Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Биохимия -> Саратиков А.С. -> "Регуляторы ферментативных систем детоксикации среди азотсодержащих соединений " -> 53

Регуляторы ферментативных систем детоксикации среди азотсодержащих соединений - Саратиков А.С.

Саратиков А.С., Ахмеджанов Р.Р., Бакибаев А.А. Регуляторы ферментативных систем детоксикации среди азотсодержащих соединений — Томск, 2002. — 264 c.
Скачать (прямая ссылка): regulyatorifermentnihsistem2002.djvu
Предыдущая << 1 .. 47 48 49 50 51 52 < 53 > 54 55 56 57 58 59 .. 75 >> Следующая

Для соединений 1 3 (рис. 59), полученных в результате конструирования, в табл. 37 приведены значения прогноза биологической активности pKs и pKs\ Величины pKs' глико-лурила 1 найдены по количественному соотношению (КССА) для субстратов I типа, а соединений 2, 3 - по КССА для субстратов II типа. Эти характеристики далее сопоставлялись с экспериментально определёнными константами диссоциации ферментсубстратных комплексов.
Отклонение экспериментально определённых pKs от значений pKs' составляет в среднем 0,41. Это позволяет считать вполне удовлетворительным качество прогноза активности при выполненном de novo дизайне субстратов цитохрома Р-450.
Следует отметить, что дифференциальные спектры поглощения, характерные для комплексов соединений 2 и 3, не
Рис. 60. Дифференциальные спектры поглощения арилал-килмочевин 2, 3 (а) и гликолурила 1 (б), концентрация цитохрома Р-450 5,0 нмоль/мл. Толщина кюветы 1,00 см.
1/ДА
Рис. 61. Зависимости амплитуды спектральных изменений ЛА от концентрации С субстрата 1 в координатах Пайнуивера-Берка. Концент-
рация цитохрома Р-450 4,5 нмоль/мл. Толщина кюветы
1,00 см.
15
20
25 30
l/сю'5, м'1
1/ДА
Рис. 62. Зависимости амплитуды спектральных изменений ЛА от концентрации С субстрата 2 в координатах Пайнуивера-Берка. Концентрация цитохрома Р-450 4,5 нмоль/мл. Толщина кюветы 1,00 см.
i/c-io^M’1
наблюдаются после предварительного добавления метирапо-на или клотримазола в обе кюветы спектрофотометра в насыщающих концентрациях (1 мМ и 3 мкМ соответственно),
Рис. 63. Зависимости амплитуды спектральных изменений ЛА от концентрации С субстрата 3 в координатах Пайнуи-вера-Берка. Концентрация цитохрома Р-450 4,5
нмоль/мл. Толщина кюветы 1,00 см
Таблица 36
Характеристики ферментсубстратных комплексов соединений 1-3 (рис. 59) с цитохромом Р-450
Соединение Тип спектраль Ks*\ моль/л N
ных изменений
( mlm maxi НМ)*
1 I (425,385) 5,23(18) -10"7 5
2 II (395,427) 4,92(12)-10_6 7
3 II (393, 428) 1,53(7)-10"6 6
Примечание: * Погрешность в определении положений минимумов и максимумов составляла 1-2 нм. ** В скобках Указаны стандартные отклонения в единицах последнего Разряда.
1/АА
1/С-ю"4,М 1
Таблица 3 7
Экспериментальные и вычисленные значения pKs соединений 1 3 (рис. 59)
Соединение pKs рЦ pK's-pKs
1 6,29 6,94 0,65
2 5,59 5,12 -0,47
3 5,31 5,19 -0,12
что говорит о наличии конкуренции за связывание с активным центром гемопротеида между исследуемыми лигандами 2, 3 и метирапоном или клотримазолом. Метирапон [254,255] и клот-римазол [114] известны как лиганды гемовой части цитохрома Р-450, избирательно связывающиеся с изоформой 2В1 в фено-барбиталиндуцированных микросомах печени крыс. Отмеченное обстоятельство, а также весьма низкие значения Ks фер-мент-субстратных комплексов соединений 2 и 3 дают основание сделать вывод об избирательном характере их взаимодействия с основной фенобарбиталиндуцированной изоформой цитохрома Р-450 и позволяют рассматривать соединения 2 и 3 как потенциальные ингибиторы каталитической активности 2В1.
Предварительное добавление субстрата I типа - гликолу-рила 1 в насыщающей концентрации в кюветы спектрометра приводит к исчезновению спектральных изменений I типа, характерных для гексобарбитала. Последний известен как лиганд апопротеиновой части гемопротеида, метаболизм которого также катализируется изоформой 2В1 [2].
Таким образом, на основе ранее полученных количественных моделей «структура-константа диссоциации» для
исследованных азотсодержащих соединений с использованием их молекулярных фрагментов с помощью эффективного алгоритма сконструированы и получены соединения 1—3 — субстраты микросомального цитохрома Р-450 печени с заранее рассчитанным уровнем сродства к гемопротеиду. Проведенное спектральное исследование ферментсубстратных комплексов 1—3 с цитохромом Р-450 в указанных условиях эксперимента, сравнение расчётных и экспериментальных значений констант диссоциации сконструированных de novo веществ 1—3 свидетельствуют о перспективности метода «фронтальных многоугольников» как эффективного способа создания новых субстратов цитохрома Р-450 и внеэкспериментальной оценки их свойств.
4.3. Влияние некоторых азотсодержащих соединений — лигандов цитохрома Р-450 на монооксигеназную систему печени крыс
Нами исследовано влияние на монооксигеназную систему печени в условиях in vitro и in vivo сконструированных de novo соединений 1—3 (раздел 4.2), а также исследованных ранее лигандов 4—6 (рис. 64), имеющих высокий уровень сродства к микросомальному гемопротеиду (раздел 2.3).
В условиях in vitro предварительное добавление соединений 1-6 (табл. 38) в насыщающих концентрациях приводило к значительному снижению каталитической активности микросомального фенобарбиталиндуцированного цитохрома Р-450 в отношении 7-пентоксирезоруфина, бензфетамина, аминопири-на. При этом субстраты I типа — гликолурил 1 и арилалкилмо-чевина 4, как лиганды апопротеиновой части фермента, ингибировали метаболизм субстратов I типа — 7-пентоксирезо-РУфина и аминопирина, не влияя на метаболизм субстрата II типа — бензфетамина. В тоже время субстраты II типа — ари-лалкилмочевины 2,3, дибензгидрилмочевина 5 и дианилид 6, являющиеся лигандами гемовой части, ингибировали метаболизм субстратов как II типа (бензфетамин), так и I типа (пен-токсирезоруфин, аминопирин). Как известно, 7-пентоксире-
Предыдущая << 1 .. 47 48 49 50 51 52 < 53 > 54 55 56 57 58 59 .. 75 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама