Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 60

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 106 >> Следующая

с;
навеска материала.
б) Метод с применением 2,3.5 - три&енилтетразолий хлорида.
Метод основан на способности бесцветной соли трифенил-тетразолий хлорида восстанавливатьодо окрашенного нерастворимого трифенилформазана по уравнению реакции:
----Ph +2Н jf_NH_ph
Ph-I --------->- Ph-+ НС1
4I=N±------ph ---Ph
СГ,
2,3,5 -трифенилтетразолий трифелилформазан
хлорид
Трифенилформазан растворяясь в органических растворителяхf окрашивает их в вишнево-красный цвет.
Цель работы. Определить количество редуцирующих сахаров
254
Таблица для определения содержания глюкозы по Хагедорну-Иенеену
Сб
Я
К
н
о"
о
со
о
г>
о
<-0
о
ю
о
о
I I
?С d ?
О >аХ Ю (r) О CQ о & о сб о о с е* s s S
О
СОСОС^ОЛОЛСО^'-ОС^ОЫСОЮСООС^^ЮС^СМ ЮСО*-'aiZNlOCOWO^r-^O^CVJOCnF^iocOHO
¦ ¦ - -- ---....м......______
СО С\* С\2 ОЛ СО ^ '.о Г-- СО t-I О) Г" LO СО и "
cocococvi<MC\icvic\i СО ~ ~ ~ *
СУ- о о
о о о о о о
о
ООО 0.0 ооооооооооо
ЮМНО^МОСОИОСОЮ^
COCOCOCVWWWWHHHH
о со о со ю со су о
г> о с\2 ^ счг м ст> ?> ..
Н-"*-*000000
оооооооооооооооооооо
^соююсог>г>а>ос\г^*
ЮСОНОГ^ЮСОНОСОЮ
COCOCOC\JC\JCV2C\iC\2C\JMM
о
Сч2
со ю z> о> счг ю
о> г> ю со с\2 о
О О О О о о
оооооооооооооооооооо
1>НСОСОСОО>ОНС\2'^Ф
?.о ^ ьн сг> zn ю ^ <м о ао <о
C0C0P0C\2CVICV2CMC\*CMMM
HfOLOr'-OJH^'C^
^HO'^W^WO
ммоооооо
оооооооооооооооооооо
осомооомсч2^оооос\2юг>о^мсоюсо Z> ^с\20с0ю^с\20с0ююс0на>г-ю^с\20 cocococowwwwwhhhhhoooooo
оооооооооооооооооооо
СОЮСОСчгсЧ2С\2СО^ЮСО
C^^CUOCQtO^CSlOOO
CQCOfOfOCVCVCVCvWH
О W ^
г> ю со
С4 И СО Ю t4
н а> со ю ^ счг
нн о о о о о
оооооооооооооооооооо
OCQlO^^-tfLQ^OCOOCNJ^tOaiMCOlOOaiCVJ
cs-^rc\2ocoo'^rc\iocr>r>Lnco*-Hocoo^cv2M
wcoojcowwwwwhhhhhhooooo^
оооооооооооооооооооо
ООГ-ЮЮЮГ-СОСПНСОЮСООС^^ЮСОН^
сч*юс\2осо*'?>^г,с\2ос>г^ю?5смосо*о5тсон
OCOCOCOWWMWWHHHHHHOOOOO
оооооооооооооооооооо
С\2 CM G> GO
^-^vv^cocoooMcoinoaicv^tocooojLO j3|-CWO(D'.0,^COHCiCvlOfOCVOCQ'2ujCOH COCOCOCOC\*C\2C\2C\JCMMHHMMMMOOOOO
ООО О ООО о ооооооооооо
о о м со in о а>
Ю ю н-* О о О-НН СМ СО 1-0
СОЮСОНфС^ЮСОНО^С4
COCOCOCOCJC\iCN2C\2C\2HH
н^юсоосхг^С4-
¦^CVOCOC^LOCO"^
MMf-HOOOOO
OOOOvO ООО о ооооооооооо
О Н-J С\2 СО Ю "О Z> ПЗ с О
О О о о Г-) о О О О о Н-1
счг со ^ i-О "о Г'- со су>
и и Н Н И И Н н
255
в клеточных стенках дрожжей фотоколориметрически на основе реакции с трифенилтетразолием.
Материалы. 0,3/б-ный водный раствор хлористого 2,3,5-три-фенилтетразолия, 2 Н раствор едкого натрия, 2,1 Н уксусная кислота, 2 Н серная кислота, этанол.
Ход работы. Навеску клеточных стенок (5 мг) гидролизуют в 0,5 мл 2 Н HgSO^ в запаянной ампуле в течение 4 часов на кипящей водяной бане. Гидролизат количественно переносят в мер- I
ную колбу на 50 мл,нейтрализуют 2 Н NaOH и доводят объем дистиллированной водой до метки.
Из мерной колбы на 50 мл переносят 2 мл раствора гидролизата в мерную колбу на 25 мл (параллельно ставят контрольный опыт с 2 мл дистиллированной вода), добавляют I ил 0,3^-ного водного раствора трифенилтетразолия и I мл 2 Н раствора едкого натрия.
Смесь нагревают 3 минуты на кипящей водяной бане, немедленно подкисляют I мл 2,1 Н уксусной кислотой,охлаждают и разбавляют раствор этанолом до объема 25 мл. При этом появляется красная окраска с максимумом поглощения при 485 нм.
Измерив поглощение исследуемого образца на фотоэлектроколориметре (светофильтр № 4 - сине-зеленый), находят количество редуцирующих сахаров по предварительно построенной калибровочной кривой по глюкозе.
Определение аминосахапов в клеточной стенке микроорганизмов
Конденсация гексозамина с ацетилацетоном в щелочной среде дает 3 или 4 хромогена, которые затем конденсируются в кислом растворе с р-диметиламинобензальдегидом, образуя окрашен-
256
ные соединения.
Один из наиболее важных хромогенов, видимо, образуется по реакции: сн
I 3
Н ОН ОН Н .0 со сн2он-9-с-с-? -с( + сн2 Na0H г
он н н НН2 н со
сн3
В-глюкозамин ацетилацетон
Н ОН ОН CH-с-СО-СНо
I I I II II 3
СН90Н- С - С-С- С С -СНо + 2 НоО
- 2 | , , \/ 3 г
ОН Н Н НН
3-ацетил- 2 -метил - 5 -тетрагидробутилпиррол (хромоген)
Цель работы. Определить в клеточных стенках дрожжей количество аминосахаров с использованием реактива Эрлиха.
Материалы. Ампула на 10 мл, химически стойкие резиновые пробки № 14 - 2,4$ ацетилацетон (свежеперегнанный) в 1,5 Н растворе На2СС>2 (реактив готовят перед самым употреблением), б Н НС1 , реактив Эрлиха[2,67^ (вес к объему) р-диметиламино-бензальдегид в смеси (1:1) 95% этанола и концентрированной HClJ-Ход работы. Навеску клеточных стенок (10 мг) гидролизуют в I мл б Н нсх в запаянной ампуле в течение 8 часов на кипящей водяной бане.Гидролизат количественно переносят в мерную кол-
257
бу на 100 мл, нейтрализуют ТН НаОН и доводят объем дистиллированной водой до метки. В пробирку наливают Т мл раствора гидро лизата, а в качестве контрольной пробы берут пробирку с I мл дистиллированной воды, добавляют I мл ацетилацетового реактива Пробирку закрывают химически стойкой пробкой, встряхивают и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут. Охлаждают пробирку до комнатной температуры, добавляют Т мл реактива Эрлиха (пробирку встряхивают) и оставляют стоять в течение 25 минут. Затем замеряют экстинкцию в контрольной и опытной пробах на фотоэлектроколориметре при зеленом светофильтре (в контрольной кювете дистиллированная вода). Содержание аминосахаров в пробе находят по стандартной кривой, построенной по хлоргидрату рлвкозамина.
Предыдущая << 1 .. 54 55 56 57 58 59 < 60 > 61 62 63 64 65 66 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама