Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 73

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 126 >> Следующая

о о
мощность излучения. Если мы выделим на графике полоску, соот-
1 Очень часто вместо распределения мощности излучения в частотах дают
- 1 ^
распределение ее в так называемых волновых числах: v = —. Это распределение
X
отличается от распределения в частотах только постоянным множителем с, который не имеет существенного значения, так как кривые спектрального распределе -ния всегда строятся в произвольно выбранном масштабе.
183
ветствующую двум каким-нибудь значениям длин волн — X1 и X2 (или двум значениям частоты V1 и v2), то площадь этой полоски изображает в принятом масштабе мощность излучения в полосе между X1 и X2 (или соответственно между V1 И V2).
Монохроматоры. В настоящее время в практике спектральных исследований применяются монохроматори двух типов: в одних из них диспергирующим (разлагающим излучение в спектр) элементом является дифракционная решетка, в других — призма из стекла
у-Ю'^сен4 5,3 6,0 5,7 5,4 5,1 4,8
К, MMK
Рис. 28. Профиль полосы флуоресценции раствора акридинового оранжевого в шкале длин волн (1Х, кривая 1; ось абсцисс внизу) и в шкале частот (/v, кривая 2, ось абсцисс наверху)
или кварца. В монохроматорах первого типа дисперсия линейна, т. е. длина волны выделяемого излучения практически прямо пропорциональна углу поворота решетки. В силу этого оптическая ширина щели прибора в шкале длин волн AX остается постоянной при всех длинах волн. В призменных монохроматорах с уменьшением длины волны дисперсия растет, и оптическая ширина щели AX соответственно уменьшается. С достаточным приближением можно считать
что AX ~ — .
x2
Из этого ясно, что в монохроматорах с дифракционной решеткой мощность измеряемого излучения пропорциональна спектральной ин-
184
тенсивности в шкале длин волн: W% ~h. Чтобы получить относительные значения Iv, нужно измеренные значения мощности умно-X2
жить на — (41). При применении призменных монохроматоров для о
получения относительных значений Ix нужно измеренные значения мощности W% умножить на Xі, а чтобы получить относительные значения Iv, нужно умножить W% на Xі.
Монохроматоры с дифракционной решеткой имеют в прикладных, в частности люминесцентных, исследованиях ряд весьма существенных преимуществ. Важнейшим из них является линейность дисперсии и вытекающее из нее постоянство ширины оптической щели по всему спектру (в шкале длин волн). Это существенно облегчает построение регистрирующих установок с автоматической записью кривых спектрального распределения на самописце и дает возможность работать с достаточно широкими щелями и в длинноволновой (красной) области спектра. К сожалению, однако, все монохроматоры, выпускаемые отечественной промышленностью (типы УМ-2, ЗМР-3 и ДМР-4), являются призменными.
Прием н и кчи излучения и калибровка установок. При работе в видимой и ультрафиолетовой областях в качестве приемников излучения сейчас применяют почти исключительно фотоэлектронные умножители (ФЭУ). Эти приемники являются селективными, т. е. чувствительность их к излучениям различных длин волн неодинакова. Кроме того, и пропускание света всей спектральной установкой также селективно. Поэтому измеряемый фототок отнюдь не пропорционален мощности излучения, выделяемого монохроматором из состава данного излучения. Если обозначить функцию спектральной чувствительности ФЭУ через S(X), пропускание прибора — через T(X) и измеренный фототок — 1(Х), то истинная мощность данного потока излучения
W(X)= 1{Х) . <43)
W S(X)T (X)
Поэтому для измерения мощности W(X) и вычисления значений спектральной интенсивности Л, или Iv спектральную
установку следует калибровать, т. е. получить систему множи-\
телей K(X)=--, на которые нужно умножить показа-
S(X) T(X)
ния измерительного прибора для получения истинных относительных значений W(X). Проще всего это осуществляется при помощи эталонных ламп, т. е. источников света с точно известным спектральным расределением ,мощности. Поместив такую лампу в то место, где при нормальной работе находится кювета с флуоресцирующим раствором, снимают на данной установке спектр лампы. Сравнив полученную кривую с точно известной
185
для эталонной лампы кривой, получают искомую систему поправочных коэффициентов K(X). Калибровку следует повторять не реже раза в год и производить ее заново при смене ФЭУ даже в том случае, когда новый ФЭУ принадлежит к тому же типу и марке, что и старый.
Нор мир о вік а спектральных кривых. На практике измерения абсолютного значения мощности излучения, выделяемого монохроматором, производятся очень редко. Обычно измеряют относительные значения величин Ix или Iv, принимая за единицу их значения при определенной длине волны. Чаще всего за единицу принимают значения Ix или Iv в максимуме (или в одном из максимумов) спектральной полосы флуоресценции. Такой способ дает возможность наглядно судить о форме или профиле этой полосы.
Такой же способ нормировки применяется обычно для сравнения спектров различных веществ или спектров, снятых при разных условиях. Каждый спектр при этом нормируется по своему максимуму. В некоторых случаях, особенно тогда, когда сравниваемые спектры существенно отличаются по ширине, предпочтительнее нормировать их по площади, т. е. так выбирать масштабы для сравниваемых спектров, чтобы площади под всеми кривыми были равны. Наконец, иногда- бывает полезно нормировать спектры так, чтобы площади кривых под ними оказались пропорциональными значениями квантовых выходов соответствующих растворов.
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама