|
Синтез полисахаридов - Кочетков Н.К.ISBN 5-02-001857-0 Скачать (прямая ссылка):  Полученные препараты синтетических полисахаридов представляют собой, естественно, смесь полимер-гомологов. Гель-хроматография выделенных препаратов показала, что кривые распределения по молекулярной массе несколько различаются для разных полисахаридов. В зависимости от желания можно осуществить дробное фракционирование и выделить более узкую высокомолекулярную фракцию, жертвуя при этом выходом полимера или, напротив, собирая более широкую фракцию, получить полисахарид с более высоким выходом. В то же время следует 72 заметить, что обычно разброс по молекулярной массе не слишком велик, что позволяет выделить фракцию, которая содержит основную массу полученного синтетического полимера и достаточно узка по молекулярной массе. Строение всех синтезированных полисахаридов подвергалось тщательному контролю химическими и спектроскопическими методами. Их структурная регулярность и, следовательно, региоспецифичность реакции поликонденсации проверялась классической процедурой метилирования с последующим анализом ацетатов частично метилированных полиолов с помощью ГЖХ-МС-техники [20]. Это позволяло для низкомолекулярных полисахаридов определять и степень полимеризации по соотношению соответствующих метилированных полиолов, получаемых из средних звеньев цепи и концевых звеньев. Однако чаще всего степень полимеризации для низкомолекулярных полисахаридов оценивалась с помощью 13С-ЯМР-спектра по интегралам сигнала одного из углеродных атомов среднего звена полимера и того же углеродного атома одного из концевых звеньев, восстанавливающего или невосстанавливающего. Для некоторых полисахаридов, особенно полисахаридов с повторяющимися звеньями, имеющих молекулярную массу в пределах 4000-6000, ориентировочная оценка молекулярной массы производилась также путем гель-фильтрации с употреблением общепринятых стандартов, например декстрана. Особенно тщательной проверке подвергалась конфигурация новых гликозидных связей, возникающих в процессе поликонденсации. Это позволяло судить о стереорегулярности полученного полимера и, следовательно, о стереоспецифичности самой реакции поликонденсации. При этом именно полная стереорегулярность полученного полисахарида являлась в то же время самым серьезным критерием полной стереоспецифичности самой базовой реакции гликозилирования, в данном случае -тритил-цианоэтилиденовой конденсации. Наиболее удобным, достаточно точным и в настоящее время стандартным методом контроля стереохимии гликозидных связей является ]Н- и 13С-ЯМР-спектроскопия, причем особенно полезной и удобной оказалась последняя [21]1.13С-ЯМР-спектр высокого разрешения обычно уже по количеству сигналов в аномерной области четко указывал на стереоспецифичность полученного полисахарида, так как сигналы 1,2-транс- и 1,2-цис-гликозидных связей, как правило, достаточно хорошо разрешены. Однако, поскольку на величину химического сдвига аномерных С-атомов в 13С-ЯМР-спектре, как известно [ 22], сильное влияние оказывают структура соседних звеньев и тип межмономерной гликозидной связи, то для точного отнесения сигналов углеродных атомов во многих случаях специально получали соответствующие дисахаридные модели, которые и давали необходимые, достаточно надежные данные для полной расшифровки 13С-ЯМР-спектра синтетического полимера. Синтез таких дисаха-ридов одновременно позволял и моделировать оптимальные условия , 'В первых синтезах полисахаридов методом тритил-цианоэтилиденовой конденсации | 13] 13С-ЯМР -спектроскопия еще не использовалась, поскольку основы ее применения для изучения структуры полисахаридов были разработаны позднее. 73 поликонденсации соответствующих мономеров в полисахаридном синтезе. В случае синтетических гомополисахаридов, а также простейших гетерополисахаридов регулярного строения обычно удается полная расшиф. ровка их относительно простого спектра с отнесением сигналов всех кольцевых углеродных атомов (см., например, 13С-ЯМР-спектр 1,3-a-L-арабинофурана [рис. 3, с. 93]). Более того, уже сама простота и четкость ' С-ЯМР-спектра, отсутствие в нем интенсивных неидентифицированных сигналов являются убедительным доказательством полной регулярности полисахаридной цепи. В том случае, когда стереоспецифичность реакции поликонденсации нарушалась и наряду с 1,2-транс- образовывались 1,2-цыс-гликозидные связи, 13С-ЯМР-спектр давал возможность по интегральной величине сигналов соответствующих аномерных атомов углерода определить соотношение связей этих двух типов в полисахаридной цепи. При синтезе природных полисахаридов микробного происхождения проводилось также прямое сравнение С-ЯМР-спектра синтетического полисахарида со спектром полисахарида, выделенного из соответствующего микроорганизма. Наряду с ЯМР-спектроскопией часто для простейших гомополисахаридов полезным было также определение оптического вращения синтетического полимера, которое является очень чувствительной константой. Однако приходится признать, что частенько трудно найти в литературе достаточно надежные данные по природному полисахариду соответствующей структуры, которые могут быть приняты за стандарт для сравнения. В то же время, напротив, данные об оптическом вращении синтетического полисахарида, строение которого доказано достаточно однозначно, могут служить стандартом при определении чистоты природного полисахарида соответствующей структуры, хотя в этом случае нужно принимать во внимание некоторые отклонения, обусловливаемые разницей в молекулярной массе (т.е. в длине полимерной цепи) обоих образцов.
Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены. |
|
|||||||||||||||||||||||||
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||
