Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Фармацевтика -> Арзамасцева А.П. -> "Международная фармакопея Том 1" -> 20

Международная фармакопея Том 1 - Арзамасцева А.П.

Арзамасцева А.П. Международная фармакопея Том 1. Под редакцией Колчинской Н.Л. — Жнв.: Всемирная организация здравоохранения, 1981. — 242 c.
Скачать (прямая ссылка): mejdunarodfarmt11981.djvu
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 87 >> Следующая

Прибор
Измерение интенсивности флуоресценции можно провести с помощью простого флуорометра с фильтрами (иногда прибор называют флуориметром). Такой прибор состоит из источника излучения, первичного фильтра, камеры для вещества, вторичного фильтра и системы обнаружения флуоресценции. В большинстве таких флуорометров детектор располагается под углом 909 к падающему лучу, что позволяет падающему излучению проходить через испытуемый раствор без загрязнения выходного сигнала, получаемого детектором флуоресценции. Однако на детектор неизбежно попадает некоторое количество падающего излучения в результате внутреннего рассеивания — свойства, присущего самим растворам; таким же образом влияет присутствие пыли или других твердых веществ. Для удаления этого остаточного рассеивания используют фильтры. Первичный фильтр отбирает коротковолновое излучение, способное вызывать возбуждение испытуемого вещества, в то время как вторичный фильтр, обычно строго отсекающего типа, пропускает флуоресценцию при большей длине волны, но блокирует рассеянное возбуждающее излучение.
В большинстве флуорометров в качестве детекторов используются фотоумножители; существует много типов фотоумножителей со специальными характеристиками в отношении спектральной области максимальной чувствительности, электрического шума и усиления. После усиления фотоэлектронного тока его значение либо отсчитывается визуально на измерительном приспособлении, либо регистрируется.
Флуоресцентный спектрофотометр отличается от флуорометра с фильтрами тем, что фильтры в нем заменены монохроматорами прнзменного или решетчатого типа. Для аналитических целей флуоресцентный спектрофотометр имеет преимущества перед фильтрующим флуорометром в отношении избирательности длины волны, возможности быстрого приспособления к условиям опыта и удобства пользования, игп ° (РлуоРометРах и флуоресцентных спектрофотометрах используются различные источники излучения. Ртутные лампо ОТНОсительно стабильньІ и излучают энергию в основном чиваюИСКреТНЫХ длинах волн- Вольфрамовые лампы обеепе-ют достаточно равномерное излучение по всей видимой
54
МЕЖДУНАРОДНАЯ ФАРМАКОПЕЯ
области спектра. В флуоресцентных спектрофотометрах часто используется ксеноновая дуговая лампа высокого давления, поскольку она достаточно равномерно излучает энергию от ультрафиолетовой до инфракрасной области спектра.
Во флуоресцентных спектрофотометрах монохроматоры имеют щель. Узкая щель обеспечивает высокое разрешение и спектральную чистоту, большая щель — высокую интенсивность. Выбор ширины щели определяется разницей в длине волны возбуждающего и испускаемого излучения, а также требуемой степенью чувствительности.
Кюветы, используемые при измерении флуоресценции, могут быть прямоугольными, аналогичными кюветам, применяемым в абсорбционных спектрофотометрах; их отличие состоит в том, что все 4 вертикальные стенки и основание должны быть отполированы; можно применять также кюветы в виде пробирок с плоским отполированным основанием. Удобный размер кювет 2—3 мл, но некоторые приборы могут быть снабжены небольшими кюветами емкостью 0,1—0,3 мл или капиллярной кюветой, требующей еще меньше раствора.
Стандартизация
Флуорометры и флуоресцентные спектрофотометры надо ежедневно стандартизовать по стабильному флуорофору для обеспечения правильной воспроизводимости ответа. Изменения обусловлены факторами, связанными с самим прибором, такими, как различия в интенсивности лампы и чувствительности фотоумножителя. Флуорофором может служить чистый образец флуоресцирующего вещества, подвергаемого анализу, или другое легко очищаемое флуоресцирующее вещество с полосами поглощения флуоресценции такими же, что и у испытуемого вещества. Подходящим флуорофором для голубой флуоресценции является хинин в разведенной серной кислоте, для зеленой флуоресценции — флуоресцеин натрий и для красной — родамин.
Калибровка шкалы длин волн
Шкалу длин волн флуоресцентного спектрофотометра следует периодически калибровать.
Приготовление раствора
Необходимо правильно выбирать используемый для измерения растворитель. На интенсивность и спектральное распределение флуоресценции могут существенно влиять сам растворитель, его чистота и величина рН.
ФИЗИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
55
Концентрация испытуемых растворов для флуоресцентной спектрофотометрии обычно в 10—100 раз слабее концентрации растворов, применяемых в абсорбционной спектрофото-метрии. Для аналитического применения необходимо, чтобы интенсивность флуоресценции была линейно связана с концентрацией вещества в области, используемой для измерений; однако если раствор слишком концентрированный, то значительная часть падающего света поглощается веществом у поверхности кюветы, что приводит к снижению интенсивности потока света, достигающего центра кюветы. В результате получается, что само вещество действует как «внутренний фильтр». Но поскольку флуоресцентная спектрофотомет-рия — высокочувствительный метод, часто можно использовать растворы в концентрации порядка 10~5—10~7 моль/л.
Область, в которой флуоресценция пропорциональна концентрации флуоресцирующего вещества, обычно очень узка; поэтому соотношение (с—(1)1 (а—Ь), где а — интенсивность флуоресценции для стандартного вещества, Ь — то же для соответствующего контрольного вещества, с — интенсивность флуоресценции для испытуемого вещества и й — то же для соответствующего контрольного раствора, должно быть не менее 0,40 и не более 2,50. Поэтому необходимо построить рабочую кривую зависимости интенсивности флуоресценции с поправкой на контрольный раствор от концентрации.
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 87 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама