Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 30

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 24 25 26 27 28 29 < 30 > 31 32 33 34 35 36 .. 126 >> Следующая

Оттеиение производится в специальных вакуумных установках. Принципиальная схема такой установки представлена на рис. 5, а, б. Чтобы получить удовлетворительную контрастность, давление в момент испарения должно быть не более 5- 10~5 мм рт. ст. При более высоком давлении увеличивается рассеивание атомов металла на молекулах газов, частицы попадают на участки теней, что ведет к снижению контрастности.
Для удовлетворительного оттенения необходимо задать количество испаряемого металла. Если допустить, что распыляемый материал распространяется равномерно во все стороны от точечного источника, то количество металла, напыляемого на единицу площади поверхности (W, в г/см2), наклоненной по отношению к пучку распыляемых частиц на угол Э, будет равно
W= -У— sine, (4)
где M — вес испаряемого металла (в г); R— расстояние от испарителя до поверхности (в см). С другой стороны, это количество металла можно выразить через толщину напыленного слоя и плотность металла
W = *р, (5)
где t — толщина напыленного слоя (в см); р — плотность металла (в г/смг).
Подставляя значение W в уравнение (4), получим формулу для определения количества металла (в г)
M = ^p. (6)
sin 6
Таким образом, количество металла для испарения пропорционально квадрату расстояния, увеличивается с уменьшением угла оттенения и зависит от свойств металла.
Экспериментальное исследование показывает, что в некоторых случаях формула (6) дает существенную ошибку. Это связано с неравномерностью распыления металла во все стороны, неточностью оценки толщины напыленного слоя и его плотности. Кроме того, если испаряемый металл реагирует с вольфрамом, часть его сплавляется с нитью. Бредли [7] рекомендует пользоваться формулой (6), подставляя в правую часть равенства
79
коэффициент 4/з и используя значения толщины напыленных слоев, приведенные в табл. 2. В этом случае формула будет выглядеть так:
M=1-^. (7)
Формула (7) полезна для приближенной оценки навески металла в тех случаях, когда экспериментатор начинает работать с новым, не знакомым ему оттеняющим материалом, или когда угол оттенения меняется.
Количество металла, необходимое для оттенения, можно определить также 'И экспериментально. Для этого берут навеску металла, например, определенную по формуле (7), и производят ее испарение. Контроль за испарением легко вести при помощи пластинки белой керамики, помещая на нее небольшую каплю диффузионного масла. Во время испарения слой осаждающегося металла отчетливо виден на всей поверхности керамической пластинки, за исключением масляного пятна. После контроля качества оттенения непосредственно в электронном микроскопе навеска испаряемого металла в случае необходимости изменяется и в процессе испарения керамика доводится до большего или меньшего потемнения. Большинство металлов сплавляется с вольфрамом. Влияние этого взаимодействия невозможно учесть, поэтому контроль за оттенением по керамической пластинке всегда остается полезным.
Большое значение имеет правильный выбор материала подложки. Собственная структура подложки должна быть незначительной по сравнению с размерами оттеняемых частиц. В качестве подложки для препарата при оттенении обычно используют коллодиевые или углеродные пленки. При использовании реплик с предварительным оттенением, о которых мы еще будем говорить, оттеняемый препарат обычно помещают на идеально гладкую поверхность слюды.
При выборе угла оттенения руководствуются главным образом профилем объекта и его размерами. В случае оттенения вирусов, белковых кристаллов, бактерий использовать углы, для которых tg9<75 нецелесообразно. Для оттенения нитевидных молекул, в связи с их малыми поперечными размерами, tg 6 уменьшают до 1Ao-
Измерив длину тени и зная угол оттенения, можно без особых затруднений по формулам (1—3) определить 'высоту объекта. Рассмотрим эту операцию на примере вируса табачной мозаики (BTM). Как известно, BTM представляет собой цилиндрический полый стержень диаметром около 170 А, построенный из одинаковых, расположенных по спирали белковых субъединиц. На микрофотографиях этого вируса, контрастированно-го оттенением, его частица выглядит как палочка (см. рис, 3).
80
Чтобы определить диаметр частицы, необходимо измерить длину тени в направлении оттенения. Для этой цели удобно использовать частицы, ориентированные перпендикулярно направлению оттенения. Замеры показывают, что длина тени (/) составляет около 700 A. Отношение длины тени к диаметру частицы составляет в данном случае 4: І (tgQ = 1/^). Простой расчет показывает, что диаметр BTM равен 170 A. При оттенении происходит накопление металла на объекте. Связанное с этим искажение реальных размеров оттененных частиц исследовалось при помощи измерения ширины частиц ВТМ, ориентированных параллельно оттенению. Оказалось, что их ширина увеличивается пропорционально количеству напыленного металла [16, 30]. На приводимой нами микрофотографии ширина таких частиц (S) составляет около 200 А, т. е. отличается от реальных размеров на 30—40 A. Это необходимо учитывать при определении размеров небольших частиц, например «сферических» вирусов. Размеры тех же частиц ВТМ, определенные по длине отбрасываемой тени, как мы показали выше, практически не отличаются от реальных размеров.
Предыдущая << 1 .. 24 25 26 27 28 29 < 30 > 31 32 33 34 35 36 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама