Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 107

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 101 102 103 104 105 106 < 107 > 108 109 110 111 112 113 .. 185 >> Следующая

9.8Л. (Тушение мембранно-йвязанмых фпуорофоров киспородом
Прежде чем детально обсуждать, как влияют распределения между водой и липидом на тушение, полезно рассмотреть тушение, вызываемое слабо распределяющимся тушителем - кислородом. Тушение кислородом 2-метил антрацена - неполярного соединения, концентрирующегося в мембранах в области ацильных заместителей, в везикулах димиристоил- и дипальмитоилфосфати-дилхолина, приведено на рис. 9.20. В условиях эксперимента (31 °С) везику-
с кислорода 7 м
РИС. 9.20. Г рафичвское представление тушения 2-метил антрацен а кислородом в липидных бислоях.
(С разрешения автора работы [ 45.1 и Elsevier Biomedical Press.)
лы DMPC находятся выше температуры фазового перехода (Т_ = 24°С), а везикулы DPPf’ - ниже их Т (!!7 °С). В соответствии с оценками, полученны-. ми из стационарной анизотропии DPII (см. рис,, 5.12), микровязкость DMPC и DPPC составляет 0,98 - 8,2 II соответственно. Однако фазовое состояние бислоев оказывает только двукратное влияние на тушение кислородом (рис. 9.20). Волее того, константы тушения заметно больше, чем предсказываемые на основании уравнения Стокса и Эйнштейна [уравнение (9.13)3- Для вязкости порядка 4 П по этому уравнению и уравнению Смолуховского [ (9.11)] получается диффузионно-контролируемая константа 0,00025 • :Ю10 М*"’. с""1 в отличие от наблюдаемого значения 0,3 - ,1010 М“1 - с“1. Эти результаты показывают, что любые значения микровязкости зависят от особенностей молекулярных движений в процессах, которые использованы для определения микровязкости. В подобных случаях малые молекулы кислорода могут диффундировать быстрее, чем что оценивается на основании данных по вращательной диффузии боль ших молекул DPH.
Точная интерпретация приведенных на рис. 9.20 констант бимолекулярного тушения кислородом ограничена отсутствием сведений о растворимости тушителя в мембране. Эффективные концентрации тушителя, приведенные на ри* сунке, были вычислены в предположении, что коэффициент распределения кис-
лорода между водой и липидом составляет 6,48 и что это значение по зависит от фазового состояния бислоев. Интересно рассчитать проницаемость липидных мембран для молекулярного кислорода с учетом этих предположений. Проницаемость Р бислоя может быть аппроксимирована выражением Р= KDf Дх (9.: 17)
где D - коэффициент диффузии; К - коэффициент распределения; Д% - толщина мембраны. Бимолекулярные константы тушения 2-МЛ составляют 1/5 диффузионно-контролируемого значения. Так как коэффициент распределения между липидом и водой также ~ 5, то по уравнению (9.37) получается, что липидные бислои в той же степени проницаемы для кислорода, как и слой йоды эквивалентной толщины [34]. Следовательно, эти биологические структуры не затрудняют диффузионного транспорта кислорода.
9.8.8. Метод определения диффузии и коэффициентов распределения тушителей по тушению мембранно-связанных флуорофоров
Диффузионное тушение мембранно-связанных флуорофоров очень полез* но при исследовании диффузий и распределения малых молекул в мембранах. Достоинства метода состоят в следующем:
1. Целый ряд молекул, представляющих биологический интерес, могут служить диффузионными тушителями. Например, ароматические амины, многие из которых являются местными анестетиками, тушат флуоресценцию апт-роильных производных жирных кислот. Карбазол и его алкильные производные тушатся многочисленными хлорированными углеводородами [ 18]инейротокси-ном - хлоридом метилртути [ 17]. Другие примеры описаны в разд. 9.1. Благодаря такому разнообразию исследователи не ограничены специальными случаями, например, образованием эксимеров пирена.
2. Благодаря областям локальной неупорядоченности, создаваемым флуо-рофорами, наблюдаемые спектральные параметры могут в первую очередь отражать возмущенную область бислоя. Тушение происходит после диффузии тушителя на расстояние 10 - 1000 А, т.е. через невозмущенную область бислоя.
Зо Константы динамического тушения отражают частоту столкновений между зондом и тушителем» Так как эта частота пропорциональна локальной концентрации тушителя, то можно получить информацию и о скорости тушения, и о коэффициенте распределения тушителей между липидом и водой»
При интерпретации данных по тушению, получаемых для мембранно-свя-занных флуорофоров, возникает проблема, с которой не сталкиваются в гомогенных растворах. В общем случае концентрация малых гидрофобных молекул в мембране и водной фазе неизвестна» Для гидрофобных тушителей и мембранно-связанных флуорофоров при интерпретации данных по тушению не-
обходимо отличать скорость диффузии тушителя от эффекта его распределения между липидом и водой. К счастью, это возможно» Более того, тушение позволяет найти коэффициент распределения между липидом и водой.
9.8.8.1. Тушение при столкновениях тушителем, предпочтительно распределенным в одной из фаз
Рассмотрим тушитель, распределенный между мембраной и водной фазой., В ненасыщенных растворах тушителя его концентрации в водной (вод) и .мембранной (м) фазах связаны коэффициентом распределения: р-
Предыдущая << 1 .. 101 102 103 104 105 106 < 107 > 108 109 110 111 112 113 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама