Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 93

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 87 88 89 90 91 92 < 93 > 94 95 96 97 98 99 .. 126 >> Следующая

233
совпадает с мениском, чем обеспечивается автоматическое центрирование цилиндра при вращении. Скорость вращения внутреннего цилиндра при данной скорости ведущего магнита обратно пропорциональна вязкости жидкости, помещенной в зазор между цилиндрами. Ротационные вискозиметры мало распространены, вероятно, из-за трудностей их изготовления. Однако, приборы такого типа совершенно незаменимы для получения очень малых постоянных градиентов скорости. Так, вискозиметр Зимма позволяет работать вплоть до ? = 0,01 сек~х.
Как ротационные, так и капиллярные приборы позволяют измерять только относительную вязкость по величине отношения времени истечения, угла поворота или скорости вращения для исследуемого раствора к таковым для растворителя. Для абсолютных измерений вязкости каждый вискозиметр обычно градуируется при помощи набора жидкостей с известными абсолютными значениями вязкости, охватывающими необходимый диапазон. Таким набором могут служить, например, чистая вода при различных температурах или водные растворы глицерина [21].
Поскольку вязкость большинства жидкостей сильно зависит от температуры, для достижения необходимой точности измерений следует тщательно термостатировать как вискозиметр, так и приготовленные для измерений жидкости (растворы).
Рис. 7. Вискозиметр Зимма
1 — термоста тируемая рубашка;
2 —мениск; 3—подвижный цилиндр; 4— неподвижный цилиндр; 5 — железный диск в наполнителе; 6 — магиит; 7 — к оси двигателя
магнитной мешалки
д. Вязкость растворов биополимеров
Так как мономерные звенья, составляющие молекулярную цепь белка (аминокислоты), неодинаковы, различные белки нельзя рассматривать как члены одного гомологического ряда. Следовательно, уравнение вязкости типа (12) для белков, строго говоря, неприменимо. Глобулярные белки, молекулы которых представляют собой компактно уложенную полипептидную цепь, частично спирализованную, с фиксированной конформа-
234
о
1
'2
5,0
L9M
Рис. 8. Зависимость характеристической вязкости от молекулярного веса глобулярных белков — нативных (/) и с разрушенной третичной структурой (2)
цией, несмотря на многообразие конформаций и размеров молекул обладают примерно одинаковой характеристической вязкостью («0,04 дл/г), т. е. молекулы различных глобулярных белков ведут себя как жесткие сплошные частицы с разными размерами и молекулярным весом, но с примерно одинаковой асимметрией. Если разрушить третичную структуру глобулярного белка, иными словами, разорвать связи, организующие полипептидную цепь в глобулу, то молекула приобретает форму, близкую к палочкообразной, и жесткость, свойственные а-спирали Полинга — Кори. Пренебрегая в данном случае различиями между мономерными звеньями, мы получаем гомологичное семейство лалочкообразных молекул, для которого должно существовать уравнение вязкости типа (12) с показателем а, близким к 1,8. Действительно, характеристическая вязкость четырех глобулярных белков [22] — рибонуклеазы (M = 14 ООО), трипсина (M = = 24 000), яичного альбумина (M = 44 000) и сывороточного альбумина человека (M = 69 000)—подчиняется уравнению вязкости с показателем а= 1,5—1,8 (рис. 8, кривая 2; нативному состоянию отвечает прямая I). Белок с совершенной палочкообразной структурой — коллаген, построенный из тройной полипептидной спирали. Показатель а для фрагментов коллагена равен 1,8 (см. рис. 4).
При полной денатурации белков в результате разрушения и третичной, и вторичной (спиральной) структуры их молекулы могут приобрести клубкообразную форму. Зависимость характеристической вязкости от молекулярного веса в этом случае приближенно описывается уравнением (12) с показателем, равным 0,7, что соответствует гибким полимерным цепям, свернутым в плохо протекаемый гауссов клубок. Некоторые заключения о структуре белковой молекулы можно сделать, наблюдая характер изменения вязкости белкового раствора при денату-рационных воздействиях. Утрата вторичной и третичной структуры белка неизменно приводит к значительному увеличению вязкости раствора одновременно с падением оптической активности.
Таким образом, вискозиметрическое исследование белковых растворов приводит в основном только к качественным резуль-
235
Л уд/(ПуS)1
татам. Для определения молекулярного веса белка необходимо пользоваться каким-либо иным методом (например, светорассеяние, седиментационный анализ).
Исследование молекул нуклеиновых кислот в растворе требует к себе особого внимания. Прежде всего это связано с большим молекулярным весом нуклеиновых кислот, особенно ДНК
(107—108). В растворах с такими большими молекулами весьма велико межмолекулярное взаимодействие. Кроме того, молекулы нуклеиновых кислот легко подвержены деформациям даже при относительно небольших градиентах скорости потока.
В этом случае для определения характеристической вязкости приходится работать с растворами весьма малых концентраций и с предельно малыми градиентами скоростей. Замечательный • пример определения удельной вязкости раствора ДНК — измерения, выполненные Эйзенбергом [23], результат которых приведен на рис. 9. Из рисунка видно, что пренебрежение очень малыми градиентами при экстраполяции к
Предыдущая << 1 .. 87 88 89 90 91 92 < 93 > 94 95 96 97 98 99 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама