Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Физическая химия -> Владимиров А.А. -> "Физико-химические основы фотобиологических процессов " -> 18

Физико-химические основы фотобиологических процессов - Владимиров А.А.

Владимиров А.А., Потапенко А.Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов — М.: Высшая школа, 1989. — 200 c.
Скачать (прямая ссылка): fizikobiologicheskogo1989.djv
Предыдущая << 1 .. 12 13 14 15 16 17 < 18 > 19 20 21 22 23 24 .. 79 >> Следующая


Z=Ijk.

Из уравнений (2.19) и (2.20) следует, что

(2.20)

(2.21)

47 бужденного состояния данной молекулы. Определенная доля таких фотонов регистрируется ФЭУ и усилительной системой в виде импульсов фототока. Пренебрегая задержками в системе ФЭУ—усилитель, можно считать, что т, равно времени между окончанием воз-

буждающей вспышки и импульсом. Поскольку молекул в образце много, то и импульсов флуоресценции будет много, каждый характеризуется СВОИМ Ti.

В однофотонном т-метре существует компьютерное устройство, позволяющее находить гистограмму распределения импульсов по Xi. Экспериментатор задает две величины: общее время счета импульсов T (время практически полного затухания свечения) и число интервалов п, равных длительности At=Tfn. Число импульсов Ax (г) в каждом г'-м интервале времени запоминается в ячейках памяти многоканального анализатора; і называют номером канала. Вывод полученных данных на график можно осуществлять в нескольких вариантах.

1. Непосредственно построить гистограмму распределения импульсов по каналам, т. е. функцию Ax (/)=/(/) (рис. 2.14).

2. Построить гистограмму распределения импульсов по t. Для этого находят для каждого канала время t = Ati и строят зависимость Ax (/) = Ax (г) = f{t) = /(т;).

3. Построить кривую затухания люминесценции. Интенсивность люминесценции в каждый момент времени равна скорости счета импульсов, т. е.

Заметим, что все полученные кривые по форме будут одинаковы, так как аргументы int пропорциональны друг другу, как и функции Ax и /л. Характер зависимости /л от времени может быть найден из уравнения (2.21):

4(')=4(0)e~"4. (2.23)

Из уравнений (2.22) и (2.23) следует, что

Ax(^)=Ax(O)e-''4. (2.24)

1000 с -/N-

100

\10 I

1

О 32 ?4 96 128 160 191 224 Номер канала

Рис. 2.14. Затухание флуоресценции 8-мето-ксипсоралена в этаноле, измеренное методом однофотонной фотометрии

48 Имея кривую распределения импульсов по Ti (или, что то же самое, кривую затухания люминесценции), можно найти величину среднего времени жизни молекул в возбужденном СОСТОЯНИИ T одним из трех способов: по начальному наклону кривой, по времени снижения скорости счета в е раз (т. е. до 0,37 от первоначального значения) или по углу наклона полулогарифмической анаморфозы.

Рассмотрим первый способ. Для этого проинтегрируем функцию из уравнения (2.23) в интервале времени от 0 до со и получим светосумму люминесценции (в данном случае это соответствует общему числу импульсов за большое время Т)

S=) I1Mdt=IM^

о

В приборе эта операция осуществляется путем суммирования импульсов по всем каналам:

S=IA*,.

Разделив S на начальную скорость счета импульсов, получаем т:

т = Sj I11 (0) = SAtIAx (0).

Второй метод станет понятным, если найти скорость счета через время і (2.23):

/л(т) = /д(0)/е.

Отложив на ординате графика затухания люминесценции величину, равную 1 je от начальной скорости счета импульсов [или Ax (0) ], проводим прямую, параллельную оси абсцисс до пересечения с кривой затухания. Время, соответствующее точке пересечения, и есть і, т. е. среднее время жизни возбужденного состояния молекул.

Наилучшим следует признать все же третий метод, так как в нем используются все полученные в опыте значения скорости счета в каждый момент времени. Строится зависимость In /л=/(0 или In (Ал) =/(0- Логарифмирование уравнений (2.23) и (2.24) показывает, что полученные графики представляют собой прямые линии, угол наклона которых к оси абсцисс дает величину 1/т:

In /,(/) = In I11 (О)-//!.

In [A.V (/)] = In [Ах (0)] — Л т.

Часто встречаются случаи, когда в исследуемой системе содержится несколько типов флуоресцирующих молекул, характеризующихся разными значениями т. Тогда кривая затухания люминесценции будет представлять сумму нескольких экспонент:

In I11 (0 = In Z1(O)-I Ю-

49 Для нахождения каждого значения Xj необходимо суммарную кривую разложить на индивидуальные экспоненты.

Рассмотрим кратко принцип метода фазовой флуориметрии. Схема фазового флуориметра приведена на рис. 2.15. Возбуждающий пучок света пропускается через модулирующее устройство М, воздействующее на пучок так, что его мощность после прохождения модулятора меняется с частотой 10— 20 МГц. Эти изменения мощности происходят по простому синусоидальному закону /=/0(1 +mcoswO, где ю — круговая частота модуляции, имеющая значение около IO8 Гц; т — коэффициент глубины модуляции (отношение амплитуды переменной составляющей потока к постоянной составляющей).

Этот модулированный поток света делится прозрачной пластинкой Д на две части: одна (около 8%) отражается от пластинки и действует на ФЭУ-2, в котором возникает ток, меняющийся по описанному закону. Другая, большая часть света, возбуждает флуоресценцию в кювете К, и свет флуоресценции попадает на другой приемник — ФЭУ-1. Свет флуоресценции также будет промодулирован с частотой ю, но так как он задерживается в образце на среднее время жизни т, то фаза модуляции света флуоресценции будет отставать от фазы возбуждающего света на некоторый угол ф. Расчет показывает, что при этом и глубина модуляции несколько меняется для флуоресценции. Таким образом, закон изменения света на приемнике ФЭУ-1 имеет вид /=/0 [1+macos(w/ —ф)], где а<1. При экспоненциальном законе затухания флуоресценции связь между сдвигом фазы ф, множителем а и величиной т проста:
Предыдущая << 1 .. 12 13 14 15 16 17 < 18 > 19 20 21 22 23 24 .. 79 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама