Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Данилин Н.Ф. -> "Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии" -> 96

Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии - Данилин Н.Ф.

Данилин Н.Ф. Методические рекомендации по молекулярно-генетическим основам микробиологии — Ленинград, 1982. — 416 c.
Скачать (прямая ссылка): metodrekomendaciipomolekulyarnim1982.pdf
Предыдущая << 1 .. 90 91 92 93 94 95 < 96 > 97 98 99 100 101 102 .. 106 >> Следующая

393
муногенной эффективности.
Цель работы: приготовить вакцину для иммунизации кроликов.
Материалы: суточные агаровые культуры at.aureus, s.coli,
Candida albicans. Пробирки со средами: МПА,МНБ,
сусло-агар,сусло жидкое, среда Китт-Тароцци. Бактериальные стандарты, водяная баня.
Проверить чистоту культуры, сделав мазок и окрасив его по Граму. Приготовить 10 мл взвеси клеток в физиологическом растворе с содержанием клеток I- млрд/мл, используя бактериальный стандарт. Прогреть клетки на водяной бане при 70°С 1 час. Проверить стерильность прогретой вакцины. Для этого посеять по 0,2 мл вакцины в пробирки со средами (см.выше). Посевы на сусле оставляют на 7 дней при 24°С, остальные - при 37°С, после чего оценивают стерильность вакцины.
Фагоцитоз.
Фагоцитозом называется поглощение клетками каких-либо частиц. Фагоцитоз может завершиться перевариванием захваченных частиц (завершенный фагоцитоз) или ограничится только их захватом (незавершенный фагоцитоз). Клетками-фагоцитами являются лейкоциты, а также фиксированные клетки ретикуло-эндотелиаль-ной системы. Фагоцитоз микробных клеток является защитным приспособлением макроорганизма, направленным на борьбу с инфекционным заболеванием.
Для изучения фагоцитоза мышам вводят в брюшную полость 2-3 мл стерильного мясо-пептонного бульона. Через 2-3 часа после этого в брюшной полости животных скапливается эксудат, содержащие большое количество лейкоцитов, '"ьичам вводят внутри-брюшинно I мл густом (10 млрд/мл) суспензии микробных клеток.
\
Через 5,10,30 и 60 минут берут пробы эксудата с помощью пастеровской пипетки, делают мазки на обезжиренном стекле, высушивают на воздухе, фиксируют смесью Никифорова и окрашивают по Романо вскому-Гимз а. Под микроскопом производят подсчет в нескольких полях зрения количества лейкоцитов и поглощенных ими микробов. Частное от деления количества микробов на число лейкоцитов является фагоцитарным показателем. Фагоцитарный показатель подсчитывают в динамике. Если фагоцитарный показатель со временем убывает, это свидетельствует о том, что фагоциты переваривают поглощенные ими микробные клетки (завершенный фагоцитоз) Если фагоцитарный показатель с течением времени не изменяется или возрастают, это свидетельствует о незавершенном фагоцитозе. Результаты опыта заносят в таблицу.
Фагоцитоз клеток
Время (мин) Кол-во лейкоцитов Кол-во микробных клеток Фагоцитарный показатель
5 10
'30
60
Литература
БойдУ. Основы иммунологии. М., 1969.
Введение в иммуногенетику. М., 1975.
К э б о т Е., М е й е р М. Экспериментальная иммунохимия.М.,1968. П я т к и н К.Д., Кривошеин D.C. Микробиология. М.,1980.
395
17. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ НЕКОТОШХ ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ НА МИКРООРГАНИЗМЫ
Вопросы для подготовки по теме
1. Этиотропность и оргаиотропность химиотерапевтических препаратов. Химиотерапевтический индекс.
2. Основные группы химиотерапевтических веществ и механизмы их действия на микроорганизмы.
3. Естественная и приобретенная устойчивость микробов к лекарственным веществам.
4. Пути преодоления резистентности микробов к лекарственным веществам.
Химиотерапевтическими'называются препараты, которые избирательно действуют на возбудителя инфекционного заболевания, не причиняя ущерба макроорганизму. Биологической активностью препарата называют его способность убивать или тормозить рост и развитие микроорганизмов. В связи с этим различают бактерицидное и бактериостатическое действие веществ. В отношении противогрибковых препаратов говорят о фунгистатической и фунгицидной активности.
Для количественного выражения биологической активности произвольно введено понятие единицы действия (ЕД). ИД- это активность строго определенного весового количества вещества, принятого за эталон. Для большинства антибиотиков и других веществ, химический состав и строение которых не установлены, единицей действия является минимальное количество вещества, угнетающее рост определенного микроба в стандартных условиях эксперимента.
Антибиотик может быть в культуральной жидкости, в виде хи-
мически чистого вещества или в различных лекарственных формах.
В каждом случае необходим правильный выбор методов определения активности. В качестве тест-культуры обычно используют непатогенный или условно патогенный микроорганизм, проявляющий наибольшую чувствительность к данному веществу.
Для оценки спектра действия антибиотика применяют различ ные организмы, в том числе и патогенные.
Все штаммы, используемые для определения активности антибиотиков, хранят в определенных условиях и постоянно контролируют по их морфолого-физиологическим свойствам.
В качестве питательной среды, пригодной для большинства тест-культур, используют МГБ и МПА. Для дрожжей и грибов в эти среды вносят 1% глюкозы. При определении активности методом диффузии в агар используют голодный агар для базисного слоя.
Его состав: агар-агар - 1,5-2,0 г, фосфатный буфер с pH 8,8-7,О
- 100 мл.
Определение активности антибиотиков методом серийных разведений
Серийный метод титрования может быть выполнен в разных объемах среды (от I до 10 мл). Эксперименты выполняются в асептических условиях при использовании стерильных пипеток для каждого ингредиента реакции. Титрование можно проводить в плотных л жидких средах.
Предыдущая << 1 .. 90 91 92 93 94 95 < 96 > 97 98 99 100 101 102 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама