Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Физическая химия -> Владимиров А.А. -> "Физико-химические основы фотобиологических процессов " -> 67

Физико-химические основы фотобиологических процессов - Владимиров А.А.

Владимиров А.А., Потапенко А.Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов — М.: Высшая школа, 1989. — 200 c.
Скачать (прямая ссылка): fizikobiologicheskogo1989.djv
Предыдущая << 1 .. 61 62 63 64 65 66 < 67 > 68 69 70 71 72 73 .. 79 >> Следующая


Низкая интенсивность свечения при реакциях, сопровождающих образование активированного кислорода, и сильная зависимость интенсивности свечения от случайных примесей заставляют использовать для уверенного обнаружения кислородных радикалов в биологических системах химические активаторы хемилюминесценции, из которых наиболее известен 3-аминофталевый гидра-зид — люминол:

172 7 + OH — -NH

NH2 O люминол-анион

OH

vN

Il-

NH2 O

NH2 O

люминол-радикал

супероксид- V. радикал

LOOH

LOO

гидропероксид люминола нелюминесцирующий продукт О"

-N, ""

+ hv

ki = 8,7 ¦ IO M- с" k,= 2-IO3 с"1 k„= 2 -IO5C"1

NH2 О 3-аминофталат

Люминол вступает в прямое химическое взаимодействие с радикалами • ОН и -O2 и, строго говоря, является не активатором свечения, а участником химических реакций. В присутствии -ОН радикалов образуется свободный радикал люминола, который затем вступает в реакцию с супероксидным радикалом, образуя пероксидный радикал. В результате ряда внутримолекулярных перестроек образуется 3-аминофталат в возбужденном электронном состоянии, переход которого в основное состояние сопровождается испусканием кванта света.

Образование радикала люминола и последующие реакции, сопровождающиеся хемилюминесценцией, могут инициироваться не только гидроксильным радикалом, но, по-видимому, и другими радикалами. В частности, отмечалось, что интенсивность хемилюминесценции люминола, добавленного к системе, где генерируются гидро-ксильные и супероксидные радикалы (например, к системе ксантин — ксантиноксидаза), усиливается в присутствии углекислоты. Возможно, что это обусловлено участием в процессе промежуточного карбонильного радикала.

Рассмотрим некоторые примеры применения хемилюминесценции в присутствии люминола.

173 1. Определение геминовых соединений. Смесь люминола с пероксидом водорода добавляют к образцу, содержащему гемино-вые соединения. При этом для высвобождения тема из гемопро-теидов производят предварительную инкубацию биологического материала в щелочной среде, а для удаления примесей негемового железа добавляют избыток ЭДТА. В присутствии гема происходит разложение пероксида водорода с образованием свободных радикалов гидроксила и супероксида; интенсивность хемилюминесценции пропорциональна количеству геминовых веществ в образце. Удается определить доли нг гемоглобина или миоглоби-на в 1 мл раствора. Метод используется, в частности, для определения миоглобина в моче: увеличение содержания миогло-бина наблюдается при инфарктах (И. И. Барон и сотр., 1985).

2. Определение низких концентраций металлов переменной валентности, например ионов железа. Метод аналогичен предыдущему, но данная составляющая общей хемилюминесценции образца угнетается ЭДТА и СОД.

3. Изучение скорости разложения H2O2 биологическим материалом. При добавлении к биологическим объектам — плазме крови, гомогенатам тканей, раневым эксудатам — небольших количеств H2O2 и люминола наблюдается хемилюминесценция, обусловленная свободнорадикальным разложением пероксида водорода (т. е. сопровождающаяся образованием радикалов ¦ ОН и -O2 ), затухающее во времени по мере расходования пероксида. При повторном введении пероксида вспышка хемилюминесценции повторяется. Скорость затухания характеризует суммарную способность объекта разлагать H2O2 и определяется активностью каталазы, пероксидаз и содержанием ионов металлов переменной валентности в образце. Этим методом было, например, показано, что после облучения раневой поверхности светом гелий-неонового лазера происходит усиление нерадикального (каталазного) разложения H2O2 и относительное снижение образования при этом свободных радикалов. Поскольку H2 O2 всегда образуется в очагах воспаления за счет супероксидного радикала, продуцируемого фагоцитами, снижение образования свободных радикалов из H2 O2 после лазерного облучения может лежать в основе известного терапевтического действия лазерного облучения на заживающие раны.

4. Изучение активности фагоцитов. Этот вопрос заслуживает специального рассмотрения.

9.5. Хемилюминесценция при активации фагоцитов

Способностью к фагоцитозу обладают тканевые макрофаги и часть лейкоцитов крови (гранулоциты и моноциты). Напомним содержание лейкоцитов в 1 мкл крови здорового человека (приводится среднее число клеток, в скобках — границы нормы):

174 Гранулоциты:

нейтрофильные эозинофильные базофильные Моноциты Лимфоциты

4150 (712—7588) 165(0—397) 44(0-112) 456(66—846) 2185(1029- 2341)

Гранулоциты (основную часть которых составляют нейтрофи-лы) и моноциты, равно как и макрофаги тканей, наряду с фагоцитозом способны к выделению значительных количеств супероксидных радикалов в ответ на действие активирующих стимулов (рис. 9.5,а, б). В качестве последних могут выступать растительные лектины, фи-тогемагглютинин (ФГА), конконавалин А (Кон-А), компоненты оболочек бактерий, частички промышленных пылей (асбеста, кварца и т.д.), некоторые химические соединения (в частности, полипептиды) и комплексы антиген+антитело. Внешний стимул, приведенный в контакт с фагоцитирующей клеткой, радикально изменяет уровень ее метаболизма, в частности происходит резкое увеличение расхода глюкозы и потребления кислорода (дыхательный взрыв). При этом основная часть потребляемого кислорода восстанавливается до супероксидного радикала в результате реакции
Предыдущая << 1 .. 61 62 63 64 65 66 < 67 > 68 69 70 71 72 73 .. 79 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама