Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 64

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 58 59 60 61 62 63 < 64 > 65 66 67 68 69 70 .. 126 >> Следующая

WO
Рис. 17. Кривые плавления тимусной ДНК
/ — измерена по изменению оптической плотности при 259 ммк; 2 — измерена по изменению удельного вращения [а)о
плоскости поляризации. Раствор одинаковых концентраций пу-риновых и пиримидиновых оснований оказывается почти неактивным. Того же результата можно ожидать для полностью разупорядоченной (клубковой) конформации нуклеиновых кислот, что и наблюдается на опыте. Однако, как и для полипептидов, вторичная структура нуклеиновых кислот дает вполне заметное положительное вращение. Удельное вращение, измеренное при длине волны 589 ммк, для ДНК из спермы лосося равно 125°, а для РНК, выделенной из печени крысы,— 133°.
На основании различия в удельном вращении плоскости поляризации нуклеиновых кислот в нативном и денатурированном состоянии можно использовать измерение вращения плоскости поляризации в качестве метода для определения степени спи-ральности этих макромолекул. На рис. 17 [32] представлены кривые плавления ДНК, полученные по гипохромному эффекту
162
в полосе поглощения 259 ммк и по измерению удельного вращения.
Как видно, эти кривые плавления хорошо совпадают. С чем связано небольшое увеличение вращения в области температур от 50 до 80°, пока неясно. Не исключено, что в этой температурной области ДНК изменяет свою структуру.
Рис. 18. Кривые дисперсии оптической активности
а — ДНК из спермы лосося: / — нативная ДНК в 0,15 M NaCl+0,15 M KF1 pH 7,0; 2 — денатурированная ДНК в том же буфере при 90° С; 3 —то же + NaOH, pH 12,3; б — РНК из печени крысы: / — нативная РНК в 0,15 M NaCl+0,01 M фосфатного буфера, pH 7,0 при 27° С; 2 — денатурированная РНК в том же буфере прн 90° С; 3 — денатурированная РНК в том же буфере + NaOH, pH 12,3
Метод дисперсии оптической активности для нуклеиновых кислот оказывается менее полезным, чем для белков и полипептидов. Как указывалось в начале главы, при образовании полинуклеотидов не происходит заметного расщепления полос поглощения оснований. В соответствии с этим дисперсия оптической активности полинуклеотидов в спиральной и клубковой конфор-мации удовлетворяет одночленному уравнению Друде (30) в области спектра от 300 до 600 ммк и поэтому нет такого удобного параметра в уравнении, описывающего дисперсию оптической активности, как Ь0 для полипептидов и белков.
Параметры уравнения (30) для ДНК имеют следующие значения: а = 39,0, Xc = 234 ммк — для нативной ДНК спермы лосося и а = 40,0, Xc =244 ммк — для нативной РНК печени крысы.
Исследование аномальной дисперсии оптической активности нуклеиновых кислот позволило связать образование вторичной структуры с положением и величиной амплитуды кривой аномальной дисперсии оптической активности. На рис. 18, Л и 18, ? [33] представлены кривые аномальной дисперсии оптической активности для ДНК и РНК соответственно. Приведены кривые аномальной дисперсии оптической активности, отвечающие
11* 163
различным конформациям нуклеиновых кислот. Как в случае ДНК, так и в случае РНК кривые аномальной дисперсии оптической активности претерпевают изменения при переходе макромолекулы от одной конформации к другой.
Несомненный интерес представляют измерения аномальной дисперсии оптической активности и циркулярного дихроизма в полосе поглощения синтетических полинуклеотидов, в частности полирибоадениловой кислоты (полиА) и коротких однонитевых фрагментов полирибоадениловой кислоты вида ApA (две молекулы аденозина соединенных фосфодиэфирной связью), которые
[R] ¦1D-'
200 250 300 ' ' ' Л, ммк 220 2UO 260 280 300 Л,нмх
Рис. 19. Аномальная дисперсия опта- Рис. 20. Спектры циркулярного
ческой активности дихроизма {I) и поглощения (2)
і — полиА при 22° с, рн 7,0; 2 — димеры димеров аденина ApA
аденина ApA при 25" С, pH 5,9; 3 — мономеры аденина Ap прн 25° С, pH 5,9. При этих условиях полиА находится в состоянии однонитевых спиралей
в дальнейшем для простоты мы будем называть просто димерами аденина [34, 35]. Эти измерения можно привести как иллюстрацию успешного применения методов исследования оптической активности для определения структуры биополимеров. Кривые аномальной дисперсии для полиА и димеров аденина имеют асимметричный вид (рис. 19) и очень напоминают схематические кривые аномальной дисперсии оптической активности, изображенные на рис. 13 на основании рассмотрения простейшей модели Куна. То же можно сказать и про кривые циркулярного дихроизма (рис. 20). Интересно заметить, что уже димеры аденина (см. рис. 19, кривая 2) обладают аномальной дисперсией оптической активности с такой же асимметричной кривой, как для полиА при pH 7,4.
164
При измерении оптической активности было установлено, что, кроме двухнитевой спиральной структуры полиА при pH 4,5, в стабилизации которой определенную роль играют водородные связи, образующиеся между нитями, существует однонитевая спиральная структура полиА, стабилизация которой при нормальных pH в основном определяется вандерваальсовым взаимодействием соседних оснований вдоль цепи макромолекулы.
Измерение циркулярного дихроизма димеров аденина позволило определить угол между осцилляторами, а, следовательно, и угол между основаниями в димере (35].
Предыдущая << 1 .. 58 59 60 61 62 63 < 64 > 65 66 67 68 69 70 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама