Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Новые книги
Якименко Л.М. "Производство хлора, каустической соды и неорганических хлорпродуктов" (Неорганическая химия)

Войткевич С.А. "Эфирные масла для парфюмерии и ароматерапии" (Ароматерапия)

Николаевский В.В. "Ароматерапия. Справочник" (Ароматерапия)

Леонова Н.С. "Ароматерапия для начинающих" (Ароматерапия)

Артемова А. "Ароматы и масла исцеляющие и омолаживающие" (Ароматерапия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 74

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 68 69 70 71 72 73 < 74 > 75 76 77 78 79 80 .. 126 >> Следующая

г. Энергетический и квантовый выход флуоресценции
Определение. В биологических (и вообще прикладных) исследованиях очень часто сопоставляют значения интенсивности (мощности) флуоресцентного излучения в разных объектах и при разных условиях. Следует подчеркнуть, что эта величина, даже измеренная при постоянной интенсивности возбуждающего света, т. е. отнесенная к единице мощности возбуждающего излучения, не имеет определенного физического смысла и не может служить характеристикой изучаемой системы. Информационная ценность ее чрезвычайно ограничена. iB самом деле, если в том или другом случае мы наблюдаем изменение интенсивности флуоресценции, то без контроля сопутствующих изменений поглощения ничего не можем сказать об изменении эффективности самого процесса флуоресценции.
Эффективность !процессов преобразования поглощенной молекулой энергии в излучаемую характеризуется значениями энергетического или квантового выхода флуоресценции. Строгие определения этих величин -следующие.
1. Энергетическим выходом флуоресценции называют отношение энергии, излученной веществом за некоторое время, к энергии, погло-
186
щенной им за это же время. Иными словами, если Wmn есть мощность (интенсивность) излучения, a WW л— мощность поглощения, то энергетический выход флуоресценции
W
„ изл / л м\
П=?-• (44)
" погл
При этом предполагается, что наблюдения ведутся в стационарном режиме, когда уже достигнуто равновесие между поглощением и излучением, и величины W11311 и W„orfi имеют постоянные значения. Практически в интересующих нас случаях требование стационарности не накладывает дополнительных экспериментальных ограничений, так как стационарный режим флуоресценции устанавливается за очень короткое время — порядка Ю-8—Ю-9 сек.
2. Квантовым выходом флуоресценции называют отношение числа квантов, излучаемых системой в стационарном режиме за единицу времени («изл). к числу квантов возбуждающего излучения, поглощенных системой за то же время (плогл),
п
изл /лг-\
P =--. (45)
"погл
Эта величина представляет собой, очевидно, вероятность того, что молекула, поглотившая квант возбуждающего света, испустит квант излучения флуоресценции.
Если мы определим среднее значение частоты излучения (<у)ИЗл) и среднее значение частоты поглощенного кванта возбуждающего излучения «v>no™) при помощи соотношений
Пизл/t (У)изл = №изл; tlnoTJl <V>nort = №погл, (46)
то связь между значениями 'квантового и энергетического выхода флуоресценции, очевидно, определится соотношением
^^ИЗЛ . / Л-7\
ті=—-р. (47)
<v>
N "погл
Закон Вавилова. Фундаментальное соотношение между выходом флуоресценции и длиной волны (частотой) возбуж-
1 Зная спектральное распределение интенсивности флуоресценции по частотам которое при стоксовском возбуждении не зависит от частоты возбуждения, можно вычислить среднюю частоту излучения из соотношения
(\}тл = ^vIvdvI jv.
Среднюю частоту поглощенного кванта <(v>nomтакже можно вычислить, если известны спектр возбуждающего излучения н спектр поглощения данного вещества.
187
WO 200 300 WO ООО Sa А, ж;
Рис. 29. Зависимость энергетического выхода флуоресценции от длины волны возбуждающего света [581
Рис. 30. Проверка закона Вавилова для большой группы флуоресцирующих веществ [59]. Относительный кванто-пый выход люминесценции в зависимости от длины волны возбуждающего света
/ — родамин; 2 — эскулин; 3— урановое стекло; 4 — роза бенгальская; 5 — нафтол; 6 — родамин кислый; 7 — сульфорода -мин; S — хннин бисульфат; 9 — бензофлавин; 10 — эозин; // — трнпафлавнн; 12— флуоресцеин; 13— акридин; 14 — эри-трозин
дающего света, установленное С. И. Вавиловым [57] и носящее поэтому его имя, гласит: 1B стоксовской части спектра поглощения квантовый выход флуоресценции не зависит от длины возбуждающего света; в антистоксовской части спектра он быстро спадает с увеличением длины волны (уменьшением частоты) возбуждающего света1.
Так как при стоксовской возбуждении спектр излучения и, стало быть, значение средней частоты излучения (V)113J1 не зависят от длины волны возбуждающего света, то из постоянства квантового выхода и соотношения (47) следует, что в этой области энергетический выход
Флуоресцеин в боде " *
флуоресценции линейно падает с увеличением частоты (уменьшением длины волны) возбуждающего света (рис. 29).
Сформулированная выше закономерность, установленная Вавиловым на примере растворов флуоресцеина, носит универсальный характер. Она была проверена и подтверждена для большого числа веществ различной природы (рис. 30).
Закон спадания квантового выхода флуоресценции в антистоксовской области и влияние на него температуры более детально исследованы в работе [58]. Было показано, что этот закон имеет экспоненциальный характер (рис. 31). Эти результаты были недавно проверены и подтверждены в работе [60].
Постоянство квантового выхода во всей стоксовской области возбуждения имеет ту же физическую причину, что и независимость формы спектра флуоресценции от длины волны возбуждающего света. Она заключается в том, что за время, очень малое по сравнению с длительностью возбужденного состояния, успевает установиться постоянное распределение возбужденных молекул по нижним колебательным подуровням первого возбужденного (флуоресцентного) состояния. К моменту излучения
Предыдущая << 1 .. 68 69 70 71 72 73 < 74 > 75 76 77 78 79 80 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое История химии Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Электрохимия Энергетическая химия
Реклама

Террасная доска из лиственницы

Продажа паркета и паркетной доски. Доска объявлений

sbles.ru

Мейн кун купить

Котята мейн кунов различных окрасов ищут хороших, заботливых хозяев

kun-cats.ru