Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 95

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 106 >> Следующая

Схема постановки РСК
Ингредиенты Опыт Контроль
сыворотки антигена гемосистемв комплемента
I фаза: Сыворотка 0,5 0,5
. Антиген 0,5 - 0,5 -
Комплемент 0,5 0,5 0,5 0,5
Физ.р-р - 0,5 0,5 1,5 1,0
Инкубация при 37° I час или при 4° 18 часов
II фаза: гемолитическая система по 1,0 мл
Инкубация при 37° 30-60 мин до полного лизиса в контроле антигена, сыворотки и комплемента
Результат + - - +
или
+ нет гемолиза; - гемолиз.
Цель работы: определить специфичность и титр антител в сыворотке методом реакции агглютинации; оценить количество антигенных фракций в глико-протеиновом комплексе, выделенном из микробных клеток, методом иммунодиффузии.
Материалы: суточные культуры на агаре: st.aureus, B.coli, Candida albicans.
0,1% растворы глико-протеиновых комплексов, выделенных из этих же микроорганизмов (см.раздел 8.2); иммунные сыворотки, содержащие антитела против этих же микроорганизмов.
Определение специфичности сыворотки методом реакции агглютинации на стекле.(см.выше). В качестве антигена используют
390
взвесь того микроорганизма, в отношении которого специфична данная сыворотка. Результаты опытов вносят в таблицы.
Специфичность сыворотки №... при испытании методом
реакции агглютинации на стекле
Антиген St.aureus E.coli с. albicans
Результат реакции
Титр антител в сыворотке ... с антигеном
Разведение 1:50 1:100 1:1600 Контроль Контроль
сыворотки сыворотки антигена
Интенсивность ++++ и т.д. реакции - -
Исследование глико-протеинового комплекса методом
ИММУН0ДИ<М)УЗИИ.
Используют метод диффузии на предметном стекле. В центральную лунку пастеровской пипеткой вносят неразбавленную иммунную сыворотку, в лунки по периферии - растворы антигенов. После экспозиции отмечают и зарисовывают зоны преципитации. Оценивают специфичность метода и количество антигенных фракций в препарате .
Аллергия и аллергические пробы
Аллергия - это измененная реактивность организма под влиянием микробов, продуктов их распада или обмена, токсинов, лекарственных препаратов и других веществ. Вещества, которые вызывают аллергию, называются аллергенами. Аллергические реакции используют для диагностики некоторых инфекционных заболеваний (туляремия, бруцеллез, туберкулез.микозы), для определения чувст-
вительности больного к определенным лекарственным препаратам и т.д.
При диагностике инфекционных заболеваний в качестве аллергенов используют вакцины, фильтраты культуральных жидкостей, полисахаридные гаптены, водные и другие извлечения из клеток возбудителей. Аллергены обычно вводят в насечки на кожу (реакция Пирке) или внутрикожно (по Манту). При положительной реакции на месте нанесения аллергена наблюдается покраснение и припухлость.
Аллергические пробы с туберкулином. Организм больного туберкулезом обладает повышенной чувствительностью на введение малых доз аллергена (туберкулина) и отвечает на него воспалительной реакцией, тогда как при отсутствии инфекционного процесса организм нечувствителен к туберкулезу. Положительная аллергическая реакция появляется и в ответ на вакцинацию в целях профилактики заболевания и свидетельствует о наличии инфекционного иммунитета. В качестве аллергена используют туберкулин, представляющий собой фильтрат бульонной культуры туберкулезных бактерий, или очищенный протеиновый препарат туберкулина.
Реакция Пирке - наиболее часто применяемая кожная проба.
На сгибательную поверхность предплечья наносят I каплю туберкулина, а на несколько сантиметров ниже - каплю 0,5t раствора карболовой кислоты в физиологическом раствбре с Ъ% глицерина (контроль). Затем делают поверхностные царапины на коже -сначала в контрольной капле, а затем на месте с каплей туберкулина. При положительной реакции на месте нанесения туберкулина через 48 часов отмечается образование красноватой папулы, которая быстро увеличивается в ширину. В контрольной царапине реак-
ция отсутствует.
Реакция Манту - внутрикожная проба. 0,05 мл туберкулина в разведении 1:5000 вводят внутрикожно (не подкожно!) через тонкую иглу из специального туберкулинового шприца с делениями, соответствующими сотым долям миллиметра.
Приготовление вакцины
Вакцинами называют препараты, употребляемые для иммунизации (вакцинации) людей или животных с целью создания у них активного иммунитета. Вакцина содержит антиген возбудителя той инфекции, против которой предпринимается вакцинация. Антигенами могут быть бактериальные клетки, убитые нагреванием или химическими веществами (формалином,спиртом,ацетоном). Они называются корпускулярными вакцинами. Антигенами могут быть также активные фракции микробных клеток, извлеченные различными способами (химические вакцины). В качестве антигенов для профилактики токсинемических инфекций используют анатоксины - токсины, лишенные своих ядовитых свойств, но сохранившие антигенность.
Для перевода токсина в анатоксин часто используют формалин, который добавляют к токсину в концентрации 0,3-0,4% и выдерживают при 37-40° 18-30 дней д<т полного обезвреживания.
Приготовление бактериальной вакцины состоит из нескольких этапов: отбор штаммов и выращивание бактерий, приготовление суспензии и убивание (если необходимо) микробов, установление нужной концентрации микробных клеток в вакцине, разливка и укупорка. Все этапы работы сопровождаются контрольными исследованиями: проверка чистоты культуры (мазки), проверка стерильности при приготовлении убитой вакцины (посев), проверка безвредности путем введения лабораторным животным и проверка им-
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама