Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Эйхгорн Г. -> "Неорганическая биохимия. Том 2" -> 43

Неорганическая биохимия. Том 2 - Эйхгорн Г.

Эйхгорн Г. Неорганическая биохимия. Том 2 — М.: Мир, 1978. — 737 c.
Скачать (прямая ссылка): neorganicheskayahimiya1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 37 38 39 40 41 42 < 43 > 44 45 46 47 48 49 .. 319 >> Следующая

Медьсодержащие оксидазы
107
убывает линейно с добавлением восстановителя вплоть до соотношения примерно 3,5 злектрон-эквивалента восстановителя на грамм-молекулу фермента [73]. В сочетании с методом ЭПР титрование показало, что фермент содержит, кроме «синих» и «не синих» ионов, еще два эквивалента окислителя. С помощью сильных восстановителей удалось установить, что эти два дополни-
Рис. 21.5. Спектрофотометрическое Рис. 21.6. Спектрофотометрическое
титрование лакказы из Polyporus ас- титрование лакказы из Polyporus аскорбиновой кислотой в анаэробных корбииовой кислотой в анаэробных
условиях [34]. условиях в присутствии 3-Ю-3 моль/л
/ — поглощение при 610 нм; 2— поглоще- NaF [34].
нне при 330 нм. Величина поглощения да- / — поглощение при 610 нм; 7 — поглощена с поправкой на поглощение обуслов- нне при з;;о нм. _ относительная ннтен-
ленное восстановленной формой белка. сивность (в %) сигнала ЭПР «не синего»
иона Си2* по сравнению с исходной формой.
тельных окислительных центра должны обладать окислительновосстановительным потенциалом не менее 0,5 В [73].
Дальнейшие исследования с помощью спектрофотометрического титрования более однозначно показали, что полосы при 610 и 330 нм в спектре поглощения лакказы непосредственно связаны с указанными дополнительными электроноакцепторными центрами [34]. Из рис. 21.5 видно, что при титровании нативной лакказы аскорбат-ионом одновременно происходит уменьшение интенсивности поглощения в области обеих полос. Отсюда следует вывод, что полоса при 330 нм связана с электроноакцепторным центром, но каким именно, из этого эксперимента заключить невозможно.
108
Глава 21
Если же спектрофотометрическое титрование лакказы проводить в присутствии фторид-ионов, то можно различить электроноакцепторные центры разной природы. На рис. 21.6 показано, как при добавлении первого эквивалента восстановителя уменьшается поглощение при 610 нм, а интенсивность полосы при 330 нм остается практически неизменной. Она линейно падает только при введении следующих двух эквивалентов восстановителя. При этом в спектре ЭПР в ходе титрования не появляется никаких новых сигналов, более того, введение трех эквивалентов восстановителя не сопровождается заметным изменением интенсивности сигналов ЭПР «не синих» ионов Си2+. Из этих экспериментов следует, что полоса поглощения при 330 нм связана с центром, который акцептирует пару электронов и который отличается по окислительновосстановительным свойствам как от «синих», так и от «не синих» ионов Си2-*-, присутствующих в молекуле фермента [34].
Природа электроноакцепторных центров в лакказе здесь не обсуждается подробно; эти вопросы рассмотрены в работе [73]. Назовем только их следующие свойства: 1) окислительно-восстановительный потенциал превышает 0,5 В, 2) они диамагнитны при комнатной температуре, 3) не дают сигналов ЭПР при 77 К ни в восстановленной, ни в окисленной форме фермента, 4) поглощают свет в ближней ультрафиолетовой области. Предполагается, что каждый центр представляет собой пару ионов Cu®+—Си2+ с взаимно компенсированными электронными спинами [73]. Образование диамагнитных пар для комплексов меди (II) хорошо известно [74], и наилучшим примером в этом отношении может быть ацетат меди (II). Спаривание спинов при взаимодействии двух ионов Си2+ наблюдали и для других низкомолекулярных комплексов меди (И) [74].
Наличие двухэлектронного акцептора, ответственного за поглощение в области 330 нм, обнаружено не только в молекуле лакказы из Polyporus, но также и в молекуле лакказы; выделенной из лакового дерева. Можно полагать, что и в других «синих» медьсодержащих оксидазах, как, например, церулоплазмин и аскор-батоксидаза, в спектре которых наблюдается полоса при 330 нм, имеется такой же двухъядерный электроноакцепторный центр, состоящий из ионов меди (II) [20, 51].
Суммируя последние данные по исследованию «синих» медьсодержащих оксидаз, полученные методом титрования в сочетании с физическими методами, можно представить себе состояние «ЭПР-детектируемой» меди в ферменте в виде димеров Си2+— Си2+, способных восстанавливаться по двухэлектронному механизму. Ниже будут рассмотрены функции этих электроноакцепторных центров в процессе каталитического действия соответствующих ферментов.
Медьсодержащие оксидазы
3. КАТАЛИТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МЕДЬСОДЕРЖАЩИХ ОКСИДАЗ
Наиболее изученной медьсодержащей оксидазой с точки зрения понимания состояния меди и ее роли в каталитической активности фермента в настоящее время является лакказа из Potypo-rus. Выше авторы приводили данные о состоянии меди в этом ферменте, полученные физическими и химическими методами. Однако основные сведения о механизме каталитического действия фермента можно получить только из кинетических данных. Далее мы попытаемся найти связь между каталитической активностью фермента в целом и функциями разных форм меди, входящих в состав оксидаз.
Предыдущая << 1 .. 37 38 39 40 41 42 < 43 > 44 45 46 47 48 49 .. 319 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама