Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 91

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 85 86 87 88 89 90 < 91 > 92 93 94 95 96 97 .. 106 >> Следующая

Для иммуноглобулинов характерна их гетерогенность, не имеющая отношения к их специфичности. Она связана с существованием разных типов И и Lцепей. Так, у человека имеется 2 типа легких цепей (X и Л ) и 5 классов тяжелых цепей: у,
Класс тяжелой цепи определяет класс иммуноглобулина. Основными классами иммуноглобулинов у человека являются IgG, IgA, Ig№. Кроме того имеются минорные классы IgD и IgE /Классы иммуноглобулинов включают подклассы, различающиеся по расположению и количеству дисульфидных связей между цепями. У человека известно 4 подкласса в классе IgG и по два подкласса в классах IgA и Igi.i .
Реакции иммунитета.
Реакции иммунитета, т.е. реакции взаимодействия антигена и соотв^етСТвующего ему (специфического) антитела, благодаря высокой специфичности и чувствительности, нашли широкое применение при диагностике инфекционных заболеваний и в научных медико-биологических исследованиях.
В зависимости от состояния антигена и особенностей среды , в которой взаимодействуют антигены и антитела, различают реакцию агглютинации, преципитации, лизиса, связывания комплемента,
375
нейтрализации и др.
Серологическими реакциями пользуются в двух основных случаях:
1) для выявления антител в сыворотке больного,т.е. для серодиагностики инфекционного заболевания
2) для определения вида или типа антигена, например, микроба для его идентификации. При этом неизвестный компонент определяют по известному. Например, для обнаружения антител
в сыворотке больного берут известную лабораторную культуру микроба. Если сыворотка реагирует с определенным антигеном, значит в ней имеются соответствующие антитела и можно думать, что данный микроб является возбудителем болезни у обследуемого больного.
Если следует узнать,какой микроб выделен, нужно его испытать в реакции с известной иммунной сывороткой. Положительный результат реакции свидетельствует о том, что выделенный микроб идентичен тому, которым иммунизировали животное для получения данной иммунной сыворотки.
Реакции агглютинации.
Агглютинация - это склеивание и выпадение в осадок микробов или других клеток под действием антител в присутствии солей (физиологического раствора). Для реакции необходимы еле,дующие компоненты:
1. Антитело (агглютинин) находится в сыворотке больного человека или иммунного животного.
2. Антиген - взвесь убитых или живых микробов или других клеток.
3. Физиологический раствор - 0,9* раствор JkZl, лрйготов-
ленный на дистиллированной воде.
1. Сыворотки.
а) Сыворотка больного. Для получения сыворотки кровь берут чаще всего из вены и собирают в стерильную пробирку. Её оставляют на час при комнатной температуре, или при 37° на 30 мин. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок пробирки стеклянной палочкой, затем пробирку оставляют в холодильнике на ночь для лучшего отделения сыворотки. Сыворотку после этого отсасывают
и при необходимости освобождают от форменных элементов крови центрифугированием.
б) Иммунные диагностические сыворотки содержат антитела к тому антигену, которым произведена иммунизация. Обычно их готовят в производственных условиях. Получают чаще всего из крови кроликов или лошадей, которым предварительно многократно был введен соответствующий антиген. В качестве антигена для иммунизации применяют взвесь живых или убитых микробов, экстракты клеток и тканей, эритроциты и т.п.
2. Антигены. Для приготовления взвеси испытуемого микроба микробную массу, выросшую на питательном агаре, смывают физиологическим раствором и доводят концентрацию микробных клеток приблизительно до 3 млрд в I мл. Полученная взвесь должна быть гомогенной.
Иногда используют взвесь убитых микробов, так называемые диагностикумы, приготовленные в производственных условиях.
Постановка реакции агглютинации. Существует два основных метода проведения реакции агглютинации: реакция на стекле и развернутая реакция (в пробирках).
377
Реакция агглютинации на стекле. На обезжиренное предметное стекло наносят две капли сыворотки и каплю физиологического раствора. В одну из капель сыворотки и в каплю физиологического раствора петлей вносят культуру испытуемого микроба и тщасель-но размешивают. Нельзя при этом переносить культуру из капли с сывороткой в каплю с физиологическим раствором, которая является контролем антигена. Капля сыворотки, в которую не внесена культура, является контролем сыворотки. Реакция протекает при комнатной температуре в течение 1-3 мин. Если контроль сыворотки остается прозрачным, в контроле антигена наблюдается равномерная муть, а в капле, где культура смешана с сывороткой, появляются хлопья агглютината, результат реакции считают положительным.
Развернутая реакция агглютинации. Готовят нужное количество пробирок одинакового диаметра, высоты и конфигурации дна. Готовят последовательные, чаще всего двукратные, разведения сыворотки. В реакции агглютинации сыворотку больного обычно разводят в соотношении от 1:50 до 1:1600, а иммунную диагностическую сыворотку до титра или до половины титра (титр сыворотки указан на этикетке). В каждой пробирке должен содержаться I мл сыворотки в соответствующем разведении. Б качестве контроля сыворотки используют сыворотку в максимальной концентрации. 3 эту пробирку антиген не вносят. В качестве контроля антигена используют пробирку, содержащую I мл физиологического раствора и -антиген. Антиген (диагностикум или свежеприготовленную взвесь микробов) вносят во все пробирки кроме пробирки контроля сыворотки в объеме 0,1 мл (2 капли). В пробирках при этом должна появиться небольшая равномерная муть. Пробирки тца-
Предыдущая << 1 .. 85 86 87 88 89 90 < 91 > 92 93 94 95 96 97 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама