|
Фракционирование полимеров - Квантова М.Скачать (прямая ссылка):  154 ГЛАВА 5 набором данных, из которых можно построить кривую относительного распределения по длинам молекул в исходном образце. Разрешающую способность колонки и зависимость ее от количества загружаемого образца нетрудно определить с помощью химически чистых низкомолекулярных веществ. Исходя из таких данных и начальной кривой элюирования образца, можно рассчитать состав каждой фракции. Аналогично можно получить кривую элюирования повторно разделенной фракции в той же системе. Методом итераций можно уточнить предположения о распределении исходного образца и учесть диффузионное уширение, обусловленное увеличением молекулярного веса. При этом соответствие между рассчитанными и получаемыми в эксперименте кривыми повторного элюирования свидетельствует о том, что распределение по размеру молекул в исходном образце и калибровка колонки установлены правильно. Недавно был опубликован ряд интересных расчетов в применении к методу ГПХ. Бергер и Шультц [260] рассчитали теоретические кривые элюирования для линейных полимеров, исходя из предположения о линейности соотношения люгарифма молекулярного веса и величины элюирующего объема. Эти расчеты были проведены для трех различных функций распределения по молекулярным весам в образце. Авторы показали, что молекулярные веса максимумов кривой элюирования методом ГПХ удовлетворяли следующему неравенству Мп < Мгпх Mw. ¦ Родригец и Кларк [261 ] описали простой метод для быстрого определения Мп, Мw и Мг по кривым элюирования методом ГПХ. Эти авторы аппроксимировали истинное распределение треугольной функцией, угловые точки графика которой определялись величинами ML, М0 и Мн, т. е. молекулярными весами соответственно с наименьшим значением, в максимуме кривой элюирования и с наибольшим значением. Пикет, Кантов и Джонсон [262] составили программу для вычислительной машины. С помощью зтой программы можно обрабатывать данные как аналитического, так и препаративного фракционирования методом ГПХ. Интегральные и дифференциальные кривые распределения сведены в таблицы и представлены в виде кривых и гистограмм, а также рассчитаны среднечисловые, средневязкостные, средневесовые и л-средние молекулярные веса. Тунг [263] получил два аналитических выражения распределения по размерам молекул в общем случае. Метод расчета Тунга позволяет проводить учет уширения зоны в колонке и находить истинное распределение. Тунг, Мур и Найт [264] проверили указанный метод расчета путем повторного разделения фракций полимерного образца, вычисления истинного распределения в каждой фракции и определения кривой распределения в исходном образце суммированием кривых для каждой фракции. Полученные данные весьма удовлетворительно соответствовали кривым распределения, рассчитанным методом Тунга из данных гель-проникающей хроматографии исходного образца. Введение поправок оказалось существенным лишь для узких распределений как с одним, так и с несколькими максимумами. Для широких распределений поправки были незначительны [265]. Хендриксон и Мур более подробно рассмотрели природу фракционирования методом ГПХ [158] и влияние на получаемые результаты формы молекул и образования водородных связей между небольшими по размеру молекулами и средой [266]. В том случае, когда соответствующим образом учитывали объем боковых заместителей, степень разветвленности и полярность молекул, для большого числа различных соединений была получена одна калибровочная кривая. Влияние элементов структуры небольших по размеру молекул на величину элюирующего объема подчинялось приближенно правилу аддитивности. ГЕЛЬ-ПРОНИКАЮЩАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ 155 ЛИТЕРАТУРА 1. F 1 о d i n P., Dissertation, University of Uppsala, Sweden, 1962. 2. P о r a t h J., Flo din P., Protides Biol. Fluids, Proc. Collog., 10, 290 (1963). 3. T i s e 1 i u s A., P о r a t h Albertsson P. A., Science, 141, 13 (1963). 4. M о r r i s C. J. 0. R., Morris P., Separation Methods in Biochemistry, Wiley, Interscience, New York, 1963. 5. Determann H., Angew. Chem., 76, 635 (1964). 6. G e 1 о 11 e B., in: "New Biochemical Separations", A. T. James and L. J. Morris, eds., Van Nostran, Princeton, New Jersey, 1963, p. 93. 7. Sephadex in Gel Filtration, Pharmacia, Upssala, Sweden. 8. Sephadex, A Unique Substance for Modern Chromatography, Pharmacia, Uppsala, Sweden. 9. Sephadex Literature References, Pharmacia, Uppsala, Sweden. 10. Porath J., F 1 о d i n P., Nature, 183, 1657 (1959). И. О s 11 i n g G., Acta Soc. Med. Upsalien, 64, 222 (I960). 12. P о r a t h J., Clin. Chim. Acta, 4, 776 (1959). 13. В j o r k W., Porath J., Acta Chem. Scand., 13, 1256 (1959). 14. H i 1 1 R. F., Ronigsberg W., J. Biol. Chem., 235, PC21 (1960). 15. Hanson L. A., Johansson B. G., Nature, 187, 599 (1960). 16. T h о m a F. A., Koshland D. E., J. Biol. Chem., 235, 2511 (1960). 17. Miranda F.,Lissitzky S., Nature, 190, 443 (1961). 18. Rasmussen H., Craig L. G., J. Biol. Chem., 236, 759
Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены. |
|
|||||||||||||||||||||||||
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||
