Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Органическая химия -> Кочетков Н.К. -> "Химия природных соединений" -> 99

Химия природных соединений - Кочетков Н.К.

Кочетков Н.К., Торгов И.В., Ботвиник М.М. Химия природных соединений — К.: Наука, 1960. — 561 c.
Скачать (прямая ссылка): himiyaprirodnihsoedineniy1960.djvu
Предыдущая << 1 .. 93 94 95 96 97 98 < 99 > 100 101 102 103 104 105 .. 203 >> Следующая


Далее в полученном новом полимере (XIII) можно, подвергнув его действию специфического фермента, отщепить обнаруживающуюся новую З'-фосфатную группу, не затрагивая всей полимерной цепи. При этом в следующем нуклеотиде снова обнажается а-гликольная группировка и, повторив весь цикл, снова можно отщепить следующий нуклеотид и т. д. Этот метод представляет несомненный интерес, хотя до сих пор он и не нашел серьезного применения в практике, что связано, скорее всего, с его относительной сложностью и многостадийностью.

253
Прием, предложенный Тоддом и Брауном для деструкции полирибо-нуклеотидов, естественно, непригоден для деструкции полидезоксирибо-нуклеотидов, так как последние не содержат а-гликольной группировки, хотя принципы, примененные в первом случае, могут быть использованы для деструкции цепи ДНК *.

В 1958 г. Хорана предложил для последовательной деструкции іполи-дезоксирибонуклеотидов использовать избирательный ферментативный гидролиз. Были найдены два специфических фермента, которые избирательно расщепляли З'-б'-связь дизамещенного эфира по месту связи Cc3)—О или С'сз)—C'fs) — О. Фосфодиэстераза селезенки расщепляла эту связь по месту С(5)—О, оставляя С'(з) -фосфат, диэстераза змеиного яда — связь С'(3) —О, оставляя С'(5)-фосфат. Так как в полимерной цепи ДНК или соответствующего олигонуклеотида с одного края всегда находится нуклеотид CO свободной С'(3)-гидроксильной группой, а с другой стороны цепь заканчивается нуклеотидом со свободным С'(Г)-гидроксилом, то, очевидно, можно, действуя тем или иным ферментом, последовательно разрушать цепь с одного из ее концов, идентифицируя отщепляющиеся мононуклеотиды с помощью бумажной хроматографии.

диэстераза диэстераза

змеиного яда селезёнки

Этот прием кажется весьма удобным с практической точки зрения, хотя пока кратко сообщалось только об использовании его при изучении распада синтетического гомополимера — политимидиловой кислоты, и поэтому о его реальном значении трудно еще судить.

Как всегда при выяснении строения сложного органического соединения, в том числе и специфического полимера, можно идти и синтетическим путем, т. е. получать соединения с заранее заданным строением, и, сравнивая их с веществами природного происхождения, (выносить суждение о строении последних. При определении строения полинуклеотидов речь должна идти о синтезе специфических олигонуклеотидов, т. е. таких, в которых имеется совершенно определенная заданная последовательность мононуклеотидных звеньев. Рассмотренный выше метод неспецифической полимеризации мононуклеотидов (стр. 251) для этой цели непригоден, так как необходимо иметь метод, который позволил бы создать цепь постепенно, наращивая мононуклеотидные звенья в нужном порядке.

Эти задачи сводятся в сущности к последовательному фосфорилиро-ванию нуклеозидов, причем фосфорилирующим агентом должен служить нуклеотид, 'который тем самым займет соседнее место в создающейся полинуклеотидной цепи. Поскольку методы фосфорилирования в настоящее время развиты достаточно хорошо, то главной задачей при разработке методов синтеза полинуклеотидов является осуществление изби-

* В I960 г. Тоддом найдена реакция, которая может оказаться полезной для последовательной деструкции ДНК. Каталитическим окислением СН2ОН-группы дезоксину-клеотнда получается кислота, в которой СООН-группа находится в (5-положении к фосфорноэфирной связи, вследствие чего последняя может избирательно расщепляться.

DZA
рательной защиты нужных гидроксильных групп в подлежащих конденсации нуклеотидах. На специфические трудности этой задачи уже указывалось ранее (стр. 224). Очевидно, эта проблема значительно проще решается для дезоксирибонуклеотидов, не имеющих гидроксильной группы у С' с2)-атома. Путь синтеза олигодезоксину.клеотидов, /пока, правда, осуществленный только для динуклеотидов, но имеющий более общее значение, был предложен в 1958 г. Хораной. На примере синтеза дитимидина, содержащего 3'—5'-связь и аналогичного тем саэдым природному нуклеотиду, этот путь может быть изображен схемой:

О

T T

XIV XV

AcO

-ОН

'0-

CH2O-о'

,он

'-о

CH2OC(CeH5)3 о

XVI

1 Kr CH^OH Cr

—/ \ HO-I? \

о о

о-

NH

^OH

^o

XIX

XVII

1) (CeH5CH2O)2POCl

2) H4/PI 31 н’

CH2OC(CeH5)s

о

1) (CfiHbCH2O)2POCI

2) H2ZPl

КДИ — дициклогексилкарбодиимид, T — остаток тимина. З'-Ацетилтими-дин-5'-фосфат (XIV) при конденсации с З'-тритилтимидином (XV), которая протекает в присутствии карбодиимида или толуолсульфохлорида в пиридине, дает вещество (XVI), гидроксильные группы которого полностью. но специфично замещены. Вещество (XVI) является ключевым
исходным соединением для синтеза обоих изомерных динуклеотидиь. Так, снятием ацетильной группы действием аммиака получаются (XVII) с защищенным гидроксилом у С'(5), фосфорилирование которого дибен-зилхлорфосфатом дает дитимидин (XVIII), содержащий фосфатную группу у С'(3). Напротив, если (XVI) подвергнуть обработке кислотой, то снимается тритильная защита и в образующемся соединении (XIX) свободная гидроксильная группа у С'^ может быть тем же методом профосфорилирована; после снятия защиты получается другой изомер дитимидина, который содержит фосфатную группу у C7(S) (XX).
Предыдущая << 1 .. 93 94 95 96 97 98 < 99 > 100 101 102 103 104 105 .. 203 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама