Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 102

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 96 97 98 99 100 101 < 102 > 103 104 105 106 107 108 .. 126 >> Следующая

Из седиментационных диаграмм можно получить сведения чистоте препарата и его полидисперсности. Наличие несколькю. границ свидетельствует о полидисперсности анализируемого раствора. При наличии примесей с близкими седиментационными свойствами граница единственна, но асимметрична (см. рис. 16). Полный анализ формы и ширины границы седиментации может дать сведения о форме распределения молекул полидисперсного препарата.по молекулярным весам.
Расширение границы гомогенного препарата обусловлено только диффузией. Форма границы описывается сложным аналитическим выражением [27], которое, однако, упрощается при условии (u2st<^\. Это дает возможность получить простое выражение для так называемого «кажущегося» коэффициента диффузии:
где Ct — концентрация исследуемого вещества в области плато; de
— —максимальная величина градиента концентрации в пере-dx
ходной зоне (граница седиментации); t — время, в сек; т — угловая скорость, в QeK~ \ s — коэффициент седиментации1.
Прямое указание на наличие полидисперсности образца можно получить, сравнивая «кажущийся» коэффициент диффузии, вычисленный из результатов седиментационного опыта, с истинным коэффициентом диффузии. Совпадение этих величин свидетельствует об отсутствии полидисперсности. В противном случае величина «кажущегося» коэффициента диффузии будет больше истинного. При этом из-за различной скорости седиментации молекул с разными молекулярными весами происходит расширение границы. В случае сильной концентрационной зависимости коэф-
1 При определении DKa>K желательно применять двухсекторпую ячейку для
de
повышения точности определения Ct и — . При использовании оптики Филь-
dx
de
пота — Свенссона величина — пропорциональна максимальной ординате диа-
ах
граммы седиментации, а с — площади, ограниченной базовой линией и градиентной кривой. Коэффициентами пропорциональности являются факторы увеличения оптической системы (см. стр. 247).
в. Определение степени полидиснерсности
(25)
260
фициента седиментации наблюдается, напротив, сужение границы, обусловленное тем, что в переходной области с уменьшением концентрации и вязкости раствора происходит увеличение скорости седиментации отставших молекул. При исследовании границы концентрация анализируемого вещества в растворе должна быть достаточна мала, чтобы этим можно было пренебречь. Исследование формы границы в общем случае весьма сложно, поэтому ограничимся описанием одного из методов оценки полидисперсности. Предположим, что C0 — весовая концентрация вещества в растворе и что часть вещества dc0 обладает коэффициентом седиментации, лежащим в пределах от s до s + ds. Тогда функция g(s) распределения вещества по коэффициентам седиментации может быть найдена из опыта при помощи следующего выражения:
где ——весовая доля вещества, обладающего коэффициентом
седиментации, лежащим в пределе от s до s + ds, равная g(s)ds; X — расстояние от оси вращения до заданной точки на седимен-тационной кривой; хм — расстояние от оси вращения до мениска.
В формулу (26) входят величины, которые определяются из седиментационной диаграммы, но это выражение справедливо при отсутствии диффузии (или для вещества с очень малым коэффициентом диффузии). В том случае, когда расширение границы происходит как за счет диффузии, так и за счет полидисперсности, величину g(s) определяют для ряда моментов времени после начала седиментации. Расширение границы за счет полидисперсности прямо пропорционально длительности опыта t, так как каждая фракция движется со своей постоянной скоростью (20), вызывая размытие границы. Напротив, размытие границы за счет диффузии пропорционально j/"f. Т. е. через достаточно большое время седиментации расширение границы вызвано в основном полидисперсностью, и, следовательно, экстраполяция функции g(s) к этому моменту времени исключает влияние диффузии. Полученное таким образом значение g(s) является функцией распределения образца по коэффициентам седиментации. Показано [38], что при условии w2s/<l для получения такого распределения необходима экстраполяция g(s) к нулевому зна-1
чению величины —, где X — положение границы седиментации.
На рис. 23 представлены данные Шумейкера и Шахмана [39] для распределений по коэффициентам седиментации g(s), полученных в различные моменты времени после начала седиментации (ДНК тимуса теленка). Полученные распределения совпа-
dc
(26)
261
9(s)
6
дают, что указывает на отсутствие вклада диффузии в расширение границы, которое, следовательно, связано только с полидисперсностью образца.
г. Седиментация в градиенте плотности
'20f Ш
В последнее время широкое распространение получил метод седиментации в градиенте плотности [40]. Этим методом
производятся очистка, выделе-Рис. 23. Распределение по коэффи- ние биополимеров и разделе-
фуг в роторах с откидными стаканами. При этом осаждение молекул происходит в заранее созданном устойчивом градиенте плотности инертной среды; чаще всего для этой цели используют раствор сахарозы, обладающий значительной вязкостью. В дальнейшем под градиентом плотности мы будем подразумевать именно градиент плотности сахарозы, который создается изменением концентрации сахарозы по высоте пробирки, с наибольшей концентрацией у дна пробирки. Такое распределение концентрации обеспечивает устойчивость градиента плотности, а следовательно, и вязкости, вследствие чего граница седиментации также является устойчивой. После окончания центрифугирования и при манипуляциях с пробиркой при анализе полученная граница не искажается.
Предыдущая << 1 .. 96 97 98 99 100 101 < 102 > 103 104 105 106 107 108 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама