Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 51

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 126 >> Следующая

130
денатурирующего агента (например, при охлаждении). Почти полное восстановление величины гипохромного эффекта не означает, что произошла истинная ренатурация, так как образование участков с неспецифическим (некомплементарным) спариванием оснований также приводит к гипохромному эффекту. Чтобы отличить истинную ренатурацию от ложной, ДНК повторно нагревают [3]. Если при этом переход спираль — клубок будет таким же резким, как и при первом нагревании, то, значит, ренатурация была истинной; если он окажется размазанным по большому интервалу температур, то, следовательно, имело место неспецифическое спаривание. Быстрое охлаждение приводит к неспецифическому спариванию оснований, а медленное, особенно выдержка при температурах, несколько меньших температуры начала плавления, способствует истинной ренатурации.
При помощи измерений спектров нуклеиновых кислот можно определить нуклеотидный состав полимеров (10]. Это делается следующим образом. Было обнаружено, что спектр денатурации, т. е. разность между поглощением денатурированной и нативной нуклеиновой кислоты как функция длины волны, линейно меняется с изменением ГЦ-состава полимера. В частности, для ДНК
Ae^ = (l-a)AlF + aAe?u._ _ (19)
В этой формуле а — доля ГЦ пар в полимере; Ає?т и ДєхЦ ¦— некоторые эмпирически найденные для каждой длины волны коэффициенты.
При помощи формулы (19) был найден ГЦ состав ряда нуклеиновых кислот [10]. Было показано [12], что формула (19) справедлива в области значений а от 0,3 до 0,7. Однако в этой же работе найдено,
что Ае?т и Де?ц значительно отличаются от соответствующих величин для синтетических полинуклеотидов (поли dV: d\\ и поли dkl:dkl). Это означает, что зависимость Ae^ (а) не является линейной, но в определенном интервале значений а может быть при современной точности измерения разностных спектров апроксимирована прямой линией. Отметим, что, поскольку гипохромный эффект обусловлен взаимодействием оснований вдоль, а не поперек цепи, формула (19) ни в коем случае не должна быть справедлива для всех возможных значений а. Можно показать, что при имеющейся экспериментальной точности справедливость формулы (19) в области значений а от 0,3 до 0f7 не противоречит существующим представлениям.
Определение степени спиральности полипептидов и белков спектрофотометрическим методом. Гипохромный эффект полипептидов и белков максимален при длине волны 190 ммк. Поэтому исследования конфор-мационных изменений этих полимеров спектрофотометрическим методом весьма затруднительны и не получили распространения,
9* 131
тем более, что имеется значительно более простой и доступный метод дисперсии оптической активности (см. параграф 3). Однако в ряде случаев, когда метод оптической активности неприменим (например, для смеси правых D- и левых L-спиралей), спек-трофотометрический метод может оказаться весьма полезным. Используя гипохромный эффект при 190 -ммк, Розенхек и Доти і[6] определили степень спиральности полипептида, состоящего из D- и L-участков, а также нашли степень спиральности различных белков. Исследование белков осложняется тем, что боковые группы тоже поглощают в рассматриваемой области.
2. Инфракрасная спектроскопия
Прошедшее десятилетие характеризовалось энергичным и разнообразным применением инфракрасной спекроскопии для изучения различных классов биологически важных соединений: аминокислот, пептидов, стероидов, витаминов, липидов, полисахаридов, белков, нуклеиновых кислот. Однако основная часть работ посвящена изучению спектров полипептидов и белков, и здесь достигнуты наибольшие успехи, чему способствовало развитие химии синтетических полипептидов. Около 15 лет назад исследование инфракрасного дихроизма в фибриллярных белках позволило высказать мысль о существовании спиральной конформации их молекул. Это было важным вкладом в наши знания о строении белков. Приблизительно с этого времени начинается широкое использование инфракрасной спетроскопии в молекулярной биологии в основном по трем направлениям: 1) в качестве аналитического средства; при этом строгое соответствие спектральной кривой структурной формуле исследуемого вещества позволяет однозначно различать соединения с небольшими структурными особенностями; 2) для определения структурных формул биологических соединений; 3) как метода для изучения пространственной конформации биополимеров.
В связи с развитием техники измерения инфракрасных спектров, в настоящее время получить их стало довольно просто. Точно так же относительно несложно может быть извлечена из спектров первичная информация. Последнее, однако, требует знания основ теории колебаний и происхождения инфракрасных спектров. Данный раздел знакомит читателей с основами теории инфракрасных спектров и особенностями применения метода инфракрасной спектроскопии к решению различных структурных и физико-химических задач молекулярной биологии.
а. Получение инфракрасных спектров
Происхождение инфракрасных спектров обусловлено главным образом колебаниями атомов в молекуле. Спектр, как правило, состоит из большого числа полос, причем для молекулярного
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама