|
Фракционирование полимеров - Квантова М.Скачать (прямая ссылка):  снижается на 2% при изменении концентрации фосфатного буфера от 0 до 0,4 М [190] (ср. разд. V, А, 3, а). Гели не растворяются в воде, растворах солей и наиболее распространенных органических растворителях и могут применяться в области pH 2-11. Среди природных гелей, применяемых при фракционировании методом ГПХ, следует отметить крахмал [167, 186], желатину [190а] и агар [138, 170, 171]. Общим для указанных трех гелей является низкая степень сшивания, пластичность и высокое сопротивление потоку растворителя в колонке. Кроме того, эти гели содержат группы, обусловливающие возможность ионного обмена и адсорбции, поэтому для большинства целей природные гели использовали гораздо реже, чем синтетические, параметры которых легче регулировать. С другой стороны, агаровый гель содержит, вероятно, поры необычно больших размеров. Полсон [138], используя в качестве геля гранулированный агар, смог осуществить фракционирование белков молекулярного веса вплоть до 6,6-10(r). Стир и Аккерс [170, 171] на агаровых гелях разделили даже вирусы и компоненты клеток. Полсон [138] получил простое соотношение между концентрацией агара в геле (с) и диаметром молекулы растворенного вещества (d), проникающей в гель: c = k/d при постоянной к, равной 70. Это уравнение гиперболы, и, следовательно, наибольшего изменения величины d (или диаметра пор) при изменении концентрации агара на единицу следует ожидать при малых концентрациях агара и соответственно для гелей с большими размерами пор. Пористое стекло Халлера [2196, 219в] и некоторые его применения рассматриваются в следующем разделе. Здесь же отметим только разделение на этом стекле вируса табачной мозаики от вируса кольцевой пятнистости табака и вируса мозаичной болезни южно-африканского боба от бычьего сывороточного альбумина. ГЕЛЬ-ПРОНИКАЮЩАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ 137 В. Гели, применяемые при фракционировании неводных систем В настоящее время наиболее важны для фракционирования неводных растворов гели полистиролов с высокой плотностью поперечных связей [157, 158, 163]. Единственными другими описанными к настоящему времени жесткими гелями являются гели типа сантосел А [155], представляющие собой набухшие силикагели фирмы "Monsanto Chemicals", и "гели" из пористого стекла [2196, 219в]. Применение сантосела А дало прекрасные результаты при фракционировании полистирола [155] и, возможно, других неполярных полимеров, но более полярные соединения адсорбируются на этом геле [191]. К тому же этот гель поступает в продажу в виде неоднородных по размерам гранул и оказывает заметное сопротивление потоку растворителя в колонке даже после предварительного просеивания. Щелочные боросиликатные стекла можно выщелочить кислотой и щелочью и получить системы с очень однородными по размеру порами в диапазоне 170- 2500 А [2196, 219в]. Благодаря узким распределениям по размерам пор пористые частицы стекол обладают уникальными свойствами, позволяющими проводить исследование самого механизма гель-проникающей хроматографии [230], а также проводить фракционирование конкретных систем. Обычно можно применять смеси стекол различной степени пористости. На пористых стеклах были проведены разделения искусственных смесей вирусов растений и бычьего сывороточного альбумина [230 а], а также фракционирование образцов полистирола и полиизобутилена молекулярного веса 10 000-3 400 000 [2306]. Достоинства стеклянных частиц заключаются в их высокой жесткости и в отсутствии набухания, а также в отсутствии взаимодействия с агрессивными растворителями. Поэтому можно осуществлять высоко воспроизводимое заполнение колонки и удалять загрязнения из колонок горячей азотной кислотой. Указанные преимущества наряду с высокой однородностью пор по размерам делают пористые стекла чрезвычайно удобным наполнителем колонок для проведения фракционирования методом ГПХ. Единственным недостатком таких носителей может оказаться адсорбция, более выраженная в водных системах по сравнению с органическими растворителями. До сих пор это обстоятельство сколько-нибудь подробно в литературе не рассматривалось. Данных по характеристикам стеклянных "гелей" вообще немного, но подобное положение наверняка изменится в ближайшем будущем. В 1966 г. фирма "Bio-Rad Laboratories" [219в] предполагала выпустить в продажу пористое стекло в виде измельченных частиц. Недавно фирма "Pharmacia" начала выпускать сефадекс LH-20, представляющий собой частично алкилированный гель типа сефадекса G-25, который набухает в полярных органических растворителях, в том числе в хлороформе, но не набухает в углеводородных растворителях типа бензола и других. На этих гелях провели разделение липидов [2306], полиэтиленгликолей, различных эфиров глицерина и низкомолекулярных полистиролов [230в]. Гели с низкой степенью сшивания типа каучука [164, 165], полистирола [154, 155] и поливинилового спирта [155] позволяют фракционировать соединения со средними или малыми размерами молекул. На каучуковом геле,
Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены. |
|
|||||||||||||||||||||||||
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||
