Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Органическая химия -> Кочетков Н.К. -> "Химия природных соединений" -> 184

Химия природных соединений - Кочетков Н.К.

Кочетков Н.К., Торгов И.В., Ботвиник М.М. Химия природных соединений — К.: Наука, 1960. — 561 c.
Скачать (прямая ссылка): himiyaprirodnihsoedineniy1960.djvu
Предыдущая << 1 .. 178 179 180 181 182 183 < 184 > 185 186 187 188 189 190 .. 203 >> Следующая


Ферментативный гидролиз проходит в мягких условиях и не сопровождается вторичным распадом аминокислот. К числу недостатков этого метода можно отнести возможный вторичный синтез пептидов.

Наиболее специфичным из ферментов является трипсин. Он расщепляет только пептидные связи, образованные карбоксилом аргинина и лизина. Его действие можно еще более ограничить, если динитрофени-лировать е-аминную группу лизина. Химотрипсин расщепляет связи, образованные ароматическими аминокислотами. Недавно было обнаружено, что он гидролизует и лейциновые пептиды. Менее специфичны папаин, пепсин и субтилизин. Последний позволяет, однако, получать смесь низкомолекулярных пептидов, что часто оказывается удобным при исследованиях.

Частичный гидролиз белка является самым несовершенным звеном в определении строения молекулы белка. Как уже отмечалось выше, кислотный гидролиз может привести к образованию вторичных продуктов распада, а ферментативный — вызвать вторичный синтез пептидов. Более совершенными были бы методы, позволяющие устанавливать строение белка без предварительного гидролиза. К таким методам относятся упомянутое выше последовательное отщепление аминокислотных остатков.

Н. И. Гаврилов предложил проводить электровосстановление белка. Им и Т. И. Орловой было показано на моделях, что пептидная связь восстанавливается только в том случае, если она образована проли-ном. Связанная с пролином аминокислота превращается в аминоспирт, который можно выделить после гидролиза остальной пептидной цепи.

CH3-СН—CONH-CH-COOH

CO-NH

—CONHCH(R)—CO -

.. . NHCH(R)-CO-N

. . . NHCH(R)CH2OH +

—CONHCH(R)—CO . . .

4^h
В результате частичного гидролиза белка образуется сложная смесь пептидов. Она значительно сложнее, чем гндролизат, состоящий из одних аминокислот, как по количеству возможного числа обломков,

Схема

фракционированного разделения смеси пептидов, полученных из химотрипсиногена

Частичный гидролнзат

Пятикамерный электрофорез ^

/

/

Основные пептиды

\

Многокамерный

электрофорез

Электрофорез на бумаге

I

Хроматография на бумаге \

\

\

\

Хроматография на бумаге

\

\

Ионит Дауэкс-50

•к

Нейтральные пептиды

Окисление

HCO3H

I

Пятикамерный

электрофорез

I \

\

Кислые

пептиды

I

Нейтральные

пептиды

\

\

\

Цнстеиновые

пептиды

Хроматография на

\

Индивидуальные пептиды

бумаге

Схема

определении строения молекулы белка

---------------Белок---------------

I

определение аминокислотного состава

і

определение числа пептидных цепей

і

HCOOOH раскрытие S — S-мостиков

-----> частичный гидролиз

гндролизат, смесь пептидов

-----------> разделение на фракции

-фракции пептидов------------

I

определение

аминокислотного

состава

I

определение последовательности ам инокислотных остатков

воссоздание пептидной цепи

51

так и по их составу. Неудивительно поэтому, что до создания новых методов исследования — до 1942 г. число выделенных и идентифицированных пептидов было очень мало.

Для предварительного разделения пептидов на фракции часто применяют так называемый четырех- или пятикамерный электрофорез. Он позволяет отделить основные, кислые н нейтральные пептиды друг от друга. Каждую из фракций можно подвергнуть затем разделению яри помощи ионообменной хроматографии, микропрепаративным электрофорезом на бумаге или противоточным распределением, ограничиваясь при этом несколькими миллиграммами вещества. В качестве примера представлена схема разделения химотрипсиногена, проведенная LIJop-мом с сотрудниками (см. схему на стр. 517). Прекрасные результаты дает метод Хирса, Мура и Штейна— автоматическое разделение пептидов на смоле Дауэкс-50. Строение пептидов, полученных в результате разделения, устанавливают«-описаиными выше методами.

На схеме (стр. 517) представлен современный метод установления строения белка.

Сопоставляя затем найденные пептиды, исследователь воссоздает рисунок строения изучаемого белка. Пример такой реконструкции представлен на рис. 7 для фенилаланиновой цепи инсулина.

ЛИТЕРАТУРА

Кнунянц И. Л., Первова Е.Я/'бинтез пептидов. Усп хим., 1955, 24, 641.

Ф рут он И. Синтез пептидов. В сб. Химия белка, т. 2. ИЛ, 1952, стр. 186 Bamford С., Elliott A., Hanby W. Synthetic Polypeptides. London, 1956 Bergmann М., Mickeley A Umlagerung peptidahnlicher Stoffe. Z. Physiol Chem , 1924, 140, 128.

Brenner М., Hartmann A Peptide der Hydroxyaminosauren; spezielle Probieme. Proceedings of the Symposium of Methods of Peptide Synthesis. Coll. of Czechoslov. Chem. Comm., 1958, 24, 126.

Goodman M., Kenner G. W. The Synthesis of peptides. Advances in Protein Chemistry, 1957, 12, 465.

Proceedings of the Symposium on Methods of Peptide Synthesis. Coll. Czechoslov. Chem Comm., 24, 1959, I—160.

Schwyzer R. Ammoacids and Peptides with antimetabolic and cytotoxic properties.

Symposium Ciba, 1958.

Schwyzer R. Synthesen von Polypeptid — Wirkstoffen Chemie, 1958, 12, 53. Wieland Th. Peptidsynthesen. Angewandte Chemie, 1957 , 71, 471.
Предыдущая << 1 .. 178 179 180 181 182 183 < 184 > 185 186 187 188 189 190 .. 203 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама