Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 81

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 75 76 77 78 79 80 < 81 > 82 83 84 85 86 87 .. 126 >> Следующая

Эти рассуждения показывают, что действительно излучение флуоресценции всегда должно быть в большей или меньшей мере поляризовано, причем степень поляризации может иметь любые значения, лежащие между +1/2 и —!/з- Эксперимент полностью подтверждает этот вывод.
Заметим, что для простоты мы рассматривали случай возбуждения флуоресценции поляризованным светом. Это, однако, не обязательно. Флуоресценция будет частично линейно поляризована и при возбуждении естественным светом, хотя степень поляризации в этом случае будет меньше. Анизотропия излучающих молекул (диполей) создается теперь тем, что возбуждаются преимущественно молекулы, у которых оси осцилляторов поглощения образуют небольшой угол с плоскостью, перпендикулярной к направлению возбуждающего луча (плоскостью zy на рис. 37). Расчет показывает, что если обозначить через р значение степени поляризации флуоресценции при возбуждении поляризованным светом, а через рп ту же величину при возбуждении естественным светом, то при прочих равных условиях эти величины связаны соотношением
Практически это важно потому, что в случаях, когда интенсивность флуоресценции мала, а степень ее поляризации достаточно велика, можно вести измерения наблюдения при возбуждении естественным светом, т. е. более чем вдвое увеличить интенсивность возбуждения и флуоресценции.
Экспериментальные методы измерения степени поляризации флуоресценции. Не будем останавливаться на визуальных и фотографических методах измерения величины (поляриметры Корню, Савара и др.), потому что в настоящее время эти методы практически полностью вытеснены фотоэлектрическими методами и применяются чрезвычайно ред-
204
ко. Описание этих методов можно найти в книге П. П. Феофило-ва [43] или в подробных классических курсах оптики.
Обычная схема опыта при измерениях поляризации соответствует рис. 37. Интенсивность флуоресценции измеряют фотоэлементом или фотоэлектронным умножителем, перед которым помещен анализатор (поляроид или поляризационная призма). Поворачивая этот анализатор вокруг оси пучка, определяют максимальное и минимальное значения силы фототока и вычисляют степень поляризации по формуле (63).
Этот простой статический метод достаточно точен, когда степень поляризации р велика, но для малых степеней поляризации он малопригоден. ЛеГКО ВИДеТЬ, ЧТО ЄСЛИ раЗНОСТЬ /маКс — Ашним, ВХОДЯЩЭЯ
в числитель формулы (63), мала, то относительная ошибка в определении р будет значительно больше, чем относительная ошибка в измерении каждой из величин /маКс и /Мииим- Практически этот метод непригоден, если измеряемая величина р становится сравнимой
S/
с относительной погрешностью измерения — .
От этого недостатка свободен предложенный автором этой статьи [91] дифференциальный, или динамический, метод, заключающийся в том, что анализатор, находящийся перед фотоэлектрическим приемником света флуоресценции, равномерно вращают с некоторой постоянной частотой /. Простой расчет показывает, что при этом в фототоке имеются постоянная составляющая, пропорциональная /макс + /миним, и переменная, синусоидальная, составляющая частоты 2/, амплитуда которой пропорциональна /макс — /миним- Таким образом, задача измерения степени поляризации излучения сводится к измерению отношения амплитуды переменной составляющей фототока к постоянной составляющей, т. е. к задаче измерения глубины модуляции фототока. Относительная погрешность измерения величины р при этом не зависит от значения этой величины.
В установке, описанной в работе [91], переменная составляющая тока компенсировалась поворотом стопы плоских пластинок, помещенной перед анализатором. В настоящее время в нашей лаборатории измеряют отдельно постоянную составляющую и амплитуду переменной составляющей фототока, которая усиливается резонансным усилителем и затем детектируется. Нетрудно и автоматизировать это измерение при помощи схемы, прямо измеряющей отношение двух токов или напряжений. Калибровочный множитель, на который необходимо умножить измеренное отношение двух токов для вычисления р, определяют, помещая перед анализатором поляризатор и определяя то отношение токов, которое соответствует значению р = 1,0.
Во всех измерительных установках, где плоскость поляризации действующего на приемник света' поворачивается, необходимо учитывать, что чувствительность фотоэлектрических приемников, особенно приемников с массивными, а не полупрозрачными
205
катодами довольно заметно зависит от ориентации плоскости поляризации относительно катода. Для устранения этого искажающего измерения и трудно контролируемого фактора необходимо помещать между анализатором и приемником деполяризатор, превращающий частично поляризованный свет в деполяризованный. В описанной установке [91] в качестве такого деполяризатора применялась пластинка из молочного стекла, сильно ослаблявшая интенсивность действующего на приемник света. В настоящее время мы применяем псевдодеполяризатор —вращающуюся вместе с анализатором клиновидную пластинку из кварца или исландского шпата. Такая пластинка не дает истинно деполяризованного света, но создает такую смесь различных форм поляризации, которая практически не отличается от деполяризованного света (о других псевдодеполяризаторах см. в книге Шерклиффа [92]).
Предыдущая << 1 .. 75 76 77 78 79 80 < 81 > 82 83 84 85 86 87 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама