Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 84

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 78 79 80 81 82 83 < 84 > 85 86 87 88 89 90 .. 126 >> Следующая

В нашей работе [100] сочетанием флуорометрических и поляризационных измерений удалось показать, что для транспортной РНК как до, так и после гидролиза ее рибонуклеазой время вращательной релаксации 0 значительно больше, чем можно было р бы ожидать для сферической
41/1 частицы того же объема. При
комнатной температуре, например, 6 = 4,4- 10~8 сек для нативной РНК и 3,7-Ю-8 сек для ^rV. \ гидролизованной, тогда как для
20
* 6
-Ц Ф0
- /
: о 2
-it—
Рис. 42. Изменение степени поляризации ко-фермента глутаматаспартаттрансаминазы (пи-ридоксаля) (/) и скомплексированного с ферментом красителя изоцианата флуоресцеина (2) от концентрации фермента; 3 — то же, для рибоиуклеазы, окрашенной тем же красителем
Рис. 43. Зависимость величины 6 для раствора акридинового оранжевого от концентрации добавленного аденина (1) или тимина (2) [97]
сферической частицы время 9 должно было бы быть равно 2,4- Ю-8 сек. Это расхождение указывает на значительную асимметрию молекулы тРНК- Сопоставление экспериментальных данных с расчетными (рис. 44) показало, что отношение осей для этих молекул имеет значения около 4,5: 1. Это позволило однозначно установить форму такой макромолекулы. В последнее время таким же путем удалось детально изучить вторичную структуру высокомолекулярной рибосомальной РНК [101].
Особенно перспективно применение этих методов в проблемах иммунохимии. Здесь уже давно применяется предложенный Кунсом [102] метод нанесения флуоресцирующей метки на антитела для изучения под микроскопом образования их комплексов
14* 211
с антигенами. Однако применение уточненных методов, основан ных на изучении поляризации и длительности флуоресценции, может дать в этой области значительно более богатые и важные результаты. Как указывают Дэндликер и другие [103], эти методы, с одной стороны, могут стать средством для изучения термодинамики и кинетики реакции антиген — антитело, а с другой — могут оказаться полезными в решении ряда практических проблем, среди которых эти авторы отмечают: 1) обнаружение иммунологических событий в тех случаях, где отсутствие вторичных явлений делает классические методы неприменимыми (например, для вирусных агентов, гаптенов и непреципитирующих антител) ; 2) изучение гипер-сенситизации in vitro; 3) измерение тонких различий в действии антигенов на организм хозяина в случае хронических заболеваний; 4) исследование количества и качества антител на протяжении курса иммунизации организма.
В указанной работе имеется много ценных теоретических расчетов и интересных экспериментальных данных, но она представляет собой, конечно, только первый шаг в этом весьма перспективном направлении.
0,3 0,4 *о/во
Рис. 44. Теоретические кривые зависи-
1
" з
от То/8о, рас-
мости отношения
1
Рй~~ 3
считанные по Веберу (сплошные линии), и экспериментальные данные (кружки и точки) для тРНК до и после обработки рибонуклеазой
з. Длительное послесвечение растворов сложных органических молекул
Условия возникновения длительного .послесвечения. При обычных условиях, т. е. в растворах малой вязкости (вода, спирт) и при комнатной температуре, флуоресценция органических молекул характеризуется, как мы видели, весьма малыми значениями длительности возбужденного состояния, измеряющимися миллиардными долями секунды. Однако еще с конца прошлого века (Видеман, 1887) было известно, что при помещении исследуемого вещества в твердые стеклообразные среды (сахарные леденцы, расплавы борной кислоты и т. п.),
212
Л. ммк
а также при охлаждении растворов до низкой температуры наблюдается длительное послесвечение, которое в благоприятных случаях можно наблюдать в течение нескольких секунд после прекращения возбуждения ', хотя обычно длительность этого послесвечения меньше и не превышает долей секунды. Закон затухания этого свечения экспоненциальный, но константа его всегда на много порядков превышает значения т для обычной флуоресценции.
Особое внимание к этим явлениям было привлечено в 20-х годах нашего века после работ Вавилова, Левшина, Прингсгейма и др. Сейчас явления, связанные с наличием длительного послесвечения, стоят в центре внимания как физиков, изучающих явления люминесценции, так и биологов, старающихся выяснить роль возбужденных состояний ароматических соединений в важнейших процессах жизнедеятельности.
При интерпретации этих явлений нужно иметь в виду прежде всего то, что длительное послесвечение не представляет собой просто процесса «удлинения» или «растяжки во времени» обычной флуоресценции, а является отдельным, самостоятельным процессом, накладывающимся на обычную флуоресценцию и сосуществующим с ней. Это следует из того, что при изучении образцов, обладающих длительным послесвечением, можно при помощи высокочастотного фазового флуорометра, описанного выше, легко выделить в свечении компоненту со значениями T порядка 10~9 сек. Это было бы невозможно, если бы мы имели дело с одной полосой свечения, затухающей как целое с константой порядка долей секунды или целых секунд.
Другой важный факт, обнаруженный впервые Вавиловым и Прингсгеймом [105], заключается в том, что следует различать два вида длительного послесвечения, отличных и по своим кинетическим характеристикам, и по спектрам. При сравнительно высо-
Предыдущая << 1 .. 78 79 80 81 82 83 < 84 > 85 86 87 88 89 90 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама