биологические методы основаны на совместном выращивании на одной чашке анаэробов с жадно поглощающими кислород аэробами. Для этого из застывшей агаровой пластинки по диаметру чашки вырезают стерильным скальпелем полоску агара шириной около I см. Получается два агаровых полудиска в одной чаше. На одну сторону агаровой пластиики засевают аэроб, например, часто используют St.aureus или. oorratia laarcescens.
На другую сторону засевают анаэроб. Края чашки заклеивают пластилином или заливают расплавленным парафином и помещают в термостат. При наличии подходящих условий в чашке начнут размножаться аэробы. После того, как весь кислород в чашке будет ими использован, начнется рост анаэробов (на 3-4 сутки). В целях сокращения воздушного пространства в чашке питательную среду наливают возможно более толстым слоем.
Комбинированный метод основан на сочетании физических, химических и биологических методов создания анаэробиоза.
Цель работы: выделить из почвы чистую культуру анаэробных микроорганизмов по способу Виньяль-Вейона.
Материалы; образца почвы, трубки Виньяль-Вейона,МПА.
232
Приготавливают взвесь почвы. Для этого I г образца почвы помещают в колбу емкостью 250 мл, содержащую 100 мл стерильной воды. Встряхивают на качалке 15 мин, дают отстояться 5 мин, чтобы осели крупные частицы. Получают таким образом разведение почвы 1:100. Разбавляют взвесь еще в 10;100 и 1000 раз, внося последовательно по I мл взвеси в пробирки с 9 мл стерильного физиологического раствора.
В пробирки с 10 мл расплавленного и охлажденного до 50°
О А
МПА. засевают по 0,1 мл взвеси, разведенной до 1:10 , 1:10 и 1:10(r), быстро перемешивают и засасывают в стерильные трубки Виньяль-Вейона. Выращивают 24 часа при 37°. Под лупой или при малом увеличении микроскопа просматривают и описывают выросшие колонии. Пересевают микроорганизмы из'отдельных колоний на среду Китт-Тароцци, как это описано выше, выращивают при 37°. . Затем изучают подвижность микроорганизмов в препарате "раздавленная капля". Наблюдают особенности клеток в мазках, окрашенных по Граму и Цилю-Нильсену. Результаты опыта вносят в таблицу.
Некоторые морфологические особенности анаэробных микроорганизмов почвы
Разведение суспензии почвы № | Форма колонии'колонии Подвижность клеток Окраска по Граму Наличие спор Рисунок
1:1000 1
и т.д.
233
Литер ату р а
Большой практикум по микробиологии. Под ред. Г.Л.Селибе-ра. М., 1962.
Предыдущая << 1 .. 48 49 50 51 52 53 < 54 > 55 56 57 58 59 60 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама

Бумажная дискотека для детей цена

Фееричное шоу! Ныряние в бумажные сугробы, пушка для бумаги

euphoria.biz