Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Лазуркин Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 95

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркин Ю.С.

Лазуркин Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — М.: Наука, 1967. — 342 c.
Скачать (прямая ссылка): afizsvoystvapentanola1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 126 >> Следующая

В случае, когда скорость диффузии за счет теплового движения частиц значительно меньше скорости осаждения под действием центробежного поля, можно непосредственно измерять скорость седиментации частиц. При этом в растворе, первоначально гомогенном, вследствие осаждения частиц образуются две области: область чистого растворителя и область раствора, содержащего исследуемые частицы (для биополимеров растворителями обычно служат солевые и буферные водные растворы). Между этими областями имеется переходная зона (граница), в которой концентрация полимера плавно изменяется от нуля до некоторого максимального значения. Наблюдение скорости '.перемещения этой границы лежит в основе метода скорости седиментации. В реально наблюдаемой переходной зоне концентрация никогда не изменяется резко и зона имеет конечную ширину. Она размывается, во-первых, вследствие диффузии осаждаемых частиц, во-вторых, за счет поледисперсности препаратов по молекулярному весу в результате осаждения разных частиц с разными скоростями. В этом случае по величине размытия границы возможна оценка степени лоліидисперсности исследуемого образца. Важной разновидностью метода скорости седиментации является метод осаждения в градиенте плотности.
При относительно небольших центробежных ускорениях поток седиментирующего вещества оказывается сравнимым по величине с потоком вещества в противоположную сторону, вызванным диффузией, так что граница между раствором и растворителем не образуется, а происходит лишь некоторое перераспределение концентрации в кювете. Очевидно, концентрация исследуемого вещества в верхней, обращенной к оси вращения части кюветы меньше, чем концентрация в 'исходном растворе. Ближе ко дну кюветы концентрация, наоборот, возрастает, превышая исходную. При достаточно длительном времени центрифугирования устанавливается равновесие потоков вещества в каждой точке и образуется равновесное распределение вещества по длине кюветы. По форме установившегося распределения можно судить о свойствах исследуемых частиц, в частности об их молекулярном весе [26, 27].
Те же самые сведения, но с несколько меньшей точностью, можно получить, анализируя распределение концентрации в кювете в начальной стадии установления равновесия. Этот метод, называемый методом приближения к равновесию (метод Арчи-
239
бальда (28]), широко применяется в практике. К методу седимен-тационного равновесия можно также отнести 'метод равновесного ультрацентрифугирования в градиенте плотности. При длительном ультрацентрифугировании концентрированных раство-ро,в низкомолекулярных солей (таких, как CsCl, CS2SO4, ацетат цезия, RbBr, KBr и др.) возникает градиент плотности за счет перераспределения концентрации солевого раствора. Макромолекулы, находящиеся в таком растворе, через некоторое время располагаются в узкой зоне, где локальная плотность растворителя соответствует плотности этих макромолекул. Этот метод позволяет проводить фракционирование макромолекул по их плотности, оценить гетерогенность изучаемого образца по плотности, а также его молекулярный вес [29].
Уже это краткое перечисление хорошо демонстрирует гибкость метода ультрацантрифугиро,вания и его широкие возможности ,в исследовании макромолекул.
а. Краткие сведения об аналитических ультрацентрифугах
Центробежные ускорения, создаваемые в современных ультрацентрифугах, достигают 300 000 g*, где g — величина ускорения силы тяжести. Роторы, способные выдержать такие ускорения, делаются из особо прочных сплавов алюминия или титана и имеют специальную форму.
Вращение ротора может осуществляться либо масляной тур-бинкой [26], либо воздушной (современные ультрацентрифуги; Five, ФРГ; Г-120, Венгрия), либо электромотором (например, модели «Spinco», США; UCA, Япония; УЦА-4, СССР). Последнему типу привода в настоящее время отдают предпочтение ввиду его явных преимуществ — імалогабаритности, отсутствия громоздких вспомогательных узлов, поэтому приводимые ниже характеристики 'будут относиться к ультрацентрифугам подобного типа, т. е. «Spinco», UCA и УЦА-4. Передача вращения ротору в ультрацентрифугах с электрическим приводом осуществляется через гибкий вал-отруну, на которой подвешивается ротор. Такая подвеска ротора обеспечивает самобалансирование его при вращении и допускает менее тщательное уравновешивание при заполнении кювет или пробирок. Ротор вращается в камере с глубоким вакуумом (10~3—10~4 мм рт. ст.), что необходимо для предотвращения разогрева ротора из-за трения в воздушной среде, так как при проведении аналитических опытов предъявляются очень жесткие требования к стабильности температуры. Вакуумная камера окружена броневой защитой на случай разрыва ротора. Стабильность вращения ротора при низких скоростях (2000—2500 об/мин) в ультрацентрифугах типа Spinco Е, UCA составляет 0,5-^0,3% от заданной скорости, а при максимальной скорости достигает 0,1%.
240
Г' процеси- pamu ы геМпература ротора измеряется и поддерживается постоянной. Пе измерение производится либо при помоли] термопары, расположенной в вакуумной камере вблизи ротора, либо при помощи термомагнитных колец, расположенных на роторе (ультрацентрифуга UCA, Япония), или запрессованным в тело ротора термистором — по изменению его сопротивления (наиболее современный метод). Термистор является составной частью электронной схемы, автоматически поддерживающей заданную температуру посредством постоянно действующего холодильника, укрепленного на внутренней стенке вакуумной камеры, и расположенного под ротором электрического нагревателя, включаемого автоматически in о мере надобности. Контакт термистора с устройством, обеспечивающим автоматическое включение нагревателя, осуществляется через иглу, укрепленную по оси внизу ротора и погруженную в неподвижную чашечку с ртутью. Рабочий диапазон температур в ультрацентрифугах обычно составляет О—35°, а при наличии специальной приставки — до 120°. Температура поддерживается с точностью ~0,1° и измеряется с точностью -^0,02°.
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 126 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама