Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 75

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 69 70 71 72 73 74 < 75 > 76 77 78 79 80 81 .. 106 >> Следующая

На следующий день бульон фильтруют через фильтр Зейтца. Присутствие фага в фильтрате определяется по его лизирующему действию на соответствующую культуру. Количество бактериофага в фильтрате оценивают методом титрования.
372
Применение бактериофага для сЬаготипирования микробной
КУЛЬТУРЫ.
Для этого используют стандартные коллекции фагов. Для фаготипирования нужна чистая культура микроорганизма. Её засевают газоном на чашку Петри, через 5-10 мин после посева наносят капли фага. Через 24 часа роста в термостате отмечают зоны лизиса культуры под действием фага, интенсивность лизиса и появление вторичного роста культуры. Фаготипирование особенно часто используют для установления эпидемиологических связей при стафилококковых инфекциях.
Применение бактериофага для Фаготерапии и фагопрофилактики
Для этих целей используют бактериофаг, активный в отношении возбудителей таких заболеваний, как дизентерия, холера, стафилококковые и стрептококковые инфекции. Фаг производят в массовых количествах, его активность определяют методом титрования.
Титрование бактериофага. Титрование бактериофага производится на культурах бактерий в жидких и твердых средах.
На жидких средах (титрование по Аппельману). Приготавливают ряд пробирок с 4,5 мл МПБ. В первую пробирку вносят 0,5 мл исследуемого фага. Перемешивают и переносят в следующую пробирку 0,5. мл и т.д., получая серию разведений фага с уменьшением его концентрации в каждой пробирке в 10 раз. После того во все пробирки вносят по 0,1 мл суточной бульонной культуры соответствующих бактерий. Пробирки помещают в термостат при 37° на сутки, после чего определяют титр фага по тому последнему разведению его, которое дало лизис бактерий.
На твердых средах. Чашки Петри с МПА засевают газоном су-
373
точной культурой соответствующих бактерий. Спустя 5-10 мин после посева на каждую чашку наносят капли предварительно разведенного бактериофага. Разведения делают, как и в предыдущем методе. На каждую чашку наносят несколько капель одного разведения фага. Чашки выдерживают 18 часов при 37°, затем оценивают результаты посева. На чашках с большой концентрацией фага по следу капли роста культуры нет или имеются отдельные колонии с изъеденными краями или центром. В последующих чашках отмечается большее или меньшее в зависимости от разведения фага количество "стерильных" пятен. Титр фага определяется его последним разведением, давшим лизис культуры.
Определение специфичности действия бактериофага.
Культуры бактерий засевают газоном на чашки Петри. На них через 5-ТО мин после посева наносят капли испытуемого бактериофага. Специфичность фага оценивают по его способности образовывать "стерильные" пятна на чашке с определенной микробной культурой.
Цель работы: исследовать техническую воду на присутствие бактериофага; исследовать воздух на присутствие актинофага.
Материалы:
Бульонные 18-часовые культуры St.aureus, ii.coli, Зас.оиЬ-
tilis, PseudOMcnias aeruginosa .
Культуры актиномицетов на агаре Чапека:-ict.iradic.e, ^ct.
ati'epto-u^cini, Act.{.lo'oisporus, -.ct.r.ureo_acieiis
Пробирки с 8 мл МПБ, чашки Петри с агаром Чапека.
Исследование воды.
Качественная проба на присутствие Фага.
В пробирки с МПБ засевают по I мл исследуемой воды и по
314
0,1 мл бульонной культуры одного из микроорганизмов. В КОНТ рольные пробирки засевают только бактерии. Инкубируют 18 часов при 37°С. Если бульон в опытных пробирках остается прозрачным, а в контрольных мутным, то это является доказательством наличия фага. Часто бульон в опытной пробирке после просветления становится мутным вследствие размножения фагоустойчивых клеток.
Титрование бактериофага делают, как указано выше, используя в качестве тест-культуры специфичный для фага микроорганизм.
Исследование воздуха
Чашки Петри засевают культурами актиномицетов газоном. Открытие чашки со свежеприготовленным посевом оставляют открытыми на 30 мин, затем закрывают и инкубируют в термостате 24-48 час. Наличие в воздухе фага обнаруживают по появлению на поверхности газона отдельных стерильных пятен.
Литература
Лебедева М.Н. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. М.,1973.
П я т к и н К.Д. Микробиология с вирусологией и иммунологией.
М., 1971.
Синюшина М.Н., Самсонова М.Н.Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. М.,1974.
Т и м а к о в В.Д. Микробиология. М., 1973.
ЗТ5
13. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ МИКРООРГАНИЗМОВ
Вопросы для подготовки по теме
Т. Ядерный аппарат у прокариотов и эукариотов
2. Мутации спонтанные и индуцированные. Мутагены.
3. Фенотип и генотип.
4. Рекомбинация у микроорганизмов (трансформация, трансдукция, конъюгация).
Получение и идентификация ауксотроФных мутантов E.colt.
Термин "биохимические мутанты" используют для обозначени, мутантов с измененными потребностями в определенных факторах роста или мутантов с измененными, легко распознаваемыми биохимическими процессами (например, способность сбраживать какой-либо сахар, синтезировать аминокислоты, азотистые основания, витамины). Среди биохимических мутантов наиболее изучены аук-сотрофные мутанты.
Предыдущая << 1 .. 69 70 71 72 73 74 < 75 > 76 77 78 79 80 81 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама