Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Фармацевтика -> Грачева И.М. -> "Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов " -> 28

Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов - Грачева И.М.

Грачева И.М., Грачев Ю.П., Мосичев М.С., Борисенко Е.Г. Лабораторный практикум по технологии ферментных препаратов — М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982. — 240 c.
Скачать (прямая ссылка): labpraktikumpotehfermentpreparatov1982.djvu
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 69 >> Следующая

Мальтазную активность МС (в ед./г или ед./'см3) ферментных препаратов определяют по формуле МС = = е-5Р/(т1000), где е — величина активности, найденная по табл. 7 в соответствии с результатами титрова-
Таблица ^
Перевод количества 0,1 н. раствора тиосульфата натрия
в единицы МС
Количество Количество Количе ство
0,1 н. 0.1 и. 0,1 н.
раствора Единицы раствора Единицы раствора Единицы
тиосуль МС <<-\ тиосуль* МС (е) тиосуль МС (?)
фата Na, фата Na, фата Na,
см3 см3 см3
0,5 1,51 1,8 6,19 3,1 12,71
0,6 1,82 1,9 6,61 ¦ 3,2 13,34
0,7 2,15 2,0 7,05 3,3 13,98
0,8 2,47 2,1 7,49 3,4 14,66
0,9 2,81 2,2 7,94 3,5 15,35
1,0 3,16 2,3 8,41 3,6 16,10
1,1 3,51 2,4 8,89 3,7 16,87
1,2 3,86 2,5 9,39 3,8 17,67
1,3 4,23 2,6 4,90 3,9 18,51
1,4 4,61 2,7 10,43 4,0 19,40
1,5 4,99 2,8 10,97 4,1 20,34
1,6 5,38 2,9 11,53 4,2 21,38
1,7 5,78 3,0 12,11 4,3 22,38
ния (разность титрований контрольного и опытного растворов 0,1 н. раствором 'ЫагЗгОз); Р — разведение; т — количество ферментного раствора, взятое для испытания, см3; 1000 — перевод миллиграммов в граммы.
Определение активности
глюкозоизсмеразы (ГлИ)
Метод основан на изомеризации раствора .D-глюко-^ с определением образовавшегося количества D-ФРуктозы.
За единицу активности глюкозоизомеразь! принимается такое количество фермента, которое обеспечивает превращение 1 ммоля Л-глюкозы в D-фруктозу за 1 ч при температуре 70°С и pH реакционной смеси 7,5.
Необходимые реактивы. Смесь для проведения изомеризации— 2,5 см3 0,2 М фосфатного буфера с pH 7,0, 1 см3 1,0 М раствора D-глюкозы, 0,5 см3 0,1 М раствора MgS04-7H20; 1,5%-ный раствор хлорида цистеина;
0,12%-ный раствор карбазола в спирте; H2S04 (190см:| дистиллированной воды и 450 см3 концентрированной H2S04); 0,5 М раствор НС1.
Техника определения. В пробирку вносят последовательно смесь для изомеризации и ферментный раствор (его объем не должен превышать 6 см3). Общий объем должен быть равен 10 см3. Если ферментного раствора вносят меньше 6 см3, то недостающее количество заменяют дистиллированной водой.
После внесения ферментного раствора содержимое пробирки тщательно перемешивают и сразу же отбирают 2 см3, которые ,переносят в пробирку с 2 см3 0,5М раствора НО. Данная проба является контрольной.
Оставшееся количество смеси (8 см3) инкубируют в термостате при 70 °С в течение 60 мин (опытная проба).
Образцы контрольной и опытной проб разводят водой с таким расчетом, чтобы содержание сахаров в них в пересчете на фруктозу составляло от 10 до 60 мкг/см3, и определяют в обеих пробах содержание фруктозы ци-стеин-карбазольным методом. Для этого к 1 см3 исследуемого разведенного образца приливают 0,2 см3 раствора хлорида цистеина, 6 см3 H2S04 и 0,2 см3 раствора карбазола.
Содержимое пробирки тщательно перемешивают и помещают в водяную баню с температурой 40 °С на 30 мин. Ровно через 30 мин пробирку помещают в ледяную баню (/ = 0°С).
Измерение оптической плотности исследуемого образца проводят при 1=560 нм против контрольного образца в кюветах с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм. Зная показания оптической плотности, по калибровочной кривой находят содержание фруктозы в растворе.
Определение активности липазы ,(ЛС) (модифицированный метод Ота, Ямада)
За единицу ферментативной активности липазы принимают такое количество фермента, которое освобождает 1 мкмоль олеиновой кислоты из 40%-ной эмульсии оливкового масла при pH 7,0 и температуре 37°С в течение 1 ч.
Метод основан на определении путем титрования щелочью жирных кислот, образовавшихся под действием липазы при использовании в качестве субстрата оливкового масла.
Необходимые реактивы. Раствор оливкового масла (субстрат); 2%-ный раствор поливинилового спирта;
1 н. раствор НС1; 0,05 н. раствор NaOH; фосфатно-цит-ратный буфер с pH 7,0; 1%-ныи раствор фенолфталеина; 90%-ный раствор спирта; 1%-ный раствор фермента.
Приготовление субстрата. 100 см3 оливкового масла смешивают со 150 см3 2%-ного раствора поливинилового спирта в эмульгаторе. Полученную эмульсию выдерживают на льду в течение 60 мин. Если расслаивания не наблюдается, субстрат пригоден к использованию. Если замечено расслаивание, перемешивание необходимо повторить.
Приготовление раствора поливинилового спирта. 20 г
спирта помещают в мерную колбу на 1 дм3 и добавляют 800 см3 дистиллированной воды. Суспензию выдерживают в течение 30 мин при комнатной температуре, затем добавляют 0,5 см3 1 н. раствора НС1 и непрерывно перемешивают при температуре 80—90°С в течение 1 ч. Затем раствор охлаждают, доводят до pH до 7,0 раствором NaOH, объем доводят до 1 дм3 дистиллированной водой и полученный раствор фильтруют.
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 69 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама