Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 2" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 1" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 12" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 11" (Журналы)

Петрянов-соколов И.В. "Научно популярный журнал химия и жизнь выпуск 10" (Журналы)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Хроматография -> Перри С. -> "Практическое руководство по жидкостной хроматографии" -> 72

Практическое руководство по жидкостной хроматографии - Перри С.

Перри С., Амос Р., Брюер П. Практическое руководство по жидкостной хроматографии — М.: Мир, 1974. — 260 c.
Скачать (прямая ссылка): prakticheskoerukovodstvopojidhromatograf1974.djvu
Предыдущая << 1 .. 66 67 68 69 70 71 < 72 > 73 74 75 76 77 78 .. 106 >> Следующая

Довольно сложно бывает определить положение разделенного вещества. Однако
удивительно, что при рассмотрении пластинки в отраженном свете очень
многие 'бесцветные'' растворенные вещества можно различить в виде
затемненных или опалесцирующих зон. Флуоресцирующие вещества можно
детектировать, рассматривая их под длинноволновым ультрафиолетовым светом
(3660 А), в то время как поглощающие в УФ-области вешества,мож-по
определить по их гасящему эффекту во флуоресцирующем слое на силикагеле
HF254, если пластинку рассматривать в коротковолновое ультрафиолете (2540
А). Если все эти методы потерпят неудачу, тс на одном конце пластинки
следует хроматографировать вещество сваи-
Хроматография в комком слое
181
пения. Оставшаяся часть пластинки закрывается и образец сравно-ш*я
опрыскивается вызывающим появление окраски реагентом, пред" почтительно
тем, который реагирует немедленно и при комнатной температуре. Для этой
цели целесообразно использовать 1%-ный раствор иода в хлороформе. При
проявлении хроматограммы следует избегать появления "краевого* эффекта,
иначе значения Rp пятен ^ в середине пластинки будут ниже, чем Rp
образца, взятого для сравнения. Поэтому проявление необходимо проводить в
С-камере.
Если образец нанесен в виде полосы, то растворенное вешество,
пропитывающее адсорбент, лучше всего удалить с помощью "вакуумного
очистителя", многие варианты которого описаны в литературе, а один из
вариантов показан на рис. 6.13.
Шприц
Пластина для ТСХ
Стеклянная
трубка.
Ацетон
Силикагель
Иьла.
КВг
Ри с. 6.13. Устройство для удаления адсорбента с пластинки для ТСХ.
Рис. 6.14. Прибор для переноса пятна образца с адсорбента на КВг [46].
Выделение и идентификация небольших ( < 10 мгк) образцов проводятся
следующим образом: 40 мкл 5%-ного раствора образца наносят в виде
короткой полосы (2 см) на пластинку для ТСХ рлимк-ром 5x20 см, покрытую
силикагелем HR с толщиной слоя 7ПО м"м;
2 мкл 1%-ного раствора того же образца хроматографируют рнп^м и
используют для сравнения. Хроматограмму проявляют в ('-""мир", применяя
подвижную фазу, содержащую менее чем 10-4 'X, мслктуш ГО остатка, и
хроматограмму сравнения (2 мкл образца) ощн.п импи раствором иода, чтобы
можно было указать иодожпмио \и\ ниитм
182
Глааа 6
ной полосы в большом образце. Полоса вещества, подлежащего исследованию,
соскабливается микрошпателем, помешается поверх небольшого количества
порошка КВ г в канюле иглы оля шприца и утрамбовывается (рис. 6.14). КВг
служит в качестве фильтра для предотвращения прохождения мелкого
силикагеля через иглу. Стеклянные шприц емкостью 1 мл заполняется чистым
ацетоном, соединяется с иглой, и вещество элюируют по каплям. Обычно,
чтобы вымыть все растворенное вещество, достаточно примерно 20 капель.
6.13. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ МЕТОДОВ
6.13.1. Спектрофотометрия
Спектрофотометрия является наиболее обшим методом, используемым в ТСХ,
поскольку спектрофотометр входит в стандартное оборудование, имеющееся в
большинстве лабораторий. По сравнению с денси том (c)три ей это более
длительный и трудоемкий метод; чтобы исключить загрязнения и получить
воспроизводимые извлечения, необходимо быть очень внимательным. Тем не
менее во многих статьях указывается, что пределы стандартных отклонений
составляют 3-5%, а в некоторых случаях даже меньше. Сравнивая
спектрофотомет-рию с денситометрией, некоторые исследователи пришли к
выводу, что точность этих двух методов одинакова /49, 50/.
При выборе размера начального образца учитывают чувствительность метода,
т.е. коэффициент погашения и длину ячейки, и пределы концентрации, в
которых выполняется закон Ламберта - Вера. Хроматограмму проявляют
обычным способом, определяют положенин разделенного вещества и адсорбент
переносят в зависимости от его количества в одно из устройств для
вымывания, описанных в разд. 6.12.4, Вещество вымывают чистым летучим
растворителем в круглодонную склянку емкостью 5 мл, из которой
растворитель удаляют осторожным испарением на водяной бане в токе азота.
Вещество вновь растворяют, но в таком растворителе, который не
препятствует последующему спектрофотометрическому определению. Раствор
переносят, используя для этого медицинский шприц, в мерную колбу,
добавляют, если нужно, окрашивающий реагент и доводят объем до
необходимого. О том, как проводятся колориметрические измерения, подробно
говорится в стандартных методиках спектрофо-гометрического анализа, см.,
например, работу /51/. Концентрацию разделенного вещества в исходном
образце определяют после установления соотношения между поглощением и
весом вещества в растворе сравнения.
Преимущество спектрофотометрии обусловлено тем, что форма кривой
поглощения может служить основой для идентификации разделённого вещества.
Ошибки определения вызываются главным образом присутствием загрязнений
(т.е. в основном веществами, содержапш-
Хроматографы* в тонком слое
183
в адсорбенте), неполным извлечением, а также тем обстоя-аом, что
Предыдущая << 1 .. 66 67 68 69 70 71 < 72 > 73 74 75 76 77 78 .. 106 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама