Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 59

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 53 54 55 56 57 58 < 59 > 60 61 62 63 64 65 .. 106 >> Следующая

249
с бумажного фильтра переносят на чистую чашку Петри,тщательно измельчают стеклянной палочкой и ставят в сушильный шкаф (50°С) на I час. Воздушно-сухие клеточные стенки взвешивают и подсчитывают их процентное содержание в воздушно-сухих целых клетках.
Качественная реакция с Фенол-серной кислотой на содержание углеводов в клеточной стенке
Минеральные кислоты способны отщеплять от углеводов воду. При этом из пентоз образуется фурфурол, а из гексоз сО - окси-метилфурфурол.
снон-снон I I
СН20Н снон-пентоза
срон-СНОН
H2so4
¦СНО
- 3 HgO
H2so4
НС-сн
II II
НС с-СНО
Y
фурфурол
НС-сн
Н0СН2-СНОН
СНОН-СНО гексоза
- 3 Н20
НОСНр-С С-СНО
Y
С")- оксиметилфурфурол
[Концевые углеродные атомы какого-нибудь соединения по предложению А.Байера (I835-I9I7) часто обозначают ft) ; например, СН20Н(СН2)4С00Н - ">- оксикапроновая кислота^
Фурфурол и оксиметилфурфурол способны конденсироваться с некоторыми ароматическими спиртами (например, фенолом, Л.- нафтолом, тимолом и др.) с образованием триарилметанового хро-
250
могена, который окисляясь в серной кислоте,дает окрашенное хи-ноидное соединение. Это используется на практике для качественного обнаружения углеводов.
ОН
vsH ¦ * Л
НС с - СНО V* - Н20
\/ НС 'с
о
фурфурол фенол
НС-СН Диарилметановый хромоген
НС-СН
Окрашенное хиноидное соединение.
Цель работы. Определить качественно наличие углеводов в клеточной стенке дрожжей.
Ход работы. 3 мг воздушно-сухих клеточных стенок помещают в пробирку,добавляют 0,5 мл дистиллированной воды и встряхивают в течение 10 минут (или растирают стеклянной палочкой). Затем добавляют 0,5 мл Ъ% водного раствора фенола и 2,5 мл концентрированной серной кислоты. При наличии в клеточной стенке углеводов появляется интенсивное красное окрашивание.
251
Определение редуцирующих веществ в клеточной стенке после гидролиза 2 Н серной кислотой
а) Метод Хагедорна-Иенсена.
Метод основан на окислении восстанавливающих групп сахаров железосинеродистым калием (феррицианидом калия) в щелочной среде и на йодометрическом определении его избытка. Определение производят в присутствии соли цинка, которая осаждает образовавшийся железистосинеродистый калий (ферроцианид калия) и способствует тем самым количественному ходу реакции:
I. 2К3Ре(СТ)6 + (СН0Н)4 + 2 КОН
фвррицианид СН20Н
калия глюкоза
2K^Fe(CN)g + (СН0Н)4 + HgO +K^Pe(CH)g (избыток)
СНрОН
ферроцианид
калия глюконовая
кислота
глюконовая
2. 2K^Fe(CN)g + 3ZnS04
K2Zn3|Pe((aT)6]2 + 3K2so4
нерастворимая комплексная тройная соль
3. 2К3Ре(СИ)6 + 2KI
- 2К4Ре(СН)б + 12
4. I2 + 2Ha2S203
2NaI + NagS^Og
гипосульфит натрия
тетратионат
натрия
252
Цель работы: Определить количество редуцирующих веществ в клеточной стенке дрожжей с использованием йодометрического титрования.
Материалы. Микробюретка на 2 мл, специальные пробирки диаметром 29 мм и высотой 105 мм - 4, ампула на 10 мл; мерная колба на 50 мл; 0,005 Н раствор железосинеродистого калия,
2,5/S раствор иодида калия в растворе сульфата цинка с хлоридом натрия ( 10 г znS04 + 50 г UaCi и доводят до 200 мл дистиллированной водой). Раствор йодида калия готовят перед самым употреблением; 0,005Н раствор еерноватйстокислого натрия^а^Оу 5Н20 )
35в раствор уксусной кислоты, 1% раствор крахмала, 2 Н серная кислота.
Ход работы. Навеску клеточных стенок (5 мг) помещают в ампулу на 10 мл, приливают 0,5 мл 2 Н серной кислоты. Ампулу запаивают на пламени спиртовки и ставят на кипящую водяную баню на 4 часа. После гидролиза содержимое ампулы количественно переносят в 50 мл мерную колбу,промывая ампулу 3-4 раза дистиллированной водой. Нейтрализуют содержимое мерной колбы I Н Иаон и доводят дистиллированной водой до метки. Из мерной колбы берут две параллельные пробы по 1 мл и помещают в специальные пробирки.
Для контрольного опыта в такие же пробирки приливают по I мл дистиллированной воды. Во все пробирки добавляют по 2 мл 0,005 Н железосинеродистого калия и ставят в кипящую водяную баню точно на 15 минут. После нагревания все пробы быстро охлаждают до комнатной температуры , добавляют в каждую 3 мл 2^556 раствора йодида калия в растворе сернокислого цинка и хлористого натрия,
2 мл уксусной кислоты и 2-3 капли It раствора крахмала. Затем пробы титруют 0,005 Н раствором серноватистокислого натрия из
микробюретки. Добавлять все реактивы следует перед самым титрованием. Количество редуцирующих веществ определяют по таблице 5? исходя из количества серноватистокислого натрия,пошедшего на титрование.
Пример расчета содержания редуцирующих веществ в процентах в исследуемом препарате: предположим на титрование пробы пошло 1,51 мл (средняя величина) 0,005 Н раствора серноватистокислого натрия, что соответствует по таблице 0,086 мг глюкозы, и на титрование контрольной пробы - 1,95 мл (тоже средняя величина от двух контрольных проб), что соответствует 0,008 мг глюкозы. Тогда истинное количество глюкозы в I мл пробы будет 0,086-0,008= =0,078 мг. Отсюда процент редуцирующих веществ (X) в исследуемом препарате: ~= 78%, где 5 мг - исходная
Предыдущая << 1 .. 53 54 55 56 57 58 < 59 > 60 61 62 63 64 65 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама