Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Физическая химия -> Владимиров А.А. -> "Физико-химические основы фотобиологических процессов " -> 14

Физико-химические основы фотобиологических процессов - Владимиров А.А.

Владимиров А.А., Потапенко А.Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов — М.: Высшая школа, 1989. — 200 c.
Скачать (прямая ссылка): fizikobiologicheskogo1989.djv
Предыдущая << 1 .. 8 9 10 11 12 13 < 14 > 15 16 17 18 19 20 .. 79 >> Следующая


35 т,% 100 г

О L

1

л, им

Рис. 2.3. Использование скрещенных светофильтров для измерения

люминесценции:

К—кювета с образцом; I—светофильтр на пути возбуждающего света; 2—светофильтр для выделения люминесценции; (1 + 2)—суммарный спектр пропускания скрещенных светофильтров

эти два светофильтра не должны пропускать свет совсем (рис. 2.3). При перестановке скрещенных светофильтров фототок фотоэлемента или фотоумножителя, обусловленный люминесценцией, должен исчезать (закон Стокса!). Небольшие доработки заводско-

го прибора позволяют

Рис. 2.4. Схема спектрофлуори-метра:

I — лампа; 2—линзы; 3 и 5—моно-хроматоры; 4—кювета с образцом; 6 —ФЭУ; 7—блок питания ФЭУ; 8—усилитель; 9—самописец; I0 — возбуждающий свет; I11 — люминесценция образца

резко расширить его возможности. Установив одну поляроидную пленку на пути возбуждающего света перед кюветой и используя две сменные поляроидные пленки после кюветы, можно измерять на ЭФ-ЗМ также величины поляризации люминесценции (см. разд. 2.14). Безусловно, целесообразно вывести электрический сигнал со стрелочного прибора на самописец: это позволит изучать кинетику процесса, пользуясь проточными кюветами или используя магнитную мешалку.

Спектрофлуориметры предназначены для регистрации спектров люминесценции или спектров возбуждения люминесценции. Чаще всего они состоят из двух монохроматоров; один—для выделения монохроматического возбуждающего света, другой—для измерения спектра люминесценции (рис. 2.4). Коммерческие приборы, как правило, снабжены кварцевыми кюветами толщиной 1 см, угол между направлениями возбуждения и люминесценции равен

36 Рис. 2.5. Два способа измерения люминесценции: а, 6—под прямым углом к возбуждающему пучку света; в, г — с передней стенки кюветы, а, в — разбавленные и б, г — концентрированные образцы

90°. Такое расположение направления возбуждающего пучка и измеряемого света люминесценции позволяет собирать значительную часть света люминесценции и, что не менее важно, исключить люминесценцию самой кюветы (рис. 2.5, а), так как флуоресценция стенок не попадает на фотоприемник. Однако эта конструкция предполагает измерение не рассеивающих свет образцов с малой оптической плотностью. В образцах с высокой оптической плотностью осветится только тонкий слой раствора, примыкающий к передней стенке кюветы (рис. 2.5, б) и свет люминесценции не измеряется. Чтобы избежать это явление, в случае образцов с высокой оптической плотностью используют тонкие кюветы, а измерение флуоресценции проводят с той стороны кюветы, на которую падает возбуждающее излучение (рис. 2.5, в, г). При измерении растворов с малой оптической плотностью такая схема измерения спереди не дает преимущества по сравнению с измерением сбоку, поскольку флуоресценция кюветы регистрируется вместе с флуоресценцией

Рис. 2.6. Зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации вещества при регистрации с боковой (/) и с передней (2) стенки кюветы

37 раствора и, следовательно, возрастают требования к материалу кювет. Зато увеличение оптической плотности образца в этом случае не сопровождается снижением интенсивности измеряемой люминесценции (рис. 2.6).

При измерениях люминесценции вследствие низкой интенсивности измеряемого монохроматического света люминесценции возрастают требования к светосиле спектральных приборов, чувствительности приемника света, отсутствию рассеянного света в монохроматоре. Особое внимание следует обращать на возможную люминесценцию растворителя, примесей к реактивам, кюветы (С. Паркер, 1972; Владимиров Ю. А. и Литвин Ф. Ф., 1964; Лакович Дж„ 1986).

2.6. Влияние мнкроокруження на спектры н квантовые

выходы люминесценции. Флуоресцентные зонды

Условия среды, окружающей флуоресцирующие молекулы, влияют как на спектры поглощения, так и на спектры флуоресценции; наибольшее значение при этом имеет полярность окружающих молекул и их подвижность. В случае флуоресценции растворов веществ наибольшее влияние имеют диэлектрическая проницаемость и вязкость окружающей среды. В табл. 2.1 даны положения максимумов в спектрах поглощения (А,п) и флуоресценции (А,фл) люминесцирующего соединения диметиламинохал-

ной полярностью (диэлектрической проницаемостью є). Видно, ЧТО с увеличением полярности растворителя максимумы в спектре поглощения и, особенно, в спектре флуоресценции сдвигаются в область больших длин волн. Объяснение этому явлению дано на рис. 2.7.

Молекула ДМХ в основном состоянии имеет относительно небольшой дипольный момент ц0«17 • Ю-30 Кл • м и, соответственно, умеренно сольватирована, т. е. окружена ориентированными полярными молекулами растворителя, например воды (рис. 2.7, 7). Поглощение фотона и переход молекулы в возбуж-

о

кона (ДМХ)

в растворителях с различ-

Таблица 2.1. Максимумы поглощения и флуоресценции зонда ДМХ в разных растворителях

Растворитель Диэлектрическая Xn, нм X , нм

Диэлектрическая проницаемость є

Xn, нм

X. , нм

фл

Гептан

Толуол

Бутанол

Метанол

Вода

1,9
Предыдущая << 1 .. 8 9 10 11 12 13 < 14 > 15 16 17 18 19 20 .. 79 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама