Главное меню
Главная О сайте Добавить материалы на сайт Поиск по сайту Карта книг Карта сайта
Книги
Аналитическая химия Ароматерапия Биотехнология Биохимия Высокомолекулярная химия Геохимия Гидрохимия Древесина и продукты ее переработки Другое Журналы История химии Каталитическая химия Квантовая химия Лабораторная техника Лекарственные средства Металлургия Молекулярная химия Неорганическая химия Органическая химия Органические синтезы Парфюмерия Пищевые производства Промышленные производства Резиновое и каучуковое производство Синтез органики Справочники Токсикология Фармацевтика Физическая химия Химия материалов Хроматография Экологическая химия Эксперементальная химия Электрохимия Энергетическая химия
Новые книги
Сидельковская Ф.П. "Химия N-вннилпирролидона и его полимеров" ()

Сеидов Н.М. "Новые синтетические каучуки на основе этилена и олефинов" (Высокомолекулярная химия)

Райт П. "Полиуретановые эластомеры" (Высокомолекулярная химия)

Попова Л.А. "Производство карбамидного утеплителя заливочного типа" (Высокомолекулярная химия)

Поляков А.В "Полиэтилен высокого давления. Научно-технические основы промышленного синтеза" (Высокомолекулярная химия)
Книги по химии
booksonchemistry.com -> Добавить материалы на сайт -> Другое -> Лакович Дж. -> "Основы флуоресцентной спектроскопии" -> 108

Основы флуоресцентной спектроскопии - Лакович Дж.

Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии — М.: Мир, 1986. — 496 c.
Скачать (прямая ссылка): osnovifluriscentnoyspektroskopii1986.djv
Предыдущая << 1 .. 102 103 104 105 106 107 < 108 > 109 110 111 112 113 114 .. 185 >> Следующая

Общая концентрация добавленного тушителя [ Q распределяется между водной и мембранной фазами в соответствии с уравнением
I «обиЛси, I «'Л ' 1 «U/воя
где V - объемы различных фаз.
Введя понятие объемной доли мембранной фазы
(S-Of»
получаем для мембранной концентрации тушителя Р\ 01
[Ц| . ойш..........._ (9.41)
'“«¦е -«*)
Подстановка этого выражения в уравнение Штерна - Фольмера дает
1 - 1 Ам Р[ Шобщ 1
ь ......п ~ " 4 каж^^общ ( )
т0 Р«м"(1-ам) т0
где Л - бимолекулярная константа тушения для мембранно-связанного флуорофора. Кажущаяся константа тушения представляется в следующем виде:
о ! ) + -I— (9.43)
k м\к кР кР
каж мм м
Когда флуорофор находится в мембранной фазе, кажущаяся константа тушения зависит от Р, а и k . График зависимости к~' от a позволяет аире-
ММ КаЖ М
делить Ри км. Таким образом, с помощью метода тушения одновременно определяются и степень, с которой тушитель распределяется в бислое, и скорость его диффузии в этом бислое.
Приведенный выше метод определения коэффициента распределения вода - липид применяется только тогда, когда тушеиие происходит за счет
столкновений с молекулами тушителя, присутствующими в бислое в момент возбуждения* Если в таких столкновениях участвуют и молекулы тушителя, находившиеся в водной фазе, которые диффундируют в липидную фазу в течение времени пребывания в возбужденном состоянии, то кажущееся тушение не должно зависеть от концентрации липида. Эта ситуация, когда тушение происходит как в водной, так и в липидной фазах, является более сложной.
9.8.8.2. Распределение неполярного тушителя между водой и везикулами DMPC
На примере тушения меченного карбазолом фосфолипида в везикулах DMPC у-гексахлорциклогексаном (линданом) [36] можно показать применимость уравнения (9,43), В этом случае тушение было определено по измерению времен затухания, что гарантировало наблюдение только динамического тушения,, Большее тушение было обнаружено при низких концентрациях липида (рис. 9.21), когда добавление того же общего количества линдана приводит к его более высокой концентрации в мембране. Это происходит вследствие малого количества липида, в котором может растворяться тушитель в соответствии с коэффициентом распределения. Именно такая зависимость кажущей-
С линдаи1даб, мм
РИС. 9.21. Зависимость времени затухания флуоресценции (3-11-(9-карбазол)унде-каноилфосфатидилхолина, связанного с везикулами DMPC в присутствии линдана, от концентрации линдана.
(С разрешения авторов работы [зб] И Elsevier Biomedical Press.)
ВО
10
А,
о
Р = 3SOO
Отсекаемый
О
Ot00f
0,002
0,003
ос
РИС. 9.22. Г рафическое определение коэффициентов диффузии и распределения линдана в везикулах DMPC,
(С разрешения авторов работы [Зб] и Elsevier Biomedical Press.)
ся константы тушения от концентрации липида позволяет найти коэффициенты распределения. Для этого строят график зависимости от [<2!общ (рис. 9.22). Так как коэффициент распределения велик, то наклон приблизительно равен k~ \ Отсекаемый отрезок составляет ~ (kP)~~\ Из этих дан-м м
ных можно легко вычислить, что линдаи распределяется в везикулах DMPC с коэффициентом 9500.
Для успешного применения описанной методики необходимо, чтобы диапазон концентраций липида укладывался в диапазон частичного распределения добавленного тушителя. Доля тушителя, связанного с мембраной (/ ), дается выражением
Для случая, представленного на рис. 9.22, f изменяется от 0,49 до 0,98.
-
Если коэффициенты распределения превышают 10*, необходимы более разбавленные суспензии мембран.
9.8.9. Влияние вязкости на эффективность тушения
В некоторых случаях, например для мембранно-связанных флуорофоров и тушитпле!Й, желательно использовать наблюдаемые бимолекулярные коио-
(9.44)
танты тушения для вычисления коэффициента диффузии тушителя» Для этого должна быть известна эффективность тушения v и необходимо, чтобы эта эффективность была одинакова по всех исследуемых образцах. Так, эффективность тушения для конкретной комбинации флуорофор - тушитель можно вычислить из экспериментов в растворах с известной вязкостью. Затем тушение этого же флуорофора может быть изучено, когда он связан с мембраной или белком. Иногда изменение вязкости может приводить к изменению эффективности тушения. Зависимость у от вязкости можно пояснить следующим образом» Рассмотрим схему реакции
Предыдущая << 1 .. 102 103 104 105 106 107 < 108 > 109 110 111 112 113 114 .. 185 >> Следующая

Авторские права © 2011 BooksOnChemistry. Все права защищены.
Реклама