Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Кочетков Н.К. -> "Синтез полисахаридов" -> 87

Синтез полисахаридов - Кочетков Н.К.

Кочетков Н.К. Синтез полисахаридов — М.: Наука, 1994. — 219 c.
ISBN 5-02-001857-0
Скачать (прямая ссылка): sintezpolisaharidov1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 81 82 83 84 85 86 < 87 > 88 89 90 91 92 93 .. 97 >> Следующая


В связи с этим существенным достижением явилась разработка нового метода синтеза полипренилпирофосфатолигосахаридов, основанного на взаимодействии незащищенного олигосахаридфосфата с активированным фосфатом полипренола, что достигается переводом последнего в соответствующий фосфоимидазолид (схема 4) [18]. Так, например, аммонийная соль полипренилфосфата 2 обрабатывается М,1Ч'-карбонил-диимидазолом или 1Ч,М'-сульфинилдиимидазолом и образовавшийся полипренилфосфоимидазолид 3 при взаимодействии с бистриалкилам-монийной солью Р-0-маннопиранозил-( 1 -4)-а-Ь-рамнопиранозил-( 1 -3)-а-D-галактопиранозилфосфата 4 в смеси тетрагидрофуран-диметилсуль-фоксид дает соответствующий полипренилпирофосфатолигосахарид 5, который не нуждается в депротектировании и очищается ионообменной хроматографией на ДЕАЕ-целлюлозе. Метод имеет общий характер и с его помощью химическим путем были синтезированы различные по
Схема 4

CHjOH

CHjOH

о

II

RO-P-O

l

О

2

CH2OH CHjOH

но он

5

он о- о-

R = полмпренил

строению полипренилпирофосфатолигосахариды, которые могут служить субстратами в реакции ферментативной полимеризации. Этим путем были приготовлены производные ди- и трисахаридов, составляющих фрагменты повторяющихся звеньев полисахаридов из некоторых сальмонелл и их аналогов (см., например, [19]), в том числе содержащие радиоактивную метку [20].

Границы химико-ферментативного подхода к синтезу регулярных полисахаридов очень сильно расширяются благодаря тому, что для получения полипренилпирофосфатных производных олигосахаридов кроме чисто химического синтеза широко могут быть применены схемы с частичным использованием ферментативных реакций. Поэтому имеются широкие возможности построения олигосахаридного звена введением в его основную цепь с помощью ферментативных реакций моносахаридных остатков, не входящих в состав природных полисахаридов. Таким путем, например при использовании соответствующих гликозилтрансфераз и нуклеозиддифосфатсахаров, была получена серия аналогов полипренил-пирофосфатолигосахаридов типа Sug3-Rha-Sugi-0-P-0-P-Pre, содержащих вместо D-галактозы (Sugj) остатки D-фукозы, D-талозы и D-глюкозы, а вместо D-маннозы (Sug3) - остаток D-глюкозы [21]. Другим интересным путем модификации полипренилпирофосфатолигосахаридов с использованием ферментативных реакций является введение в линейный олигосахаридный фрагмент заместителей. Так, в линейный трисахарид типа Man-Rha-Gal был введен в качестве боковой группы остаток абеквозы [22].

Таким образом, сочетание химического синтеза с одновременным использованием ферментативных реакций дало возможность получить довольно широкий круг полипренилпирофосфатолигосахаридов, различаю-

200
щихся структурой углеводной части. Эти соединения оказались важным нструментом для первых принципиальных оценок границ реакции ферментативной полимеризации и, следовательно, химико-ферментативного етода синтеза полисахаридов.

8.2. Ферментативная полимеризация

Ключевой стадией химико-ферментативного синтеза регулярных полисахаридов, которая определяет эффективность и границы его препаративного использования, является реакция полимеризации полипренил-пирофосфатолигосахаридов. Эта стадия проходит под действием бактериальных полимераз, которые встроены в цитоплазматическую мембрану стенки микроорганизма и прочно с нею связаны. Многочисленные попытки отделить фермент от мембраны ("солюбилизация") для получения его в очищенном виде не дали положительного результата, так как фермент быстро терял свою активность, что связано, скорее всего, с изменением конформации белковой цепи, происходящим при отрыве фермента от фиксирующей его матрицы. В то же время очистка полимеразы является существенным моментом не только для повышения ее активности. Дело в том, что в бактериальной стенке всегда присутствует очень небольшое количество природного эндогенного полисахарида, который после проведения полимеризации с использованием полимеразы бывает трудно отделить от получаемого синтетического биополимера. Поскольку при получении полимеразы из микробной массы некоторое количество эндогенного полисахарида может попасть в препарат полимеразы, это может сильно затруднить оценку результатов ферментативной полимеризации и снизить препаративную ценность метода. В связи с этим была разработана методика, позволяющая получать очищенный препарат полимеразы, который имеет значительно более высокую активность, практически не содержит примеси эндогенного полисахарида и вполне пригоден для препаративного использования [23].
Предыдущая << 1 .. 81 82 83 84 85 86 < 87 > 88 89 90 91 92 93 .. 97 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама