Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Гершкович А.А. -> "Химический синтез пептидов" -> 98

Химический синтез пептидов - Гершкович А.А.

Гершкович А.А., Кибирев В.К. Химический синтез пептидов — К.: Наукова думка, 1992. — 360 c.
ISBN 5-12-003103-Х
Скачать (прямая ссылка): himsintezpeptidov1992.djvu
Предыдущая << 1 .. 92 93 94 95 96 97 < 98 > 99 100 101 102 103 104 .. 123 >> Следующая

ис-
297
Рис. io. Полуавтоматический прибор для твердофазного синтеза УДПС-2
сором или ЭВМ. В табл. 48 представлены некоторые сведения о синтезаторах, а на рис. 8—11 изображено несколько подобных аппаратов.
МЕТОДЫ СИНТЕЗА РЕАГЕНТОВ
Получение полимерных носителей
Методика 284. Хлорметилирование полистирольной смолы [16, 454].
Для набухания смолы в трехгорлой круглодонной колбе размешивают в течение 2 ч при комнатной температуре 50 г гранулированного полимера в 200 мл хлороформа, а затем смесь охлаждают до 0 °С. Из капельной воронки при перемешивании добавляют охлажденный раствор 3,8 мл безводного хлорного олова в 100 мл хлорметилированного эфира. Пере-
298*
Рис 11. Автоматический пептидный синтезатор «Эпплэйд Байосистсм», моле л а 430 А (США)
мешивание при 0 °С продолжают еще 30 мин, затем смолу отфильтровывают на воронке Бюхнера с пористым стеклянным фильтром и промывают следующими растворителями (по 1 л каждого): смесью диоксана с водой (3:1), диоксана с 3 н. HCl (3:1), каждый раз давая возможность растворителям хорошо проникнуть в гранулы полимера. Смолу затем тщательно промывают диоксгном, водой, метанолом и сушат в течение ночи в вакуум-эксикаторе над хлористым кальцием.
Для определения степени хлорметилирования 200 мг смолы нагревают в ампуле с 3 мл пиридина в течение 2 ч при 100 °С. Смесь количественно переносят в колбу Эрленмейера емкостью 125 мл, содержащую 30 мл 50 %-й уксусной кислоты, добавляют 5 мл концентрированной азотной кислоты. Содержание хлорид-аниона в смеси количественно определяют модифицированным методом Фольгарда.
Методика 285. Полиамидная смола на кизельгуре [458].
Свежеперегнанные Ы,Ы-диметилакриламид (33,3 г; 336 ммоль) и метиловый эфир акрилоилсаркозина (2,83 г; 18 ммоль) прибавляют к ргствору быоакрилоилэтилендиами-на (3,90 г; 23,2 ммоль) в смеси диметилформамид — вода
299
(3,12 : 2; 137 мл), прибавляют также 10 %-й водный раствор персульфата аммония, смесь немедленно вливают в кизельгур (диаметр частиц 335—500 мкм; 100 г) и перемешивают стеклянной палочкой. Реакционную массу помещают в эксикатор и вакуумируют в течение 2 мин на водоструйном насосе. При этом происходит сильная дегазация смеси. Эксикатор выдерживают под вакуумом в течение 15 мин, а затем в него осторожно вводят ток азота и реакционную смесь выдерживают 2,5 ч при комнатной температуре. После этого смолу тщательно промывают водой на фильтре с пористым стеклом и пропускают через сито с диаметром отверстий 700 мкм, смолу промывают водой при декантации (4 раза), отфильтровывают, промывают ацетоном, эфиром и сушат при высоком вакууме над P2O5. Выход 125,5 г.
Полимер на кизельгуре (2,5 г; 0,27 ммоль/гсаркозина) осторожно встряхивают с избытком этилендиамина в течение 12 ч, а затем смолу промывают диметилформамидом, переносят в стеклянную колонку диаметром 15 мм и промывают диметилформамидом со скоростью 3,3 мл в мин до отрицательной реакции на нингидрин (обычно около 30 мин).
В качестве внутреннего стандарта используют норлейцин. Для этого симметричный ангидрид флуоренилметилоксикар-бонил-норлейцина (0,475 ммоль) в ДМФА вводят в колонку и осуществляют ацилирование в течение 40 мин; за его ходом следят спектрофотометрически. После промывания колонки диметилформамидом и отщепления Fmoc-группы сразу же добавляют активированный 2,4,5-трихлорфениловый эфир я-оксиметилфеноксиуксусной кислоты (0,184 г; 0,5 ммоль) и 1-оксибензтриазол (0,076 г; 0,5 ммоль) в 2 мл ДМФА. Реакцию ацилирования ведут в течение 40 мин. После промывания смолы диметилформамидом колонка готова к работе.
Методика 286. Присоединение Вос-аминокислоты к хлорметилированной смоле в присутствии триэтиламина [161.
К суспензии хлорметилированной смолы (1,0 ммоль хлора) в абсолютном спирте (2—5 мл на 1 г смолы) добавляют Вос-аминокислоту, являющуюся в пептиде С-концевой (1 ммоль), и триэтиламин (0,9 ммоль; из расчета 0,14 мл на 1 ммоль; плотность 0,723), и смесь осторожно кипятят с обратным холодильником (снабженным трубкой с хлористым кальцием) на масляной бане, нагретой до 90 °С в течение от 24 ч (для большинства Вос-аминокислот) до 65 ч (для Вос-нитроаргинина).
Реакцию присоединения С-концевой Вос-аминокислоты можно проводить в течение 5 ч при 40 °С, если в качестве катализатора использовать йодистый калий [480].
Вос-аспарагин этерифицируют в этилацетате, чтобы исключить алкоголиз амида.
300
После окончания реакции полимер отфильтровывают на воронке со стеклянным пористым фильтром и трижды промывают каждым из следующих растворителей: спиртом, водой, метанолом и хлористым метиленом. Полимер, суспендированный в хлористом метилене, переносят в делительную воронку, перемешивают с этим растворителем (20 мл на 1 г смолы) и выдерживают до тех пор, пока основная масса полимера не всплывает на поверхность. Растворитель с мелкими частицами смолы сливают и выбрасывают, а операцию флотации повторяют не менее 3 раз, после чего полимер переносят на фильтр, растворитель удаляют с помощью водоструйного насоса и продукт сушат в течение ночи в вакуум-эксикаторе.
Предыдущая << 1 .. 92 93 94 95 96 97 < 98 > 99 100 101 102 103 104 .. 123 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама