Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Кочетков Н.К. -> "Синтез полисахаридов" -> 88

Синтез полисахаридов - Кочетков Н.К.

Кочетков Н.К. Синтез полисахаридов — М.: Наука, 1994. — 219 c.
ISBN 5-02-001857-0
Скачать (прямая ссылка): sintezpolisaharidov1994.djvu
Предыдущая << 1 .. 82 83 84 85 86 87 < 88 > 89 90 91 92 93 94 .. 97 >> Следующая


Важнейшим вопросом, определяющим практическую ценность химико-ферментативного метода, являются границы специфичности полимеразы, выделяемой из данного рода бактерий, по отношению к структуре субстрата - полипренилпирофосфатолигосахариду, а именно к его углеводной части. Поскольку химико-ферментативной метод находится на ранней стадии разработки, в настоящее время могут быть отмечены лишь общие черты зависимости эффективности ферментативной полимеризации от строения олигосахаридной части. Имеющиеся в настоящее время данные по химико-ферментативному синтезу относятся пока только к синтезу регулярных гетерополисахаридов, являющихся О-антиген-ными полисахаридами грамотрицательных бактерий. Возможность его использования для синтеза других полисахаридов регулярной структуры остается пока открытой.

Специфичность полимераз исследована на примере получения О-анти-генных полисахаридов различных групп сальмонелл. Полимеразы, выделенные из сальмонелл группы Е (S. anatum, S. senftenberg), с одной сто-

2.01
роны, обеспечивают [1,2] синтез полисахаридов, в основе которых лежит линейная цепь, состоящая из повторяющихся звеньев

... -6-P-D-Man-1 -4-a-L-Rha-1 -3-a-D-Gal-..

С другой стороны, полимераза из S. newington обеспечивает полимеризацию такого же олигосахаридного звена, но с образованием Р-галак-тозилманнозной связи

... -6-P-D-Man-l-4-a-L-Rha-1 -З-p-D-Gal-...

Природные бактериальные полисахариды синтезируются полимеризацией полипренилпирофосфатолигосахаридов, имеющих строение, соответствующее этому повторяющемуся звену, Man-Rha-Gal-p-p-Pre. Оказалось, что полимеразы из этих микроорганизмов способны обеспечить полимеризацию полипренилпирофосфатолигосахаридов и с модифицированным трисахаридным звеном типа Sug3-Rha-Sugi-p-p-Pre [24]. Так, например, полимеразы из S. anatum и S. senftenberg способны полимери-зовать полипренилпирофосфатолигосахариды, в которых остаток галактозы может быть заменен на остаток D-талозы (Sug! = D-Tal), D-фукозы (Sug! = D-Fuc) или D-глюкозы (Sugj = D-Glc); выход соответствующего полисахарида при этом снижается по сравнению с выходом при биосинтезе природного немодифицированного полисахарида, но составляет тем не менее 25-50%. Остаток маннозы может быть также замещен на остаток глюкозы (Sug3 = D-Glc), хотя выход полисахарида составляет только 23% [21]. Этим путем, полимеризацией соответствующих полипренилпирофосфатолигосахаридов (которые получены чисто химическим или химико-ферментативным путем) при действии полимераз из S. anatum, были синтезированы аналоги О-антигенных полисахаридов сальмонелл 6-9 [21, 25]. Существенно подчеркнуть, что во всех случаях модифицированные трисахаридные звенья полимеризовались строго стереоспецифично и, как и при полимеризации природного субстрата, связывались только а-связями.

...6)-P-D-Man-(l-4)-a-L-Rha-(l-3)-a-D-Fuc-(l-...6)-P-D-Man-(l-4)-a-L-Rha-(l-3)-a-D-Tal-(l-.. .6)-P-D-Man-( 1-4)-a-L-Rha-( l-3)-a-D-Glc-( 1-...6)-P-D-Glc-(l-4)-a-L-Rha-(l-3)-a-D-Gal-(l-

...6)-P-D-Man-(l-4)-a-L-Rha-(l-3)-P-D-4d-Glc-(l-

6

7

8 9

10

где 4d-Glc - 4-дезоксиглюкоза

.. ,6)-P-D-Man-( 1 -4)-cx-L-Rha-( 1 -3)-P-D-Tal-( 1 -...6)-P-D-Man-(l-4)-a-L-Rha-(l-3)-P-D-Glc-(l-

.. .4)-P-L-Rha-( 1 -2)-a-D-Man-( l-2)-a-D-Man-( l-3)-P-D-Glc-( 1... .. ,4)-P-L-Rha-( l-2)-a-D-Man-( l-2)-<x-D-Man-( 1 -3>P-D-Tal-( 1. ..

11

12

13

14

С другой стороны, если полимеризацию проводить, используя полимеразу из другого микроорганизма - S. newington, которая обеспечивает 202
создание P-связей между повторяющимися олигосахаридными звеньями, то модифицированные звенья, содержащие в качестве концевого моносахарида вместо галактозы остаток талозы (Sugi = D-Tal), глюкозы (Sug[ = D-Glc) или 4-дезоксиглюкозы (Sugi = D-4d~ Glc), связываются уже Р-гликозидными связями, что было доказано мягким кислотным гидролизом с последующим ферментативным гидролизом фрагментов, содержащих вновь образовавшуюся гликозидную связь [26]. Таким образом были получены аналоги О-антигенных полисахаридов 10-12 [25].

Это подчеркивает очень важное для ферментативной полимеризации полипренилпирофосфатолигосахаридов обстоятельство - полимераза из данного микроорганизма обеспечивает строгую стереоспецифичность реакции полимеризации и для модифицированных аналогов, причем конфигурация вновь образующейся при ферментативной полимеризации связи определяется специфичностью соответствующей полимеразы.

Имеются также предварительные данные о влиянии модификации структуры повторяющегося звена на эффективность ферментативной полимеризации при синтезе основной цепи О-антигенного полисахарида сальмонелл, относящихся к серогруппам С2 и С3 (S. newport, S. kentucky), которые состоят из повторяющихся звеньев

4-P-L-Rha-(l-2)-a-D-Man-(l-2)-a-D-Man-(l-3)-P-D-Gal,

связанных Р-1-4-связью. Оказывается, что полимераза из указанных микроорганизмов также способна успешно полимеризовать не только полипренилпирофосфаттетрасахариды природного состава, но и модифицированные производные, полученные ферментативным синтезом с помощью соответствующих трансфераз, в которых остаток галак-трзы замещен на глюкозу или талозу. Выходы образующихся при этом модифицированных полисахаридов 13 и 14 мало отличаются от выходов полисахаридов, полученных при полимеризации полипренилпирофос-фатолигосахарида природного состава [27]. Замена в полипренил-пирофосфатолигосахариде - предшественнике биосинтеза этой группы сальмонелл - звеньев D-маннозы на звенья 3-дезокси- и б-дезокси-Б-ман-ноз также не препятствует полимеризации, хотя выход модифицированных полисахаридов ниже и составляет соответственно 30 и 60% для соединений, включающих 6- и 3-дезоксиманнозу вместо маннозы [28].
Предыдущая << 1 .. 82 83 84 85 86 87 < 88 > 89 90 91 92 93 94 .. 97 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама