Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 122

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 116 117 118 119 120 121 < 122 > 123 124 125 .. 126 >> Следующая

Таким образом, можно получить ценные результаты о вторичной и третичной структурах макромолекул по изменению их спектра ЯМР при действии различных агентов, изменяющих внутримолекулярные связи и, следовательно, характер внутримолекулярных движений.
И з у ч е н и е с к о р о с т е й процессов и молекулярного движения. ЯМР успешно применяется для исследования скоростей как очень быстрых обменных процессов, так и медленных процессов изотопного замещения.
При наличии обмена между химическими группами вид спектра ЯМР будет различным в зависимости от скорости обмена^. Если среднее время жизни т данного ядра в каждой химической группе велико по сравнению со временем, затрачиваемым на переход, то будут наблюдаться два отдельных пика, соответствующих обеим химическим группам. Картина меняется, если скорость обмена настолько велика, что время жизни в каждом химическом состоянии много меньше времени перехода между ними. В этом случае наблюдается одна узкая линия в положении, промежуточном между обеими группами (рис. 11). Положение этой линии смещается линейно в зависимости от концентрации той и
313
другой групп, совпадая в крайних точках с положением линий в отсутствие обмена. Положение резонансной линии можно измерить проще и гораздо точней, чем ее интегральную интенсивность. Поэтому ЯМР является удобным методом для измерения константы скоростей и порядка реакций, которые трудно исследовать другими способами. Наиболее удобны для изучения реакции со средним временем жизни реагирующих соединений между 0,1 и 0,0005 сек. Возможности этого направления в приложении к скорости биохимических процессов все еще недостаточно исследованы.
Рис. 11. Схематическое представление изменения формы резонансных линий при обмене протонов между двумя магнитно неэквивалентными положениями А и В для [А]/[В]=1 в зависимости от скорости обмена
а — % ~ 100у2~ (пЬдвН)-1; б — х~ ~ 10уТ(пИлвЯ)-1; в-т-Т/Т (лолвЯ)-1; г — т~0,01]/2"
Кинетика медленного изотопного замещения легко регистрируется по изменению площади сигнала с течением времени. Вишня и Саундерс исследовали кинетику обмена протонов NH-rpynn рибонуклеазы в D2O в кислой области [31]. Было обнаружено, что часть протонов обменивается гораздо медленнее других. Изучение этого явления привело авторов к заключению, что медленно обмениваемые протоны принадлежат гуанидиновым группам аргинина. При помощи ЯМР исследовали кинетику дейтерирования ряда белков и ее связь со стабильностью белковой молекулы и механизмом денатурации физическими и химическими агентами [32].
Взаимодействие между молекулами. При помощи ЯМР по изменению химических сдвигов, ширины линии
"--) и значения Ti можно обнаружить и изучить специфиче-
ское и неспецифическое взаимодействие между молекулами и образование комплексов с металлами.
Водородная связь. Резонансный пик протонов, связанных водородной связью, наблюдается при более низких полях, чем для протонов, присоединенных к тому же атому в отсутствие
л_л_
S
Развертка магнитного поля
314
водородной связи. Это происходит за счет уменьшения в результате электростатического взаимодействия эффективной электронной плотности у протона. Например, измерение химических сдвигов протонов воды в концентрированных растворах бычьего сывороточного альбумина показало, что при этом не происходит изменения числа водородных связей по сравнению с чистой водой і[33]. Так как в бычьем сывороточном альбумине имеется около 40% гидрофобных остатков, Бови заключил, что на гидрофобных частях белка водородные связи молекул воды друг с другом приводят к образованию ориентированных слоев воды.
Взаимодействие воды с биологическими структурами. Многочисленные данные ЯМР по взаимодействию воды с биополимерами не позволяют в настоящее время сделать однозначных выводов о характере такого взаимодействия. Этот вопрос подробно рассмотрен нами в специальном обзоре по применению ЯМР в биологических исследованиях [8].
Комплексообразование с металлами. При помощи ЯМР получено первое прямое доказательство различия фосфатных групп АТФ в образовании комплексов с металлами [26]. Химические сдвиги фосфорных пиков показывают, что ионы Mg++, Са++ и Zn++ образуют комплексы преимущественно с двумя концевыми фосфатными группами АТФ.
Определение химических групп, участвующих в образовании специфических комплексов. С этой целью были проведены исследования взаимодействия пенициллина и стрептомицина с сывороточным альбумином [34] и комплекса энзим — коэнзим в случае никотинамиддинуклеотида (НАД) и алькогольдегидразы [35]. Применение ЯМР в исследованиях такого рода ограничено малой чувствительностью метода, требующей сравнительно высокой концентрации исследуемых молекул в.растворе. Дополнительное использование многоканального цифрового анализатора позволило Жардецкому и другим [35] повысить чувствительность ЯМР-спектрометра в 20 раз. Методика обеспечила возможность исследования спектра ЯМР 0,002 M раствора НАД в D2O. В спектре НАД в присутствии алкогольдегидразы происходит исчезновение пиридиновой части спектра, что является прямым указанием на определяющую роль пиридиновой части молекулы при взаимодействии НАД и фермента.
Предыдущая << 1 .. 116 117 118 119 120 121 < 122 > 123 124 125 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама