Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Гершкович А.А. -> "Химический синтез пептидов" -> 95

Химический синтез пептидов - Гершкович А.А.

Гершкович А.А., Кибирев В.К. Химический синтез пептидов — К.: Наукова думка, 1992. — 360 c.
ISBN 5-12-003103-Х
Скачать (прямая ссылка): himsintezpeptidov1992.djvu
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 123 >> Следующая

Хиршман и Вебер [14] указывают на ряд преимуществ тактики минимальной защиты: отсутствие некоторых побочных реакций защитных групп, ухудшение растворимости крупных, полностью защищенных пептидов в полярных растворителях, возможность промежуточной очистки пептилов с минималыым числом защитных групп в водно-органических средах. Вместе с тем они признают определенные недостатки тактики минимальной защиты — возможность побочных реакций некоторых незащищенных функциональных групп, что ограничивает выбор конденсирующих агентов. Они считают, что необхо-
286
димо защищать только такие сильные нуклеофильные группы,, как е-аминогруппа лизина и тиольная группа цистеина.
По мнению авторов обзора [445], тактика максимальной защиты боковых функций аминокислот (особенно при синтезе крупных пептидов и белков) хотя и усложняет синтез, но обладает рядом ценных преимуществ — улучшение растворимости пептидов и ограничение возможности побочных реакций. Синтез а-бунгаротоксина [358] и ряда других крупных пептидов является хорошим подтверждением этого.
Глава 5
ТВЕРДОФАЗНЫЙ МЕТОД СИНТЕЗА ПЕПТИДОВ
Материал предыдущих глав свидетельствует о том, что классический метод синтеза пептидов в растворе является весьма трудоемким и связан со значительными затратами времени и усилий. В отличие от него твердофазный метод синтеза пептидов является быстрым, эффективным, удобным, позволяющим получать пептиды не только в аналитическом, но и в препаративных количествах.
ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ ТВЕРДОФАЗНОГО МЕТОДА СИНТЕЗА ПЕПТИДОВ
Твердофазный метод является особым вариантом ступенчатого химического способа получения пептидов, при котором растущая полипептидная цепь ковалентно «прикрепляется» к нерастворимому полимерному носителю так, что все этапы процедуры можно провести в одном и том же реакторе, а избыток реагентов и растворителей, а также продуктов реакции можно легко удалить простым фильтрованием и промыванием смолы без обычных потерь, связанных с очисткой при синтезе в растворе. По сравнению с классическими методами твердофазный вариант характеризуется следующими преимуществами: увеличивается скорость рабочих операций; все манипуляции становятся более простыми и удобными. Из-за однотипности операций возможна автоматизация всего процесса; кроме того, снижаются механические потери материала при различных стадиях синтеза и достигается высокий выход конечного продукта.
Недостатком метода является образование микрогетерогенного продукта, возникающего из-за неполноты протекания реакций, а также в результате частичного разрушения полипептида в ходе химических манипуляций. Для попавления этих нежелательных процессов и достижения количественного выхода используют большие избытки реагентов, а иногда стадии повторяют дважды.
Детальная схема синтеза пептидов, предложенная Мер-
288
рифил ьдом [16, 348, 454—4571, представлена ниже: 1. Функционализмция полимера
Cl-CH9-OCH3
Cl—сн,—
SnCl4
2. «Прикрепление» первой Вое-аминокислоты
У Boc-NH-CH—COOH
I
R3
Boc-NH—CH—COO-CH2
I
Et8N
_/~V__P
1. ТФУ/СН2С12
2. EtoN
3. Удаление ^-защитной H2N-CH-COO-CH2-
группы
H1
4. Конденсация со следу- Boc-NH—СИ—COOH
ющей защищенной ами- | ДЦГК
нокислотой R2 _
Boc-NH—CH-CO-NH-~CH-COO-<^ K-P
І І I
R2 H1 4
Б. Последовательное наращивание :
полипептидной цепи {
Boc-NH—CH-СО— —NH-CH-СО—NH-CH-COO-[ I I
Rn R2 Hi J HF
6, Отщепление свободного пептида от смолы и его деблокирование
H2N-CH-CO- ... — NH-CIi—СО—NH-CH-COOH
I I I
Rn Ra Ri
7. Очистка пептида
*Р — сополимер стирола и дивинилбензола
Метод включает следующие этапы: стадию «функционализа-ции» полимера, т. е. получение смолы с реакционноаособной группировкой X; стадию ковалентного присоединения первой (обычно С-концевой). защищенной аминокислоты; стадию селективного удаления Na-защитной группы присоединенной аминокислоты; взаимодействие со следующей защищенной аминокислотой; стадии наращивания полипептидной цепи, затем удаление синтезированного пептида со смолы, его полное деблокирование и, наконец, стадию очистки пептида.
В качестве строительных блоков используют по Мерри-фильду защищенные аминокислоты, ступенчато присоединяемые в направлении отС-конца к N-концу растущего пептида.
19 2-882
289
Принципиально закрепление пептида можно осуществлять по N-концевой аминокислоте или за счет боковой цепи аминокислоты, находящейся в середине пептида. Наращивание цепи можно вести от N-конца к С-концу или в обоих направлениях, а вместо защищенных аминокислот использовать фрагменты защищенных пептидов [458]. Однако при такой стратегии часто возникают дополнительные трудности.
Важнейшим условием успешного применения твердофазного метода является использование подходящего полимерного носителя. В наиболее распространенном варианте метода в качестве полимера используют предложенный Меррифиль-дом гранулированный поперечно сшитый (1—2 %) хлорме-тилированный полистирол с размерами частиц 20—80 мкм, который обладает достаточной химической и механической прочностью и хорошо набухает в органических растворителях. При этом диаметр частиц увеличивается в 5—6 раз, что превращает носитель в хорошо сольватированный материал, в который способны легко диффундировать используемые реагенты и растворители. Кроме хлорметилированной смолы для твердофазного метода были предложены материалы на основе полиметилметакрилата, полисахаридов, фенольных смол, по-лиакриламидов (см. соответствующие ссылки в обзорах и монографиях [16, 455—458]), но лишь полиакриламиды получили широкое распространение [460, 461].
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 123 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама