Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 78

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 72 73 74 75 76 77 < 78 > 79 80 81 82 83 84 .. 126 >> Следующая

Примеры применения флуорометрических измерений в проблемах молекулярной биологии. Из того, что было сказано выше о связи между длительностью и выходом флуоресценции при наличии процессов тушения второго рода, следует, что биологическими процессами, в изучении которых применение люминесцентных методов представляется наиболее перспективным, являются процессы фотобиологические, в первую очередь процессы фотосинтеза. Поскольку во всех процессах этого рода большая или меньшая часть поглощенной световой энергии должна быть израсходована на осуществление той или иной фотохимической реакции и аккумулирована в ее первичных продуктах, то по отношению к флуоресценции все первичные акты этих процессов носят характер специфического тушения, дополнительного к тем процессам тушения, какие имеют место in vitro (в растворах).
Поэтому все эти процессы должны привести к уменьшению квантового выхода флуоресценции, а в тех случаях, когда они являются процессами второго рода,— и к сокращению ее длительности.
Так, например, уже сравнительно давно известно, что флуоресценция' хлорофилла in vivo, т. е. в клетках фотосинтезирую-щих организмов, значительно слабее, чем в растворах этого пигмента в спирте, эфире, ацетоне и в других растворителях. Если в растворах квантовый выход флуоресценции достигает 25—30%, то в клетках он примерно раз в 10 меньше [74]. В 1957 г. в трех лабораториях независимо друг от друга были впервые произведены измерения длительности флуоресценции хлорофилла in vitro и in vivo [75—77].
Оказалось, что и величина т для клеток значительно меньше, чем для растворов, хотя строгой пропорциональности между значениями р и т нет. Если для растворов величина т имеет значение 5—6 наносекунд (10~9 сек), то для фотосинтезирующих клеток значения т лежат около 1 наносекунды. Это указывает на то, что конкуренция за энергию возбуждения молекулы пигмента между первичным фотосинтетическим актом и флуоресценцией происходит во все время пребывания молекулы в возбужденном состоянии, но вероятность этого первичного акта не остается в тече-
197
ниє этого времени постоянной. По-видимому, это можно объяснить так же, как и аналогичные соотношения в случае концентрационного тушения в вязкой среде [62].
В клетке конкуренция между фотосинтезом и флуоресценцией складывается решительно в пользу первичного фотосинтетического акта. Сокращение выхода в 10 раз указывает на то, что примерно 90% возбужденных молекул дезактивируются не путем флуоресценции или внутренней конверсии, а через первичную фотохимическую реакцию. Этим, естественно, объясняется высокий квантовый выход реакции, в которой для фотосинтеза используется не только энергия, затрачиваемая в растворе на флуоресценцию, но и значительная доля энергии, обычно превращающейся в тепло.
С этой точки зрения можно было бы ожидать, что все факторы, вызывающие уменьшение эффективности первичного фотосинтетического акта, будут приводить к возрастанию выхода и длительности флуоресценции хлорофилла и, наоборот, всякое возрастание эффективности первичных фотосинтетических процессов должно сопровождаться уменьшением значений р и т. Исследователям [66] удалось показать, что при действии различных ингибиторов фотосинтеза величины р и т возрастают, достигая тех значений, какие они имеют в растворах. Напротив, по мере формирования фотосинтетического аппарата при освещении этиолированных (выращенных в темнотеТ листьев значения р и т падают. Все эти данные позволяют рассматривать значения величины т как очень удобную меру степени эффективности первичного фотосинтетического акта.
При помощи этого критерия можно было показать [78], что этот первичный акт, который, согласно современным представлениям о механизме фотосинтеза, нужно представлять себе как процесс передачи электрона от возбужденной молекулы хлорофилла к первичному акцептору (ферредоксину), является в широком температурном интервале температуронезависимым, т. е. что он представляет собой не обычную химическую реакцию, контролируемую температурой и диффузией, а электронный, фотофизический процесс, связанный, вероятно, с образованием так называемых комплексов с переносом заряда (charge transfer complex). Этот же критерий дал возможность довольно детально проследить за процессом фотохимического превращения про-тохлорофилла в хлорофилл в процессе зеленения этиолированных листьев [79].
Многие флуоресцирующие красители образуют прочные комплексы с белками и нуклеиновыми кислотами. Изучение люминесценции таких комплексов может быть источником ценной информации о вторичной структуре и молекулярной морфологии этих биополимеров. Для иллюстрации возможностей этих методов мы остановимся вкратце лишь на люминесцентном методе изучения
198
вторичной структуры нуклеиновых кислот, разработанном в на* шей лаборатории.
Детальное изучение всех характеристик люминесценции комплексов красителя акридина оранжевого (АО) с нативной двух-нитевой и (денатурированной) однонитевой ДНК [80] показало, что в первом случае, по крайней мере при не слишком высокой концентрации красителя, молекулы его, связанные с ДНК, сохраняют свою мономерную форму, тогда как при комплексировании с однотяжевыми структурами происходит в большей или меньшей мере димеризация этих молекул. Люминесценция мономеров
Предыдущая << 1 .. 72 73 74 75 76 77 < 78 > 79 80 81 82 83 84 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама