Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Фармацевтика -> Грачева И.М. -> "Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов " -> 20

Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов - Грачева И.М.

Грачева И.М., Грачев Ю.П., Мосичев М.С., Борисенко Е.Г. Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов — М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982. — 240 c.
Скачать (прямая ссылка): labpraktikumpotehfermentpreparatov1982.djvu
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 69 >> Следующая

Для приготовления 1%-ного раствора пектовой кислоты берут такую навеску порошка, чтобы в 100 см3 раствора содержался 1 г кислоты. Навеску высыпают при тщательном перемешивании в стакан с дистиллированной водой и из бюретки по каплям при перемешивании добавляют 1 н. раствор NaOH, доводя pH раствора пектовой кислоты до 4,0. Необходимое для этого количество щелочи устанавливают заранее опытным путем для каждой партии пектовой кислоты. Полученный раствор пектовой кислоты количественно переносят в мерную колбу на 100 см3, доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают и фильтруют через два слоя марли на воронке Бюхнера. Раствор попользуют в день приготовления.
Приготовление 1%-ного раствора крахмала в насыщенном растворе хлорида натрия (индикатор). Раствор готовят в день проведения испытания.
1 г крахмала с учетом влажности помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, добавляют 25 см3 насыщенного раствора NaCl и перемешивают до полно-го Растворения. Затем добавляют в колбу еще 25 см3 раствора NaCl, помещают колбу с содержимым в кипя-
53
щую водяную баню, непрерывно перемешивая до полщ го растворения крахмала. Затем раствор охлаждаю; добавляют 10 см3 буферного раствора (ацетатного pH 4,7 при анализе грибных препаратов, фосфатного pH 6,0 при анализе бактериальных препаратов), объе жидкости доводят до метки раствором хлорида натри и содержимое колбы перемешивают.
Для проверки.оптической плотности полученного ра; твора 10 см3 субстрата (1%-ного раствора пектовой квд лоты) наливают в пробирку, добавляют 5 см3 дистилли рованной воды и тщательно перемешивают. Зате 0,5 см3 раствора переносят в коническую колбу, в кото рую предварительно налито 50 см3 раствора йода. Полу ченный окрашенный раствор колориметрируют на фото электроколориметре при длине волны А, = 656нм проти. дистиллированной воды в кювете с толщиной поглощаю щего свет слоя 1 см. Оптическая плотность должна бып не менее 0,690.
Техника определения. 10 см3 1%-ного раствора пек товой кислоты вносят в колбы вместимостью 100 см3 : помещают их в термостат с температурой 30±0,2°С Через 10 мин в колбы добавляют необходимое количе ство дистиллированной -воды и от 1 до 5 см3 ферментно го раствора (в зависимости от активности ферментноп препарата). Общий объем реакционной смеси должен быть 15 см3. Растворы тщательно перемешивают.
Через определенное время (10, 20, 30 или 60 мин ? зависимости от ферментативной активности) в эти Ш колбы добавляют по 1,8 см3 1М раствора карбоната натрия и по 10 см3 0,1 н. раствора йода. Все тщательно пе ремешивают, закрывают стеклянными пробками и остав ляют стоять точно 20 мин в защищенном от света месте Затем вносят в колбы по 2 см3 2М раствора H2SO4 1 оттитровывают избыток йода 0,05 н. раствором тиосулЬ' фата натрия в присутствии крахмала.
Одновременно ставят контрольный опыт с таким $ количеством всех реагентов, только ферментный раство> вводят после добавления карбоната натрия непосреде? венно перед прибавлением раствора йода.
При испытании ферментных препаратов, активное?1 которых неизвестна, следует несколько изменить техШ1' ку проведения опыта: брать не 10, а 50 см3 раствор* субстрата и от 1 до 25 см3 ферментного раствора (о°‘
54
щий объем реакционной смеси 75 см3). Из этой реакционной смеси каждые 5—10 мин отбирают по 15 см3 в колбы, куда предварительно налито по 1,8 см3 1М раствора карбоната натрия, далее поступают, как описано ранее.
Полигалактуроназную активность ПгС (в ед./г), измеренную по нарастанию количества альдегидных групп, вычисляют по формуле ПгС = 51,3 a/(tm), где 51,3 — число альдегидных групп, соответствующих 1 см3 0,1 н. раствора йода, мкэкв; а — количество 0,1 н. раствора йода, израсходованное на окисление образовавшихся при пектолизе альдегидных групп (находят по разности титрований раствором тиосульфата натрия опытной и контрольной проб), см3; t — время гидролиза пектина, мин; т — количество препарата в пробе, взятое на титрование, г.
Для расчета ПгС могут быть использованы данные нарастания количества альдегидных групп вплоть до 20%-ного гидролиза пектовой кислоты.
Определение пектинэстеразной активности (ПэС)
Метод основан на гидролизе раствора пектина исследуемым ферментным препаратом с последующим количественным (титрометрическим) определением освободившихся в результате гидролиза карбоксильных групп.
Пектинэстеразная активность характеризует способность фермента катализировать гидролиз сложноэфирных связей в молекуле Пектина с образованием метилового спирта и свободных карбоксильных групп.
За единицу активности пектинэстеразы принято такое количество фермента, которое катализирует гидролиз 1 мкэкв сложноэфирных связей в молекуле пектина за
1 мин при 30°С. Пектинэстеразную активность выража-Ют числом единиц фермента в 1 г (или 1 см3) исследуемого препарата.
Определяемая величина пектинэстеразной активности находится в непосредственной зависимости от степени и этерификации пектина; сравнимые результаты при ра-0те с различными субстратами можно получить лишь ПРИ пересчете полученных данных на субстрат со 100%-°й степенью метоксилирования. В принятых условиях
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 69 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама