Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 28

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 126 >> Следующая

Рис. 1. Один из способов изготовления коллодиевой пленки
1
коллодиевая пленка на поверхности воды; 2 — сетка
73
в. Методы контрастирования молекул белков, нуклеиновых кислот, вирусов
Контрастирование оттенением. Прежде всего производится испарение металла в вакууме. Прн этом атомы металла разлетаются от места испарения по прямолинейным траекториям. Если под некоторым углом к направлению пучка распыляемых частиц поместить исследуемый объект, то на его поверхности будет осаждаться слой металла различной толщины. На участках, расположенных перпендикулярно к направлению полета частиц, образуется наиболее толстый слой. В тех местах, где объект будет экранировать пучок частиц, возникают «тени» (рис. 2). Рассеяние электронов для различных участков объекта оказывается различным, в результате чего контрастность изображения возрастает. В связи со специфическим явлением образования тени, угол между направлением распыляемых частиц и объектом называется углом оттенения, а сам метод — методом оттенення.
На отпечатках микрофотографий оттененных объектов, выполненных непосредственно с негативов, «тени» выглядят светлыми (рис. 3, а). Однако привычнее наблюдать тенн темными. Поэтому микрофотографии таких объектов обычно делаются как негативные отпечатки, сделанные при помощи промежуточного позитива (см. рис. 3, б).
¦ Рассматриваемый метод позволяет не только увеличить контрастность изображения, но и установить размеры исследуемых объектов. Действительно, измерив длину тени / и зная угол оттенения В, можно определить высоту объекта h (см. рис. 2, п)
A = Ztge. (1)
Рис. 2. Схематическое изображение
оттенения а — распределение металла и образование тени прн использовании метода оттенения; б — образование тени от объекта сферической или цилиндрической формы; / — объект; 2 — поддерживающая пленка; Я — оттеняющий напыленный слои; 4 — источник испаряющегося металла; h — высота объекта; I — длина тени; t — толщина оттеняющего слон; 0 —угол оттенения; г — радиус сферической частицы; R — расстояние от испарителя до поверхности
Рис- 3- Вирус табачной мозаики. Углеродная реплика с предварительным от-течением сплавом платины с палладием. Отношение длниы- теии к высоте объекта 4:1.
о — отпечаток с негатива; б — позитив; 1 — длина тени; S — ширина частицы; в — схематическое изображение углеродной реплики с предварительным оттенением; частицч BTM просматривается вдоль оси
Зпкаа 648U
Для сферической или цилиндрической частицы (см. рис. 2, б) радиус частицы г определяется по формуле
(2)
Для небольших углов оттенения практически можно использовать формулу
где D — диаметр частицы. Величина угла оттенения 8 обычно выражается через tg0 или дается как отношение длины тени к высоте объекта, например, 5: 1 или 10:1.
Существенным недостатком метода является ограничение разрешения деталей объекта величиной зерна напыленного металла. Атомы металла, нанесенные на подложку, агрегируют. Величина агрегатов зависит в первую очередь от природы атомов и поверхности подложки. По мере накопления новых атомов размеры агрегатов увеличиваются, образуются кристаллы металла. При уменьшении угла оттенения неровности слоя металла увеличиваются благодаря скоплению атомов в местах попадания первых атомов [15], что на практике приводит к увеличению зерна. На поверхности подложки всегда имеются неровности и загрязнения, например, за счет попадания паров масла из диффузионного насоса. Это также способствует увеличению зернистости при небольших углах оттенения. В напыленных слоях некоторых металлов значительное увеличение зернистости (грануляции) может возникнуть под электронным пучком в процессе просмотра образца.
Тонкие слои металла при прочих равных условиях обладают меньшей зернистостью, но контрастность изображения при этом снижается. Чтобы обеспечить удовлетворительную контрастность при минимальном напыленном слое, металл должен обладать большой рассеивающей способностью для электронов и большой плотностью.
Чаще всего для оттенения белковых молекул [16], вирусов [17], нуклеиновых кислот [16—27], рибосом [28] используются платина, палладий, сплав платины с палладием, вольфрам, реже — уран. В табл. 2 приведены некоторые данные по этим металлам.
Платина обладает большой плотностью и устойчивостью к электронной бомбардировке. Можно получить размеры зерна платины менее 25 А [7, 10]. Недостатком является то, что платина сплавляется с вольфрамом, из которого обычно делают нагреватели, поэтому ее трудно испарить. Сплав платины с палладием (отношение платины к палладию от 3:1 до 4:1) испаряется легче, чем платина, и также характеризуется небольшим зерном. Палладий обладает несколько меньшей, чем платина, рассеивающей
D«/tget
(3)
75
Таблица 2
Свойства материалов, рекомендуемых для контрастирования оттенением и изготовления реплик
Материал Назначение материала Толщина * слоя (t), Л Плотность {P), г;см Температура плавления, 0C Величина зерна напыленных слоев **, A Взаимодействие с испарителем из вольфрамовой проволоки
Платина . . . Оттене-ние 7 21,45 1774 Менее 25 Значительное
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама